副猪嗜血杆菌的分离鉴定及间接ELISA检测抗体方法的优化
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-34页 |
| ·引言 | 第12-13页 |
| ·副猪嗜血杆菌生物学特性 | 第13-16页 |
| ·病原学研究进展 | 第13-15页 |
| ·流行病学研究进展 | 第15-16页 |
| ·感染动物模型研究进展 | 第16-18页 |
| ·分型方法研究进展 | 第18-23页 |
| ·血清学分型 | 第19-20页 |
| ·分子生物学分型 | 第20-23页 |
| ·诊断方法研究进展 | 第23-26页 |
| ·临床症状及病理变化学诊断 | 第23-24页 |
| ·血清学诊断的研究 | 第24页 |
| ·免疫组织化学方法的诊断 | 第24-25页 |
| ·分子生物学检测方法的研究 | 第25-26页 |
| ·致病因子与致病机理研究 | 第26-30页 |
| ·致病因子 | 第26-28页 |
| ·致病机理 | 第28-30页 |
| ·防控与治疗的研究 | 第30-32页 |
| ·合理的饲养管理 | 第30页 |
| ·免疫与疫苗的研究 | 第30-32页 |
| ·药物防治 | 第32页 |
| ·小结 | 第32-34页 |
| 2 副猪嗜血杆菌的分离鉴定与保存 | 第34-45页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·病料来源 | 第34-35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要培养基的制备 | 第35-36页 |
| ·主要溶液的配制 | 第36页 |
| ·主要实验仪器 | 第36-37页 |
| ·引物 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·涂片镜检 | 第37页 |
| ·HPS的分离 | 第37页 |
| ·革兰氏染色镜检 | 第37-38页 |
| ·卫星(CAMP)试验 | 第38页 |
| ·生化鉴定 | 第38页 |
| ·分离菌株PCR检测 | 第38页 |
| ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳及检测 | 第38-39页 |
| ·药敏试验 | 第39页 |
| ·动物实验 | 第39页 |
| ·血清型鉴定 | 第39-40页 |
| ·实验结果 | 第40-44页 |
| ·患病猪病变组织特征及涂片镜检结果 | 第40页 |
| ·菌落特征与细菌形态镜检结果 | 第40-41页 |
| ·星试验结果 | 第41页 |
| ·生化实验结果 | 第41-42页 |
| ·分离菌株PCR鉴定 | 第42-43页 |
| ·药敏试验结果 | 第43页 |
| ·动物实验结果 | 第43-44页 |
| ·血清型鉴定结果 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 3 副猪嗜血杆菌分离株的生长曲线的测定 | 第45-50页 |
| ·实验材料 | 第45-47页 |
| ·实验菌株 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·主要培养基的制备 | 第46页 |
| ·主要溶液的配制 | 第46-47页 |
| ·主要实验仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47页 |
| ·副猪嗜血杆菌生长曲线的测定 | 第47页 |
| ·副猪嗜血杆菌在不同溶液中的生存时间测定 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-49页 |
| ·副猪嗜血杆菌生长曲线的测定结果 | 第47-49页 |
| ·副猪嗜血杆菌在不同溶液中生存时间的测定结果 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 4 副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA方法的优化 | 第50-61页 |
| ·实验材料 | 第50-52页 |
| ·实验菌株 | 第50-51页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要培养基的制备 | 第51页 |
| ·主要溶液的配制 | 第51-52页 |
| ·主要实验仪器 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-56页 |
| ·HPS血清的制备 | 第52-53页 |
| ·ELISA抗原的制备 | 第53-54页 |
| ·间接ELISA操作方法 | 第54-55页 |
| ·ELISA反应条件的判定 | 第55-56页 |
| ·特异性实验 | 第56页 |
| ·敏感性实验 | 第56页 |
| ·重复性试验 | 第56页 |
| ·临床应用 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-60页 |
| ·超生破碎抗原的浓度测定 | 第56页 |
| ·抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释倍数的确定 | 第56-57页 |
| ·酶标二抗最佳稀释度的确定 | 第57页 |
| ·阴阳性临界值的测定 | 第57-58页 |
| ·抗原最佳包被时间的判定 | 第58页 |
| ·封闭时间的判定 | 第58页 |
| ·抗原抗体最佳作用时间的判定 | 第58-59页 |
| ·酶标二抗最佳作用时间的判定 | 第59页 |
| ·底物的最佳显色时间 | 第59页 |
| ·特异性实验结果 | 第59页 |
| ·敏感性实验结果 | 第59-60页 |
| ·重复性实验结果 | 第60页 |
| ·临床应用结果 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
