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蜜蜂和植物花螺原体的分离、鉴定及致病性研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-15页
第一部分 文献综述第15-40页
 螺原体的分类、进化及宿主特异性研究概况第15页
 引言第15页
 一、螺原体的分类第15-21页
  1. 螺原体高级分类单元的变化第15-16页
  2. 螺原体种的概念和属内分类第16-18页
  3. 螺原体分类鉴定的最小标准第18-20页
  4. 螺原体的多相分类第20-21页
 二、螺原体之间的进化关系第21-26页
  1. 螺原体和其它真细菌之间的进化关系第21-22页
  2. 螺原体属内的进化关系第22-26页
   ·Ixodetis进化枝第23页
   ·Citri-Chrysopicola-Mirum进化枝第23-24页
   ·Apis进化枝第24-25页
   ·Mycoides-Entomoplasmataceae进化枝第25-26页
 三、螺原体的宿主范围及与宿主的相互关系第26-28页
  1. 昆虫病原菌第26-27页
  2. 植物病原菌第27-28页
  3. 无脊椎动物病原菌第28页
  4. 脊椎动物病原菌第28页
 四、植物、昆虫和花螺原体的关系第28-30页
 五、螺原体的宿主特异性第30页
 六、我国螺原体的研究概况第30-32页
 参考文献第32-40页
第二部分 实验内容第40-91页
 第一章 蜜蜂和植物花螺原体的分离、培养及其基本生物学特性研究第40-51页
  前言第40-41页
  1 材料和方法第41-44页
   ·培养基的配制第41页
   ·螺原体的分离及纯化第41-42页
     ·蜜蜂螺原体的分离第41-42页
     ·植物花螺原体的分离第42页
     ·分离菌株纯培养物的获得第42页
   ·分离菌株的滤过性第42页
   ·分离菌株形态及运动性观察第42-43页
     ·固体菌落形态观察第42页
     ·电子显微镜下菌体形态观察第42-43页
     ·分离菌株运动性观察第43页
   ·分离菌株生理特性研究第43-44页
     ·生长对血清的需求第43页
     ·葡萄糖的利用第43页
     ·尿素的利用第43-44页
     ·精氨酸的利用第44页
   ·分离菌株对青霉素的抗性第44页
   ·分离菌株的保存第44页
  2 结果与分析第44-48页
   ·螺原体的分离及纯化第44-46页
     ·蜜蜂螺原体的分离及纯化第45页
     ·植物花螺原体的分离第45-46页
   ·分离菌株的滤过性、运动性及形态第46-47页
   ·分离菌株的生理特性研究及对青霉素的抗性第47-48页
   ·分离菌株的保存第48页
  3 讨论第48-49页
  参考文献第49-51页
 第二章 蜜蜂螺原体不同生长期形态多样性及特殊结构的研究第51-62页
  前言第51-52页
  1 材料与方法第52-53页
   ·供试菌株第52页
   ·蜜蜂螺原体M10的计数及生长曲线的测定第52-53页
  2 结果第53-58页
   ·螺原体M10的生长特性第53页
   ·不同生长期螺原体M10的形态多样性第53-57页
   ·螺原体的尖端结构及圆端结构第57-58页
   ·螺原体的纤毛状结构第58页
  3 讨论第58-60页
   ·不同生长时期蜜蜂螺原体的形态多样性第58-59页
   ·螺原体的尖端结构第59页
   ·蜜蜂螺原体的纤毛状结构第59-60页
  参考文献第60-62页
 第三章 蜜蜂及植物花螺原体的系统发育分析第62-77页
  前言第62-63页
  1 材料和方法第63-67页
   ·供试菌株第63页
   ·螺原体总DNA的提取第63-64页
   ·相关序列的PCR扩增第64页
   ·相关序列的克隆测序第64-66页
     ·PCR扩增产物的回收第64-65页
     ·目的DNA片断和载体的连接第65页
     ·感受态大肠杆菌的制备第65页
     ·目的基因的转化第65-66页
     ·转化子的验证第66页
     ·少量质粒的提取第66页
     ·目的基因的测序第66页
   ·序列分析第66-67页
  2 结果与分析第67-73页
   ·螺原体总DNA的提取第67页
   ·目的基因片断的PCR扩增、扩增产物的回收和克隆第67-69页
   ·测序和比对第69-70页
   ·系统发育分析第70-73页
  3 讨论第73-75页
  参考文献第75-77页
 第四章 蜜蜂和植物花螺原体的致病性及药敏性研究第77-91页
  前言第77-78页
  1 材料和方法第78-80页
   ·供试菌株第78页
   ·蜜蜂和植物花螺原体对意大利蜂的感染和再分离第78-79页
   ·螺原体致病性的分子生物学检测第79页
   ·螺原体药敏性研究第79-80页
     ·所用抗生素第79页
     ·菌悬液制备第79页
     ·药物配制第79页
     ·MIC(生长抑制最低浓度)值及MBC(最低致死浓度)值的测定第79-80页
  2 结果与分析第80-87页
   ·蜜蜂和植物花螺原体对意大利蜂的感染和再分离第80-81页
   ·螺原体致病性的分子生物学检测第81-85页
   ·螺原体的药敏性研究第85-87页
  3 讨论第87-88页
  参考文献第88-91页
综合讨论第91-95页
全文结论第95-97页
攻读硕士期间发表的学术论文第97-98页
致谢第98页

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