海洋中稻瘟病拮抗菌的分离、发酵优化及其活性成分分析
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-38页 |
| 1. 水稻稻瘟病概述 | 第13-21页 |
| ·稻瘟病菌 | 第14-18页 |
| ·稻瘟病菌的生理分化研究 | 第15-16页 |
| ·稻瘟病菌侵染机理研究 | 第16-17页 |
| ·稻瘟病菌致病毒素研究 | 第17页 |
| ·稻瘟病菌相关基因研究 | 第17-18页 |
| ·稻瘟病防治 | 第18-21页 |
| ·水稻-稻瘟病菌互作关系研究 | 第19页 |
| ·水稻抗稻瘟病育种研究 | 第19-20页 |
| ·化学杀菌剂研究 | 第20-21页 |
| ·生物农药研究 | 第21页 |
| 2. 生防微生物 | 第21-29页 |
| ·生防微生物种类 | 第22-25页 |
| ·生防细菌 | 第22-23页 |
| ·生防真菌 | 第23-24页 |
| ·生防放线菌 | 第24页 |
| ·生防病毒 | 第24-25页 |
| ·生防微生物防治机制研究 | 第25-27页 |
| ·生防微生物与植物病原菌互作 | 第25-26页 |
| ·生防微生物与植物互作 | 第26-27页 |
| ·生防微生物与微生物群落互作 | 第27页 |
| ·芽孢杆菌 | 第27-29页 |
| ·芽孢杆菌生防机制研究 | 第28-29页 |
| ·芽孢杆菌活性物质研究 | 第29页 |
| 3. 海洋微生物活性物质研究 | 第29-32页 |
| ·海洋细菌活性物质研究 | 第30页 |
| ·海洋蓝细菌活性物质研究 | 第30-31页 |
| ·海洋放线菌活性物质应用研究 | 第31页 |
| ·海洋真菌活性物质研究 | 第31-32页 |
| 4. 活性物质提取、分离纯化及结构鉴定方法研究 | 第32-37页 |
| ·活性物质提取方法研究 | 第32-33页 |
| ·水提取法 | 第32-33页 |
| ·水蒸气蒸馏法 | 第33页 |
| ·有机溶剂提取法 | 第33页 |
| ·离心法 | 第33页 |
| ·超临界流体提取法 | 第33页 |
| ·活性物质分离纯化方法研究 | 第33-36页 |
| ·经典常规分离方法 | 第34-35页 |
| ·现代科学仪器分离方法 | 第35-36页 |
| ·活性物质结构鉴定方法研究 | 第36-37页 |
| ·物理方法 | 第36页 |
| ·化学方法 | 第36-37页 |
| 5. 本研究的目的与意义 | 第37-38页 |
| 第二章 拮抗菌株的分离、鉴定 | 第38-62页 |
| 1. 引言 | 第38页 |
| 2. 材料与方法 | 第38-45页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·主要培养基 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-45页 |
| ·海洋细菌的分离 | 第39-40页 |
| ·拮抗菌的初选 | 第40页 |
| ·拮抗菌的复筛 | 第40页 |
| ·拮抗菌16S rDNA单引物序列比对 | 第40-42页 |
| ·基因组DNA的获得 | 第40-41页 |
| ·16S rDNA单引物序列的获得 | 第41-42页 |
| ·单引物序列的比对 | 第42页 |
| ·拮抗菌的形态特征观察 | 第42页 |
| ·生理生化指标测定 | 第42-43页 |
| ·拮抗菌分子生物学鉴定 | 第43-45页 |
| ·基因组DNA的获得 | 第43页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·16S rDNA的获得 | 第43-45页 |
| ·系统进化树的构建 | 第45页 |
| 3. 结果与分析 | 第45-59页 |
| ·海洋拮抗菌的分离 | 第45-46页 |
| ·拮抗菌16S rDNA单引物序列比对 | 第46-54页 |
| ·16S rDNA单引物序列的获得 | 第46-53页 |
| ·16S rDNA序列比对 | 第53-54页 |
| ·拮抗菌的形态特征观察 | 第54页 |
| ·拮抗菌分子生物学鉴定 | 第54-59页 |
| 4. 讨论 | 第59-60页 |
| 5. 展望及不足之处 | 第60-62页 |
| 第三章 拮抗菌株ZJ186的发酵优化 | 第62-80页 |
| 1. 材料与方法 | 第62-66页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·菌株 | 第62页 |
| ·培养基 | 第62页 |
| ·发酵培养基 | 第62-63页 |
| ·主要仪器设备 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-66页 |
| ·种子液的制备 | 第63页 |
| ·发酵培养基筛选 | 第63-64页 |
| ·发酵液抑菌活性评估 | 第63页 |
| ·发酵液OD600值测定 | 第63-64页 |
| ·发酵条件初选 | 第64页 |
| ·最佳碳源的筛选 | 第64页 |
| ·最佳氮源的筛选 | 第64页 |
| ·与抑菌活性相关的无机盐筛选 | 第64-65页 |
| ·NaCl与抑菌活性 | 第64-65页 |
| ·MgSO_4与抑菌活性 | 第65页 |
| ·发酵时间 | 第65页 |
| ·发酵温度 | 第65页 |
| ·初始ph值 | 第65页 |
| ·接种量 | 第65页 |
| ·装液量 | 第65-66页 |
| ·正交实验设计发酵优化 | 第66页 |
| ·正交实验设计 | 第66页 |
| ·优化结果验证 | 第66页 |
| ·数据分析 | 第66页 |
| 2. 结果与分析 | 第66-78页 |
| ·发酵培养基的筛选 | 第66-67页 |
| ·发酵条件初选 | 第67-78页 |
| ·碳源 | 第67-69页 |
| ·最佳碳源的筛选 | 第67-68页 |
| ·最佳碳源对抑菌活性的影响 | 第68-69页 |
| ·最佳氮源 | 第69-70页 |
| ·最佳氮源对抑菌活性的影响 | 第69页 |
| ·最佳氮源对抑菌活性的影响 | 第69-70页 |
| ·无机盐 | 第70-72页 |
| ·与抑菌活性相关的无机盐筛选 | 第70-71页 |
| ·NaCl与抑菌活性 | 第71页 |
| ·MgSO_4与抑菌活性 | 第71-72页 |
| ·发酵时间 | 第72-73页 |
| ·发酵温度 | 第73页 |
| ·初始pH值 | 第73页 |
| ·接种量 | 第73-74页 |
| ·装液量 | 第74-75页 |
| ·正交实验设计发酵优化 | 第75-76页 |
| ·正交实验设计 | 第75-76页 |
| ·显著性分析 | 第76页 |
| ·处理组合优选 | 第76页 |
| ·优化结果验证 | 第76-78页 |
| 3. 讨论 | 第78-79页 |
| 4. 展望及不足之处 | 第79-80页 |
| 第四章 活性物质的分离纯化与成分分析 | 第80-105页 |
| 1. 材料与方法 | 第80-86页 |
| ·材料 | 第80页 |
| ·培养基 | 第80页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-86页 |
| ·拮抗菌的抗性鉴定 | 第80-81页 |
| ·抑菌活性检测方法 | 第81页 |
| ·抗菌图谱的测定 | 第81页 |
| ·抗生素敏感试验 | 第81-83页 |
| ·试剂 | 第81-82页 |
| ·操作步骤 | 第82-83页 |
| ·拮抗菌药敏性评估 | 第83页 |
| ·孢子抑制 | 第83页 |
| ·田间实验 | 第83页 |
| ·拮抗菌株与代谢产物活性研究 | 第83-84页 |
| ·拮抗菌株ZJ186传代稳定性测定 | 第83-84页 |
| ·分泌类型 | 第84页 |
| ·拮抗菌株ZJ186的生长与抑菌活性的关系 | 第84页 |
| ·活性物质的理化性质 | 第84-85页 |
| ·活性物质的稳定性 | 第84页 |
| ·丙酮对发酵液滤液的影响 | 第84-85页 |
| ·活性物质的极性检测 | 第85页 |
| ·活性物质的分离纯化 | 第85-86页 |
| ·MCI反相色谱粗分离 | 第85-86页 |
| ·最小抑菌浓度(MIC)的检测 | 第86页 |
| ·Sephadex LH-20色谱精细分离 | 第86页 |
| ·HPLC分离、检测 | 第86页 |
| ·MS检测 | 第86页 |
| 2. 结果与分析 | 第86-103页 |
| ·拮抗菌的抗性鉴定 | 第86-93页 |
| ·菌株ZJ186抗菌图谱 | 第86-88页 |
| ·菌株ZJ186药敏试验 | 第88页 |
| ·孢子抑制 | 第88页 |
| ·田间检测 | 第88-93页 |
| ·拮抗菌株与代谢产物活性研究 | 第93-94页 |
| ·拮抗菌株ZJ186传代稳定性测定 | 第93页 |
| ·分泌类型 | 第93页 |
| ·拮抗菌株ZJ186的生长与抑菌活性的关系 | 第93-94页 |
| ·活性物质的理化性质 | 第94-96页 |
| ·活性物质的稳定性 | 第94-95页 |
| ·pH对发酵液滤液的影响 | 第94页 |
| ·温度对发酵液滤液的影响 | 第94-95页 |
| ·丙酮对发酵液滤液的影响 | 第95页 |
| ·活性物质的极性检测 | 第95-96页 |
| ·活性物质的分离纯化 | 第96-103页 |
| ·MCI反相色谱粗分离 | 第96页 |
| ·Sephadex LH-20色谱精细分离 | 第96页 |
| ·HPLC分离、检测 | 第96-100页 |
| ·XDB-C18色谱柱对抗菌物质的分离 | 第96-97页 |
| ·ODS-3色谱柱对抗菌物质的分离 | 第97-100页 |
| ·MS检测 | 第100页 |
| ·最小抑菌浓度(MIC)检测 | 第100-103页 |
| 3. 讨论 | 第103-104页 |
| 4. 展望及不足之处 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-126页 |
| 致谢 | 第126-128页 |
| 博士期间论文发表情况 | 第128页 |
