| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 中英文对照缩略语表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| 1 基因工程概述 | 第10-11页 |
| ·基因工程的诞生 | 第10页 |
| ·植物基因工程的发展 | 第10页 |
| ·水稻基因工程的发展 | 第10-11页 |
| 2 水稻转基因方法概述 | 第11-14页 |
| ·根癌农杆菌介导转化法(Agrobacterium-mediated transformation) | 第11-12页 |
| ·基因枪法(Gene gun-mediated transformation) | 第12页 |
| ·花粉管通道法(Pollen tube-pathway transformation) | 第12-13页 |
| ·聚乙二醇PEG诱导法(PEG-mediated transformation) | 第13页 |
| ·电击(激)法(Electroporation-mediated transformation) | 第13-14页 |
| ·脂质体转化法(Liposome-mediated transformation) | 第14页 |
| 3 水稻抗虫基因工程研究进展 | 第14-17页 |
| ·苏云金杆菌杀虫结晶蛋白基因(Bt基因) | 第14-15页 |
| ·蛋白酶仰制基因(Proteinase inhibitor,PI) | 第15-16页 |
| ·植物凝集素基因 | 第16-17页 |
| 4 转双价抗虫基因的研究 | 第17-19页 |
| ·转双价抗虫基因植物的提出 | 第17-18页 |
| ·转双价抗虫基因植物的研究现状 | 第18-19页 |
| ·转双价抗虫水稻的研究 | 第19页 |
| 5 安全型转基因技术的研究进展 | 第19-23页 |
| ·去除选择标记基因的方法 | 第20-22页 |
| ·以生物安全标记基因代替抗生素类标记基因 | 第22页 |
| ·以特异型表达启动子代替组成型表达启动子 | 第22-23页 |
| 6 转基因植株的鉴定 | 第23-25页 |
| ·外源基因整合的鉴定 | 第23-24页 |
| ·外源基因表达的鉴定 | 第24页 |
| ·转基因性状检测 | 第24-25页 |
| 7 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 农杆菌介导法将双价抗虫基因导入水稻Dular | 第26-40页 |
| 1 材料与方法 | 第26-35页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·转基因受体水稻品种 | 第26页 |
| ·载体和菌株 | 第26-27页 |
| ·试剂及工具酶 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-35页 |
| ·质粒的扩繁 | 第29-30页 |
| ·植物表达载体农杆菌的转化 | 第30页 |
| ·水稻Dular的遗传转化 | 第30-31页 |
| ·目的基因的检测 | 第31页 |
| ·Southern blotting分析 | 第31-33页 |
| ·转基因植株的RT-PCR分析 | 第33-34页 |
| ·离体茎秆人工接虫鉴定 | 第34-35页 |
| ·杂交配组鉴定与抗条鉴定 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·再生植株的获得 | 第35-36页 |
| ·外源基因的表达 | 第36-37页 |
| ·转基因植株的抗虫性鉴定 | 第37页 |
| ·转基因植株的广亲和性和抗条纹叶枯病的检测 | 第37-40页 |
| 第三章 农杆菌介导法将双价抗虫基因导入水稻南粳45 | 第40-50页 |
| 1 材料与方法 | 第40-46页 |
| ·实验材料 | 第40-43页 |
| ·转基因受体水稻品种 | 第40页 |
| ·载体和菌株 | 第40-41页 |
| ·试剂及工具酶 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41-43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·质粒的扩繁 | 第43页 |
| ·植物表达载体农杆菌的转化 | 第43页 |
| ·水稻南粳45的遗传转化 | 第43-44页 |
| ·目的基因的检测 | 第44页 |
| ·Southern blotting分析 | 第44-46页 |
| ·转基因植株的RT-PCR分析 | 第46页 |
| ·转基因植株的Bt基因胶体金试纸条检测 | 第46页 |
| ·离体茎秆人工接虫鉴定 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-50页 |
| ·去选择标记抗虫转基因水稻植株的获得 | 第46-47页 |
| ·外源基因的表达 | 第47-48页 |
| ·人工接虫鉴定和农艺性状调查 | 第48-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-52页 |
| 1 获得转双价抗虫水稻的意义 | 第50页 |
| 2 转基因操作中遇到的问题 | 第50-51页 |
| 3 后续研究设想 | 第51-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表(投稿)的论文 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
