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拟南芥细胞自噬相关基因的荧光素酶互补检测研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 综述第9-23页
 1 植物细胞自噬的含义、分类第9页
   ·植物细胞自噬的含义第9页
   ·植物细胞自噬的分类第9页
 2 酵母的细胞自噬通路第9-12页
   ·酵母的细胞自噬基因第9-10页
   ·两个泛素化体系第10页
     ·Atg8-PE体系第10页
     ·Atg12-Atg5体系第10页
   ·细胞自噬的形成和加工第10-12页
 3 植物中的Atg基因第12-15页
 4 植物细胞自噬的研究方法第15-16页
   ·细胞自噬蛋白Atg8的标记第15页
   ·细胞自噬抑制剂的应用第15-16页
   ·衰老相关液泡第16页
 5 植物细胞自噬的生理功能第16-20页
   ·细胞自噬突变体与环境胁迫第16-17页
   ·细胞自噬与叶绿体的降解第17-18页
   ·细胞自噬与氧化胁迫第18页
   ·细胞自噬与程序性细胞死亡第18-19页
   ·细胞自噬与病原菌侵染第19页
   ·细胞自噬与植物激素第19-20页
     ·细胞自噬与水杨酸第19-20页
     ·细胞自噬与茉莉素第20页
 6 荧光素酶互补技术第20-22页
 7 本课题的研究目的与意义第22-23页
第二章 荧光素酶互补检测蛋白的相互作用第23-40页
 1 试验材料第23-25页
   ·植物材料第23页
   ·酶与试剂盒第23-24页
   ·菌株与质粒第24页
   ·培养基第24页
   ·抗生素第24页
   ·酶制剂第24-25页
 2 实验方法第25-32页
   ·核酸的提取第25-27页
     ·DNA的提取第25页
     ·RNA的提取第25-26页
     ·测定RNA浓度的OD260及OD260/OD280值第26页
     ·检测RNA质量第26页
     ·质粒DNA的提取第26-27页
   ·反转录第27页
   ·PCR反应第27-28页
     ·phusion酶PCR反应体系第27页
     ·phusion酶PCR反应程序第27页
     ·普通Taq酶的PCR反应体系第27页
     ·普通Taq酶的PCR反应程序第27-28页
   ·片段的纯化第28-29页
     ·DNA片段纯化第28页
     ·乙醇沉淀PCR产物第28页
     ·酶切产物的纯化第28-29页
   ·大肠杆菌感受态的制备及转化第29-30页
     ·大肠杆菌感受态的制备第29页
     ·热激法转化大肠杆菌第29-30页
   ·农杆菌感受态的制备与转化第30-31页
     ·农杆菌感受态的制备第30页
     ·电击法转化农杆菌第30-31页
   ·荧光素互补技术第31-32页
     ·荧光互补试验试剂配制第31页
     ·本生烟叶片注射方法第31页
     ·荧光素显微镜使用方法第31-32页
 3 结果与分析第32-39页
   ·C-LUC/N-LUC相关载体的克隆与鉴定第32-36页
   ·荧光素互补试验第36-39页
 5 讨论第39-40页
   ·酵母双杂交和荧光素酶互补技术第39页
   ·与AtAtg8e互作的蛋白第39-40页
结论第40-41页
参考文献第41-47页
附录A: 缩略词表第47-48页
附录B: 主要试剂配置第48-50页
附录C: 用于载体构建的相关引物第50-54页
附录D: C-LUC载体图谱第54-55页
附录E: C-LUC载体图谱第55-56页
致谢第56-57页
作者简历第57页

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