摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 综述 | 第9-23页 |
1 植物细胞自噬的含义、分类 | 第9页 |
·植物细胞自噬的含义 | 第9页 |
·植物细胞自噬的分类 | 第9页 |
2 酵母的细胞自噬通路 | 第9-12页 |
·酵母的细胞自噬基因 | 第9-10页 |
·两个泛素化体系 | 第10页 |
·Atg8-PE体系 | 第10页 |
·Atg12-Atg5体系 | 第10页 |
·细胞自噬的形成和加工 | 第10-12页 |
3 植物中的Atg基因 | 第12-15页 |
4 植物细胞自噬的研究方法 | 第15-16页 |
·细胞自噬蛋白Atg8的标记 | 第15页 |
·细胞自噬抑制剂的应用 | 第15-16页 |
·衰老相关液泡 | 第16页 |
5 植物细胞自噬的生理功能 | 第16-20页 |
·细胞自噬突变体与环境胁迫 | 第16-17页 |
·细胞自噬与叶绿体的降解 | 第17-18页 |
·细胞自噬与氧化胁迫 | 第18页 |
·细胞自噬与程序性细胞死亡 | 第18-19页 |
·细胞自噬与病原菌侵染 | 第19页 |
·细胞自噬与植物激素 | 第19-20页 |
·细胞自噬与水杨酸 | 第19-20页 |
·细胞自噬与茉莉素 | 第20页 |
6 荧光素酶互补技术 | 第20-22页 |
7 本课题的研究目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 荧光素酶互补检测蛋白的相互作用 | 第23-40页 |
1 试验材料 | 第23-25页 |
·植物材料 | 第23页 |
·酶与试剂盒 | 第23-24页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·培养基 | 第24页 |
·抗生素 | 第24页 |
·酶制剂 | 第24-25页 |
2 实验方法 | 第25-32页 |
·核酸的提取 | 第25-27页 |
·DNA的提取 | 第25页 |
·RNA的提取 | 第25-26页 |
·测定RNA浓度的OD260及OD260/OD280值 | 第26页 |
·检测RNA质量 | 第26页 |
·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
·反转录 | 第27页 |
·PCR反应 | 第27-28页 |
·phusion酶PCR反应体系 | 第27页 |
·phusion酶PCR反应程序 | 第27页 |
·普通Taq酶的PCR反应体系 | 第27页 |
·普通Taq酶的PCR反应程序 | 第27-28页 |
·片段的纯化 | 第28-29页 |
·DNA片段纯化 | 第28页 |
·乙醇沉淀PCR产物 | 第28页 |
·酶切产物的纯化 | 第28-29页 |
·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第29-30页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第29页 |
·热激法转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
·农杆菌感受态的制备与转化 | 第30-31页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第30页 |
·电击法转化农杆菌 | 第30-31页 |
·荧光素互补技术 | 第31-32页 |
·荧光互补试验试剂配制 | 第31页 |
·本生烟叶片注射方法 | 第31页 |
·荧光素显微镜使用方法 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-39页 |
·C-LUC/N-LUC相关载体的克隆与鉴定 | 第32-36页 |
·荧光素互补试验 | 第36-39页 |
5 讨论 | 第39-40页 |
·酵母双杂交和荧光素酶互补技术 | 第39页 |
·与AtAtg8e互作的蛋白 | 第39-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附录A: 缩略词表 | 第47-48页 |
附录B: 主要试剂配置 | 第48-50页 |
附录C: 用于载体构建的相关引物 | 第50-54页 |
附录D: C-LUC载体图谱 | 第54-55页 |
附录E: C-LUC载体图谱 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简历 | 第57页 |