| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 1 前言 | 第16-32页 |
| ·蓝舌病病毒概述 | 第16-25页 |
| ·蓝舌病病毒的分类地位 | 第16页 |
| ·蓝舌病病毒的形态与基因组结构 | 第16-17页 |
| ·蓝舌病病毒基因组编码蛋白的生物学特性 | 第17-21页 |
| ·蓝舌病病毒的复制 | 第21-22页 |
| ·蓝舌病的病原特性 | 第22-23页 |
| ·蓝舌病的流行病学特性 | 第23-24页 |
| ·蓝舌病临床症状与病理变化 | 第24-25页 |
| ·蓝舌病疫苗的研究进展 | 第25-26页 |
| ·蓝舌病的诊断方法 | 第26-29页 |
| ·血清学检测方法 | 第26-28页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第28-29页 |
| ·蓝舌病病毒VP7蛋白单克隆抗体制备及表位鉴定研究进展 | 第29页 |
| ·蓝舌病的生物安全防范 | 第29-30页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-53页 |
| ·材料 | 第32-37页 |
| ·病毒、噬菌体肽库、质粒、菌株与细胞 | 第32页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·血清 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·主要仪器和设备 | 第33-34页 |
| ·主要溶液配制 | 第34-37页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-53页 |
| ·病毒扩增及其滴度测定 | 第37-39页 |
| ·病毒RNA提取及其反转录 | 第39-40页 |
| ·蓝舌病病毒VP7基因的扩增及其重组表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·蓝舌病病毒重组VP7蛋白的表达与鉴定 | 第42-43页 |
| ·蓝舌病病毒单克隆抗体的制备 | 第43-47页 |
| ·蓝舌病病毒单克隆抗体特性的鉴定 | 第47-48页 |
| ·蓝舌病病毒竞争ELISA检测方法的建立与应用 | 第48-50页 |
| ·蓝舌病病毒单克隆抗体所识别的抗原表位鉴定 | 第50-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-75页 |
| ·病毒扩增及其滴度测定 | 第53页 |
| ·蓝舌病病毒VP7基因的RT-PCR扩增及其重组表达载体构建 | 第53-56页 |
| ·VP7基因的RT-PCR扩增 | 第53页 |
| ·VP7基因重组表达载体的构建与鉴定 | 第53-56页 |
| ·蓝舌病病毒VP7蛋白的表达与鉴定 | 第56-58页 |
| ·重组表达蛋白的SDS-PAGE分析 | 第56页 |
| ·重组表达蛋白的纯化及Western-blot分析 | 第56-58页 |
| ·重组表达蛋白的抗原性鉴定 | 第58页 |
| ·蓝舌病病毒单克隆抗体的制备 | 第58-60页 |
| ·细胞融合用BALB/c小鼠的血清效价检测 | 第58页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株筛选方法的建立 | 第58-59页 |
| ·杂交瘤细胞株的获得 | 第59-60页 |
| ·蓝舌病病毒单克隆抗体特性的鉴定 | 第60-62页 |
| ·单克隆抗体亚类的测定 | 第60页 |
| ·单克隆抗体腹水效价测定及杂交瘤细胞株稳定性分析 | 第60页 |
| ·腹水中单克隆抗体IgG的纯化及浓度测定 | 第60页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第60-62页 |
| ·蓝舌病病毒竞争ELISA检测方法的建立与应用 | 第62-66页 |
| ·竞争ELISA检测方法的建立 | 第62页 |
| ·竞争ELISA检测方法的效果评价 | 第62-65页 |
| ·竞争ELISA检测方法的应用 | 第65-66页 |
| ·蓝舌病病毒单克隆抗体所识别的抗原表位鉴定 | 第66-75页 |
| ·单克隆抗体所识别抗原表位的位置定位 | 第66-74页 |
| ·单克隆抗体所识别抗原表位的结构分析 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-79页 |
| ·蓝舌病病毒单克隆抗体的制备及鉴定 | 第75-76页 |
| ·小鼠免疫用抗原及阳性杂交瘤细胞株筛选用抗原的选择策略 | 第75页 |
| ·细胞融合后杂交瘤细胞的培养 | 第75-76页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第76页 |
| ·蓝舌病病毒检测方法的建立与应用 | 第76-77页 |
| ·蓝舌病病毒构象抗原表位的鉴定 | 第77-79页 |
| ·B细胞抗原表位的鉴定 | 第77-78页 |
| ·蓝舌病病毒VP7蛋白构象抗原表位的鉴定 | 第78-79页 |
| 5. 结论 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-94页 |
| 附录 | 第94-100页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第100页 |
