| 英文缩写说明 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-34页 |
| ·家蚕丝腺的结构及丝蛋白的分泌 | 第14-15页 |
| ·家蚕丝蛋白及其基因结构的研究进展 | 第15-18页 |
| ·丝素蛋白重链（Fib-H） | 第15-16页 |
| ·丝素蛋白轻链（Fib-L） | 第16页 |
| ·P25 蛋白 | 第16-17页 |
| ·Ser-1 基因 | 第17页 |
| ·Ser-2 基因和 Ser-3 基因 | 第17-18页 |
| ·L 链和 H 链的连接在丝素蛋白生物合成中的作用 | 第18页 |
| ·蚕丝基因表达调控的反式作用因子 | 第18-20页 |
| ·家蚕丝蛋白基因的组织和时空表达特异性 | 第20-21页 |
| ·昆虫 JH 和 MH 的相关研究进展 | 第21-24页 |
| ·MH 的作用分子机理 | 第22页 |
| ·JH 的作用分子机制 | 第22-23页 |
| ·家蚕 JH 和 MH 滴度的变化 | 第23-24页 |
| ·家蚕变态发育激素调节的分子机制的研究 | 第24页 |
| ·外源 JHA 和 MH 对家蚕的生理效应和丝蛋白合成的影响 | 第24-27页 |
| ·外源 JHA 和 MH 对家蚕生长发育和产丝量的影响 | 第25页 |
| ·外源 JHA 和 MH 对蚕体氨基酸代谢的调节 | 第25页 |
| ·外源 JHA 和 MH 对丝腺细胞超微结构的影响 | 第25-26页 |
| ·外源 JHA 和 MH 对丝腺核酸和蛋白质合成的影响 | 第26-27页 |
| ·外源 JHA 和 MH 对丝蛋白基因表达的影响 | 第27页 |
| ·半定量 RT-PCR 技术简介 | 第27-29页 |
| ·半定量 RT-PCR 技术原理 | 第27-28页 |
| ·半定量 RT-PCR 技术的关键因素 | 第28-29页 |
| ·半定量 RT-PCR 技术的优点 | 第29页 |
| ·荧光定量 PCR 技术简介 | 第29-32页 |
| ·RT-qPCR 技术的基本原理 | 第30页 |
| ·RT-qPCR 的检测模式分类 | 第30-31页 |
| ·Sybr Green I 检测模式 | 第30页 |
| ·TaqMan 检测模式 | 第30-31页 |
| ·杂交探针模式 | 第31页 |
| ·分子信标 | 第31页 |
| ·FRET 探针 | 第31页 |
| ·RT-qPCR 定量原理 | 第31页 |
| ·RT-qPCR 技术的应用 | 第31-32页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第32-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-42页 |
| ·试验材料 | 第34-36页 |
| ·生物材料 | 第34页 |
| ·主要试剂、缓冲液 | 第34-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35-36页 |
| ·试验方法 | 第36-42页 |
| ·激素处理 | 第36页 |
| ·4 龄期激素处理 | 第36页 |
| ·5 龄期激素处理 | 第36页 |
| ·5 龄期一次性处理 | 第36页 |
| ·取材及观察 | 第36-37页 |
| ·4 龄到 5 龄熟蚕后 4d 取材 | 第36-37页 |
| ·4 龄取材及观察 | 第37页 |
| ·5 龄取材及观察 | 第37页 |
| ·5 龄一次性处理取材及观察 | 第37页 |
| ·引物设计 | 第37-38页 |
| ·家蚕组织总 RNA 的抽提及 cDNA 的合成 | 第38页 |
| ·PCR 产物的回收和连接反应 | 第38页 |
| ·重组质粒的转化和筛选 | 第38-39页 |
| ·Sq RT-PCR 反应体系及条件设置 | 第39-40页 |
| ·退火温度的确定 | 第39页 |
| ·循环数的确定 | 第39页 |
| ·Sq RT-PCR 反应体系 | 第39页 |
| ·电泳图片的获得 | 第39-40页 |
| ·A3 及丝蛋白基因表达量的半定量分析 | 第40页 |
| ·RT-qPCR 检测 | 第40-42页 |
| ·RT-qPCR 的反应体系 | 第40页 |
| ·RT-qPCR 的反应程序 | 第40页 |
| ·RT-qPCR 标准曲线的制定 | 第40-41页 |
| ·A3 及丝蛋白基因表达量的荧光定量分析 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-65页 |
| ·Sq RT-PCR 反应条件的确立及 RT-qPCR 标准曲线的制定 | 第42-44页 |
| ·RNA 提取效果的鉴定 | 第42页 |
| ·反转录 cDNA 模板的检测 | 第42页 |
| ·退火温度的确定 | 第42页 |
| ·循环数的确定 | 第42-44页 |
| ·RT-qPCR 标准曲线的制定 | 第44页 |
| ·家蚕丝蛋白基因在不同发育时期表达量的变化分析 | 第44-46页 |
| ·Fib-H 基因表达量随发育时期的变化 | 第44页 |
| ·Fib-L 基因表达量随发育时期的变化 | 第44-45页 |
| ·Ser-2 基因表达量随发育时期的变化 | 第45-46页 |
| ·Ser-3 基因表达量随发育时期的变化 | 第46页 |
| ·不同剂量的 MH 对 4 龄家蚕生长发育和丝蛋白基因表达的影响 | 第46-50页 |
| ·不同剂量的 MH 对 4 龄家蚕生长发育的影响 | 第46-48页 |
| ·不同剂量的 MH 对 4 龄家蚕丝蛋白基因表达的影响 | 第48-50页 |
| ·不同剂量的 MH 对 Fib-H 基因表达的影响 | 第48-49页 |
| ·不同剂量的 MH 对 Fib-L 基因表达的影响 | 第49页 |
| ·不同剂量的 MH 对 Ser-2 基因表达的影响 | 第49-50页 |
| ·不同剂量的 MH 对 Ser-3 基因表达的影响 | 第50页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 4 龄家蚕生长发育和丝蛋白基因表达的影响 | 第50-53页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 4 龄家蚕生长发育的影响 | 第50-51页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 4 龄家蚕丝蛋白基因表达的影响 | 第51-53页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 Fib-H 基因表达的影响 | 第51-52页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 Fib-L 基因表达的影响 | 第52页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 Ser-2 基因表达的影响 | 第52-53页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 Ser-3 基因表达的影响 | 第53页 |
| ·不同剂量的 MH 对 5 龄家蚕生长发育和丝蛋白基因表达的影响 | 第53-58页 |
| ·不同剂量 MH 对 5 龄家蚕生长发育的影响 | 第53-55页 |
| ·不同剂量的 MH 对 5 龄家蚕丝蛋白基因表达的影响 | 第55-58页 |
| ·不同剂量的 MH 对 Fib-H 基因表达的影响 | 第55-56页 |
| ·不同剂量的 MH 对 Fib-L 基因表达的影响 | 第56页 |
| ·不同剂量的 MH 对 Ser-2 基因表达的影响 | 第56-57页 |
| ·不同剂量的 MH 对 Ser-3 基因表达的影响 | 第57-58页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 5 龄家蚕生长发育和丝蛋白基因表达的影响 | 第58-61页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 5 龄家蚕生长发育的影响 | 第58-59页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 5 龄家蚕丝蛋白基因表达的影响 | 第59-61页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 Fib-H 基因表达的影响 | 第59-60页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 Fib-L 基因表达的影响 | 第60页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 Ser-2 基因表达的影响 | 第60页 |
| ·不同剂量的 JHA 对 Ser-3 基因表达的影响 | 第60-61页 |
| ·家蚕 5 龄期不同剂量 MH 和 JHA 处理对丝蛋白基因表达量影响的 RT-qPCR分析 | 第61-63页 |
| ·家蚕 5 龄期一次性激素处理对丝蛋白基因表达量影响分析 | 第63-65页 |
| ·一次性激素处理处理对家蚕生长发育的影响 | 第63页 |
| ·一次性激素处理对家蚕丝蛋白基因表达的 Sq RT-PCR 和 RT-qPCR 分析 | 第63-65页 |
| ·一次性激素处理对 Fib-H 基因 Sq RT-PCR 和 RT-qPCR 分析 | 第63-64页 |
| ·一次性激素处理对 Ser-2 基因 Sq RT-PCR 和 RT-qPCR 分析 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| 5 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 附录 | 第80-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第87页 |
