| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-27页 |
| ·鸭甲肝病毒（DHAV）概述 | 第13页 |
| ·DHAV-1 的病毒学分类 | 第13-14页 |
| ·DHAV-1 的形态学结构和理化特性 | 第14页 |
| ·形态学结构 | 第14页 |
| ·理化特性 | 第14页 |
| ·DHAV-1 的病原性 | 第14页 |
| ·DHAV-1 流行病学 | 第14-15页 |
| ·病毒的培养增殖 | 第15页 |
| ·DHAV-1 的分子生物学研究 | 第15-19页 |
| ·病毒基因组及主要结构和功能蛋白的特性 | 第15-17页 |
| ·DHAV-1 感染机制 | 第17-18页 |
| ·鸭病毒性肝炎（DVH）的诊断方法 | 第18-19页 |
| ·DHAV-1 的预防与治疗 | 第19-20页 |
| ·DHAV-1 的预防 | 第19-20页 |
| ·治疗 | 第20页 |
| ·RNA 病毒感染性克隆操作技术研究进展 | 第20-26页 |
| ·感染性克隆的构建基础 | 第21-25页 |
| ·感染性克隆的应用 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-47页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·菌（毒）株 | 第27页 |
| ·实验动物及细胞株 | 第27页 |
| ·酶和相关试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·引物设计与合成 | 第27-29页 |
| ·溶液系统 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-47页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第30-32页 |
| ·病毒的分离 | 第30页 |
| ·病毒 RNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·病毒 RT-PCR 检测 | 第31-32页 |
| ·电泳检测 | 第32页 |
| ·病毒的增殖与纯化 | 第32页 |
| ·DHAV-1 LY0802 株病毒全基因组序列测定 | 第32-35页 |
| ·病毒 RNA 的提取 | 第32页 |
| ·病毒基因组 RT-PCR 扩增 | 第32页 |
| ·电泳检测 | 第32页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第32-33页 |
| ·DNA 与载体的连接 | 第33页 |
| ·DH5α大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33-34页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·重组质粒 PCR 鉴定 | 第35页 |
| ·感染性克隆的构建 | 第35-42页 |
| ·各个片段的融合 PCR 扩增 | 第35-38页 |
| ·全长 cDNA 的构建 | 第38-41页 |
| ·序列分析 | 第41-42页 |
| ·DHAV-1 感染性克隆拯救病毒粒子的获得与鉴定 | 第42-44页 |
| ·pLYDHAV 重组质粒的提取 | 第42页 |
| ·重组质粒的线性化 | 第42页 |
| ·体外转录物 RNA 的制备 | 第42-43页 |
| ·DHAV-1 病毒的拯救 | 第43页 |
| ·拯救病毒的鉴定 | 第43-44页 |
| ·BHK-21 细胞的病变效应（CPE） | 第43-44页 |
| ·RT-PCR 扩增目的片段 | 第44页 |
| ·间接免疫荧光（IFA）检测病毒抗原的表达 | 第44页 |
| ·拯救病毒的部分生物学指标的分析 | 第44-47页 |
| ·拯救病毒与母本病毒生长曲线的绘制 | 第44-46页 |
| ·BHK-21 细胞的培养 | 第44-45页 |
| ·接种拯救病毒与母本病毒 | 第45页 |
| ·拯救病毒与母本病毒 TCID50 的测定 | 第45页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第45-46页 |
| ·拯救病毒与母本病毒毒力的测定 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-57页 |
| ·病毒的分离鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·接种鸭胚结果 | 第47页 |
| ·RT-PCR 鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·全基因组序列测定结果 | 第48页 |
| ·目的片段 PCR 检测 | 第48页 |
| ·全基因组序列拼接和分析 | 第48页 |
| ·感染性克隆的构建结果 | 第48-52页 |
| ·全长 cDNA 构建结果 | 第48-49页 |
| ·重组质粒序列分析结果 | 第49-50页 |
| ·拯救病毒的鉴定 | 第50页 |
| ·间接免疫荧光（IFA）检测结果 | 第50-51页 |
| ·拯救病毒的 RT-PCR 鉴定 | 第51-52页 |
| ·病毒生长曲线的绘制结果和分析 | 第52-55页 |
| ·拯救病毒与母本病毒毒力的测定结果 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-62页 |
| ·DHAV-1 全基因组克隆测序 | 第57-58页 |
| ·感染性克隆的构建 | 第58-59页 |
| ·拯救病毒的鉴定 | 第59-60页 |
| ·拯救病毒与母本病毒 TCID50的检测 | 第60-61页 |
| ·拯救病毒与母本病毒毒力的测定 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 6 参考文献 | 第63-69页 |
| 7 致谢 | 第69-70页 |
| 8 攻读学位期间发表论文情况 | 第70页 |