| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-20页 |
| 缩略语表 | 第20-22页 |
| 前言 | 第22-24页 |
| 第一章 ALI时肺内TREMs家族表达谱分析 | 第24-43页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·动物 | 第24页 |
| ·细胞 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-32页 |
| ·ALI小鼠模型的建立 | 第25页 |
| ·RT-PCR检测肺内TREMs mRNA的表达 | 第25-28页 |
| ·Western Blot检测肺组织TREM-1和TREM-2蛋白的表达 | 第28-31页 |
| ·流式细胞术检测肺系细胞TREM-1和TREM-2蛋白的表达 | 第31页 |
| ·统计学处理 | 第31-32页 |
| ·实验结果 | 第32-33页 |
| ·ALI小鼠的肺功能和肺组织病理改变 | 第32页 |
| ·ALI小鼠肺内TREMs家族的表达 | 第32-33页 |
| ·LPS对肺系细胞TREMs家族表达的影响 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| ·附图 | 第36-43页 |
| 第二章 TREM-2对肺泡巨噬细胞炎症启动和放大效应的影响 | 第43-62页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·细胞 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43-44页 |
| ·仪器 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-50页 |
| ·pEGFP-N1/TREM-2重组质粒的构建 | 第44-46页 |
| ·转化 | 第46页 |
| ·质粒抽提及阳性克隆的鉴定 | 第46-47页 |
| ·质粒大抽提 | 第47页 |
| ·AM的培养与pEGFP-N1/TREM-2重组质粒转染 | 第47页 |
| ·pEGFP-N1/TREM-2重组质粒转染验证 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR检测TREM-2对LPS应激的AM中TNF、IL-10和NF-κB mRNA表达的影响 | 第48页 |
| ·ELISA检测TREM-2对LPS应激的AM上清液中TNF-a和IL-10蛋白含量的影响 | 第48-49页 |
| ·免疫荧光检测TREM-2对LPS应激的AM中NF-κB核转位的影响 | 第49-50页 |
| ·统计学处理 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-52页 |
| ·TREM-2克隆片段 | 第50页 |
| ·pEGFP-N1/TREM-2重组质粒的鉴定 | 第50-51页 |
| ·pEGFP-N1和pEGFP-N1/TREM-2重组质粒转染AM效果的鉴定 | 第51页 |
| ·TREM-2对AM中TNF-a和IL-10表达的影响 | 第51-52页 |
| ·TREM-2对AM中NF-κB表达及核转位的影响 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·附图 | 第54-62页 |
| 第三章 TREM-2对成纤维细胞凋亡的影响及其机制 | 第62-76页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·细胞 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62页 |
| ·仪器 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-67页 |
| ·pEGFP-N1/TREM-2重组质粒的转染及验证 | 第63-64页 |
| ·流式细胞术检测小鼠成纤维细胞的凋亡 | 第64页 |
| ·PI染色检测小鼠成纤维细胞的凋亡 | 第64-65页 |
| ·RT-PCR检测LPS应激的小鼠成纤维细胞caspase3、caspase8、caspase9mRNA的表达 | 第65-66页 |
| ·检测小鼠成纤维细胞caspase3、caspase8和caspase9酶的活性 | 第66-67页 |
| ·统计学处理 | 第67页 |
| ·结果 | 第67-68页 |
| ·pEGFP-N1和pEGFP-N1/TREM-2重组质粒转染小鼠成纤维细胞效果的鉴定 | 第67-68页 |
| ·TREM-2对小鼠成纤维细胞凋亡的影响 | 第68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| ·附图 | 第71-76页 |
| 第四章 VIP对ALI时肺内TREM-2的表达调控 | 第76-104页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·动物 | 第76页 |
| ·细胞 | 第76页 |
| ·试剂 | 第76-77页 |
| ·仪器 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-85页 |
| ·pGC-FU-VIP重组慢病毒构建 | 第77-83页 |
| ·pGC-FU-VIP重组慢病毒感染效果验证 | 第83页 |
| ·RT-PCR和Western Blot检测VIP对ALI小鼠肺组织TREM-2表达的影响 | 第83页 |
| ·RT-PCR检测巨噬细胞TREM-2 mRNA的表达 | 第83-84页 |
| ·流式细胞术检测巨噬细胞TREM-2蛋白的表达 | 第84-85页 |
| ·生物信息学分析调控小鼠TREM-2表达的核心转录因子 | 第85页 |
| ·Real-time PCR检测VIP对LPS应激的巨噬细胞AP1 mRNA表达的影响 | 第85页 |
| ·统计学处理 | 第85页 |
| ·结果 | 第85-87页 |
| ·pGC-FU-VIP重组慢病毒的构建 | 第85-86页 |
| ·pGC-FU-VIP重组慢病毒感染肺组织效率的验证 | 第86页 |
| ·VIP对ALI小鼠肺组织和巨噬细胞TREM-2表达的调控 | 第86页 |
| ·VIP调控巨噬细胞TREM-2表达的机制 | 第86-87页 |
| ·讨论 | 第87-90页 |
| ·附图 | 第90-104页 |
| 第五章 结论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-118页 |
| 综述 | 第118-132页 |
| 参考文献 | 第124-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第133-134页 |
