中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
目录 | 第13-15页 |
前言 | 第15-18页 |
第一章 十二种疾病特异的iPS系和血小板无力iPS疾病模型的建立 | 第18-61页 |
第一节 十二种疾病特异的多能性干细胞系的建立 | 第18-42页 |
1 材料与方法 | 第19-29页 |
·材料与试剂 | 第19-22页 |
·研究材料 | 第19页 |
·试剂 | 第19-20页 |
·主要培养基及试剂配制 | 第20-21页 |
·主要仪器与耗材 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-29页 |
·病人皮肤成纤维细胞的分离培养 | 第22页 |
·含四种全能性相关基因的慢病毒质粒的制备 | 第22-23页 |
·慢病毒包装、感染及iPS诱导实验 | 第23-25页 |
·iPS鉴定 | 第25-29页 |
2 结果 | 第29-34页 |
·正常流产胎儿皮肤成纤维细胞来源的iPS细胞系的建立 | 第29-31页 |
·hiPSCs与hESCs在EB分化过程中三胚层分化能力的比较 | 第31页 |
·hiPSCs与hESCs在EB分化过程中内源性Oct4、Nanog的表达水平变化 | 第31页 |
·iPSCs与hESCs的畸胎瘤组织切片分析 | 第31页 |
·十二种疾病特异的iPSCs细胞系的建立 | 第31-34页 |
3 讨论 | 第34-36页 |
4 图表与说明 | 第36-42页 |
第二节 血小板无力iPS疾病模型的建立及初步研究 | 第42-61页 |
1. 材料与方法 | 第44-48页 |
2 结果 | 第48-50页 |
·GT-iPSCs的建立及鉴定 | 第48-49页 |
·G-iPSCs与hESCs向血小板诱导分化 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-53页 |
4 图表与说明 | 第53-61页 |
第二章 阻滞于有丝分裂中期(M期)的胚胎干细胞胞质含有体细胞重编程相关因子 | 第61-75页 |
1. 材料与方法 | 第62-65页 |
·研究材料 | 第62-63页 |
·实验方法 | 第63-65页 |
·人饲养层细胞的制备 | 第63页 |
·hESCs的培养 | 第63页 |
·chHES-EGFP细胞系的建立 | 第63-64页 |
·hES的同步化 | 第64页 |
·密度梯度法离心去核 | 第64页 |
·免疫染色 | 第64-65页 |
·细胞周期的流式分析 | 第65页 |
·统计学分析 | 第65页 |
2 结果 | 第65-66页 |
·chHES-EGFP荧光细胞系的建立 | 第65-66页 |
·M期的人类胚胎干细胞胞质含有重编程因子 | 第66页 |
·通过同步化处理能使hES有效的阻滞于M期 | 第66页 |
·通过密度梯度离心可有效的去除hES的细胞核 | 第66页 |
3 讨论 | 第66-69页 |
4 图表与图示 | 第69-75页 |
结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-82页 |
综述 | 第82-104页 |
参考文献 | 第93-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
攻读学位期间主要的研究成果目录 | 第105页 |