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十二种疾病特异的iPS系和血小板无力iPS疾病模型的建立以及hESCs胞质中重编程相关因子的检测

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
目录第13-15页
前言第15-18页
第一章 十二种疾病特异的iPS系和血小板无力iPS疾病模型的建立第18-61页
 第一节 十二种疾病特异的多能性干细胞系的建立第18-42页
  1 材料与方法第19-29页
   ·材料与试剂第19-22页
     ·研究材料第19页
     ·试剂第19-20页
     ·主要培养基及试剂配制第20-21页
     ·主要仪器与耗材第21-22页
   ·实验方法第22-29页
     ·病人皮肤成纤维细胞的分离培养第22页
     ·含四种全能性相关基因的慢病毒质粒的制备第22-23页
     ·慢病毒包装、感染及iPS诱导实验第23-25页
     ·iPS鉴定第25-29页
  2 结果第29-34页
   ·正常流产胎儿皮肤成纤维细胞来源的iPS细胞系的建立第29-31页
   ·hiPSCs与hESCs在EB分化过程中三胚层分化能力的比较第31页
   ·hiPSCs与hESCs在EB分化过程中内源性Oct4、Nanog的表达水平变化第31页
   ·iPSCs与hESCs的畸胎瘤组织切片分析第31页
   ·十二种疾病特异的iPSCs细胞系的建立第31-34页
  3 讨论第34-36页
  4 图表与说明第36-42页
 第二节 血小板无力iPS疾病模型的建立及初步研究第42-61页
  1. 材料与方法第44-48页
  2 结果第48-50页
   ·GT-iPSCs的建立及鉴定第48-49页
   ·G-iPSCs与hESCs向血小板诱导分化第49-50页
  3 讨论第50-53页
  4 图表与说明第53-61页
第二章 阻滞于有丝分裂中期(M期)的胚胎干细胞胞质含有体细胞重编程相关因子第61-75页
 1. 材料与方法第62-65页
   ·研究材料第62-63页
   ·实验方法第63-65页
     ·人饲养层细胞的制备第63页
     ·hESCs的培养第63页
     ·chHES-EGFP细胞系的建立第63-64页
     ·hES的同步化第64页
     ·密度梯度法离心去核第64页
     ·免疫染色第64-65页
     ·细胞周期的流式分析第65页
     ·统计学分析第65页
 2 结果第65-66页
   ·chHES-EGFP荧光细胞系的建立第65-66页
   ·M期的人类胚胎干细胞胞质含有重编程因子第66页
   ·通过同步化处理能使hES有效的阻滞于M期第66页
   ·通过密度梯度离心可有效的去除hES的细胞核第66页
 3 讨论第66-69页
 4 图表与图示第69-75页
结论第75-76页
参考文献第76-82页
综述第82-104页
 参考文献第93-104页
致谢第104-105页
攻读学位期间主要的研究成果目录第105页

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