| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 縮略词说明 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 第一部分 伞枝犁头霉(A.corymbifera AS2)生物转化制备黄芪甲苷方法的建立 | 第18-51页 |
| 1 实验材料 | 第18-20页 |
| ·药品与试剂 | 第18-19页 |
| ·菌种及来源 | 第19页 |
| ·培养基配方 | 第19-20页 |
| ·主要仪器与设备 | 第20页 |
| 2 实验方法 | 第20-27页 |
| ·菌种的定向筛选 | 第20页 |
| ·分析方法 | 第20-23页 |
| ·黄芪甲苷转化前体化合物的确定和纯化 | 第23-24页 |
| ·前体化合物结构鉴定 | 第24页 |
| ·底物制备 | 第24页 |
| ·5L摇瓶发酵转化 | 第24-25页 |
| ·发酵液中产物的分布 | 第25页 |
| ·菌体浸泡实验 | 第25页 |
| ·发酵产物的纯化工艺 | 第25-26页 |
| ·发酵产物黄芪甲苷结构鉴定 | 第26页 |
| ·转化途径研究 | 第26-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-50页 |
| ·菌种的定向筛选 | 第27页 |
| ·分析方法 | 第27-30页 |
| ·黄芪甲苷转化前体的确认 | 第30-35页 |
| ·前体化合物的结构鉴定 | 第35-40页 |
| ·前体化合物的微生物发酵转化 | 第40-42页 |
| ·微生物转化研究 | 第42-47页 |
| ·黄芪甲苷的结构鉴定 | 第47-48页 |
| ·代谢途径研究 | 第48-50页 |
| 小结 | 第50-51页 |
| 第二部分 伞枝犁头霉(A.corymbifera AS2)中黄芪皂苷去乙酰化酶的分离纯化、酶学性质及酶转化机制研究 | 第51-78页 |
| 第一章 Acorymbifera AS2中黄芪皂苷去乙酰化酶的分离纯化 | 第51-65页 |
| 1. 实验材料 | 第51-54页 |
| ·药品与试剂 | 第51-52页 |
| ·仪器与设备 | 第52页 |
| ·溶液 | 第52-54页 |
| 2. 方法 | 第54-57页 |
| ·去乙酰化酶活力的测定 | 第54页 |
| ·粗酶液的制备 | 第54页 |
| ·黄芪皂苷去乙酰化酶的分离纯化 | 第54-56页 |
| ·蛋白含量测定 | 第56页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第56-57页 |
| 3. 结果与分析 | 第57-64页 |
| ·菌体破壁效果检测 | 第57页 |
| ·粗酶液预处理 | 第57-58页 |
| ·去乙酰化酶的分离纯化 | 第58-64页 |
| 小结 | 第64-65页 |
| 第二章 A.corymbifera AS2中黄芪皂苷去乙酰化酶的研究 | 第65-78页 |
| 1. 实验材料 | 第65页 |
| ·药品与试剂 | 第65页 |
| ·缓冲液 | 第65页 |
| 2. 实验方法 | 第65-68页 |
| ·去乙酰化酶活力的测定 | 第65-66页 |
| ·酶分子量的测定 | 第66页 |
| ·pH对酶活力和酶稳定性的影响 | 第66-67页 |
| ·温度对酶活力和酶稳定性的影响 | 第67页 |
| ·酶动力常数的确定 | 第67页 |
| ·黄芪皂苷转化活性的检测 | 第67页 |
| ·部分氨基酸序列分析 | 第67-68页 |
| 3. 结果与分析 | 第68-76页 |
| ·黄芪皂苷去乙酰化酶分子量的测定 | 第68页 |
| ·pH和温度对酶活力和酶稳定性的影响 | 第68-70页 |
| ·黄芪皂苷去乙酰化酶的动力学常数 | 第70页 |
| ·部分氨基酸序列分析 | 第70-72页 |
| ·酶对前体化合物转化机制研究 | 第72-76页 |
| 小结 | 第76-78页 |
| 总结展望 | 第78-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 综述 黄芪甲苷的研究进展 | 第87-101页 |
| 参考文献 | 第96-101页 |
| 论文发表情况 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 附图 | 第103-126页 |
