| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 英文缩略词 | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-29页 |
| ·萜类化合物概述 | 第11-12页 |
| ·萜类化合物的定义 | 第11页 |
| ·萜类化合物的分类 | 第11-12页 |
| ·萜类化合物的生物合成途径 | 第12-15页 |
| ·萜类化合物生物合成途径概述 | 第12-14页 |
| ·甲羟戊酸途径(MVA途径) | 第14-15页 |
| ·非甲羟戊酸途径(MEP途径) | 第15页 |
| ·两条途径的相互关系 | 第15-16页 |
| ·MEP途径中关键酶的研究进展 | 第16-20页 |
| ·DXS | 第16-19页 |
| ·DXR | 第19-20页 |
| ·硫胺素焦磷酸(ThDP)依赖酶 | 第20-29页 |
| ·硫胺素焦磷酸及硫胺素焦磷酸依赖酶概述 | 第20-21页 |
| ·丙酮酸脱羧酶(PDC) | 第21-22页 |
| ·乙酰乳酸合酶(ALS) | 第22-24页 |
| ·转酮酶(TK) | 第24-26页 |
| ·光谱检测ThDP依赖酶反应中产生的中间体 | 第26-29页 |
| 第二章 DXS的诱导表达及其纯化 | 第29-38页 |
| ·材料与仪器 | 第29-32页 |
| ·实验菌株 | 第29页 |
| ·所需试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要溶液配方 | 第29-31页 |
| ·培养基配方 | 第31-32页 |
| ·实验方法,结果及分析 | 第32-37页 |
| ·重组酶DXS的大量诱导表达 | 第32页 |
| ·重组酶RcDXS的大量诱导表达 | 第32页 |
| ·重组酶EcDXS的大量诱导表达 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE初步检测诱导表达结果 | 第32-33页 |
| ·重组酶DXS的Ni-NTA亲和层析纯化 | 第33-34页 |
| ·Bradford法测定重组酶DXS的浓度 | 第34-35页 |
| ·浓缩重组蛋白DXS及其保存 | 第35-36页 |
| ·重组酶DXS的活性检测 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 DXS催化DXP形成机制的探索 | 第38-53页 |
| ·材料与仪器 | 第38页 |
| ·所需试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-51页 |
| ·底物D-GAP的制备 | 第38-40页 |
| ·D-GAP的化学合成 | 第38-39页 |
| ·D-GAP的纯化 | 第39页 |
| ·D-GAP的结构鉴定 | 第39-40页 |
| ·DXS催化DXP合成的机制探索 | 第40-51页 |
| ·DXP的合成 | 第40页 |
| ·纸色谱(PC)检测产物DXP | 第40-41页 |
| ·离子交换层析纯化DXP | 第41-42页 |
| ·DXP的结构鉴定 | 第42页 |
| ·ESI-MS鉴定纯化后的DXP | 第42-43页 |
| ·氘标记DXP的合成及结果分析 | 第43-51页 |
| ·重水溶液中以未标记的底物合成DXP | 第43-47页 |
| ·全氘代丙酮酸为底物在H_2O中合成DXP | 第47-51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 丙酮酸脱羧酶催化机制探索 | 第53-61页 |
| ·材料与仪器 | 第53页 |
| ·所需试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-59页 |
| ·丙酮酸脱羧酶活性定性检测 | 第53-54页 |
| ·核磁共振氢谱监测丙酮酸脱羧酶反应 | 第54-56页 |
| ·2,4-二硝基苯肼衍生结合LC-ESI-MS检测丙酮酸脱羧反应生成的乙醛 | 第56-58页 |
| ·正丁醇衍生结合GC-EI-MS检测丙酮酸脱羧反应生成的乙醛 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68页 |