小麦基因枪转化体系的建立和抗除草剂基因的导入
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 第一章 | 第8页 |
| 一、 文献综述 | 第8-20页 |
| 1． 植物基因工程概述 | 第8-9页 |
| 2． 植物抗除草剂基因工程 | 第9-13页 |
| 2．1 植物抗除草剂基因工程的策略 | 第10-12页 |
| 2．2 抗除草剂基因工程的应用前景 | 第12-13页 |
| 3． 禾谷类作物遗传转化研究进展 | 第13-20页 |
| 3．1 禾谷类作物的组织培养 | 第13-14页 |
| 3．2 应用于禾谷类作物的转化方法 | 第14-16页 |
| 3．3 禾谷类作物转化使用的选择标记和报告基因 | 第16-19页 |
| 3．4 小麦遗传转化的现状、存在问题及展望 | 第19-20页 |
| 二、 引 言 | 第20-21页 |
| 第二章 小麦再生体系的优化 | 第21-33页 |
| 一、 材料与方法 | 第21-24页 |
| 1． 植物材料 | 第21页 |
| 2． 试验方法 | 第21-22页 |
| 2．1 无菌材料的获得 | 第21-22页 |
| 2．2 培养基 | 第22页 |
| 2．3 植株材料的培养条件 | 第22页 |
| 3． 再生体系的建立 | 第22-24页 |
| 3．1 成熟胚的培养 | 第22页 |
| 3．2 幼穗的培养 | 第22-23页 |
| 3．3 幼胚的培养 | 第23-24页 |
| 二 结果与分析 | 第24-33页 |
| 1． 成熟胚培养 | 第24-25页 |
| 2． 幼穗再生体系的建立 | 第25-27页 |
| 2．1 不同发育时期幼穗的培养 | 第25-26页 |
| 2．2 不同激素条件下幼穗愈伤组织的分化 | 第26-27页 |
| 3． 幼胚再生体系的建立 | 第27-33页 |
| 3．1 幼胚接种时最佳的放置方式 | 第27-28页 |
| 3．2 ABA对幼胚愈伤组织分化的影响 | 第28-29页 |
| 3．3 不同细胞分裂素对幼胚愈伤组织分化的影响 | 第29-30页 |
| 3．4 ZT与不同生长素组合对愈伤组织分化的影响 | 第30-31页 |
| 3．5 干燥处理对愈伤组织分化的影响 | 第31页 |
| 3．6 不同生长素和蔗糖浓度对生根的影响 | 第31-33页 |
| 三、 讨论 | 第33-36页 |
| 第三章 小麦的基因枪转化 | 第36-57页 |
| 一、 材料与方法 | 第36-45页 |
| 1． 材料 | 第36-38页 |
| 1．1 受体材料 | 第36页 |
| 1．2 质粒 | 第36页 |
| 1．3 主要仪器 | 第36页 |
| 1．4 主要试剂 | 第36-37页 |
| 1．5 常用培养基或溶液配方 | 第37-38页 |
| 2． 试验方法 | 第38-45页 |
| 2．1 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第38页 |
| 2．2 质粒DNA的大量提取 | 第38-39页 |
| 2．3 质粒DNA的纯化 | 第39页 |
| 2．4 质粒DNA的定量 | 第39页 |
| 2．5 微弹制备和基因枪轰击 | 第39-40页 |
| 2．6 基因枪转化体系的优化 | 第40-41页 |
| 2．7 受体材料对除草剂Basta的敏感性试验 | 第41页 |
| 2．8 轰击前材料的准备和轰击后转化子的筛选 | 第41页 |
| 2．9 转基因植株的鉴定 | 第41-45页 |
| 二 结果与分析 | 第45-53页 |
| 1． 质粒DNA的提取、纯化和定量 | 第45页 |
| 2． 基因枪转化体系的优化 | 第45-49页 |
| 2．1 子弹包裹方式对GUS基因表达效果的影响 | 第45-46页 |
| 2．2 不同金粉及DNA用量对转化效果的影响 | 第46-47页 |
| 2．3 轰击的氦气压力对转化的影响 | 第47页 |
| 2．4 幼穗转化条件的优化 | 第47-48页 |
| 2．5 幼胚转化条件的优化 | 第48-49页 |
| 2．6 基因枪转化体系的确立 | 第49页 |
| 3． 受体材料对除草齐Basta的敏感性试验 | 第49页 |
| 4． 转化体的筛选和抗性植株的获得 | 第49-50页 |
| 5． 转化体的检测和鉴定 | 第50-53页 |
| 5．1 GUS基因瞬时表达的检测 | 第50-51页 |
| 5．2 抗性愈伤组织的PCR检测 | 第51-52页 |
| 5．3 转化植株叶片对除草齐Basta的抗性 | 第52页 |
| 5．4 转化植株的PCR检测 | 第52-53页 |
| 5．5 转化植株的PCR-Southern杂交 | 第53页 |
| 5．6 小麦转基因植株的育性表现 | 第53页 |
| 三、 讨论 | 第53-57页 |
| 附图 | 第57-60页 |
| 小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 缩略词表 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
