| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第1章 研究背景 | 第9-20页 |
| ·脂肪酶研究概况 | 第9-13页 |
| ·脂肪酶简介 | 第9页 |
| ·脂肪酶的结构及理化性质 | 第9-13页 |
| ·脂肪酶的应用研究进展 | 第13页 |
| ·粘质沙雷氏菌脂肪酶的研究概况 | 第13-14页 |
| ·真菌脂肪酶的分子生物学研究进展 | 第14-16页 |
| ·真菌脂肪酶的筛选与选育 | 第15页 |
| ·真菌脂肪酶基因的表达系统 | 第15-16页 |
| ·真菌脂肪酶的一级结构及其多态性 | 第16页 |
| ·微生物发酵生产脂肪酶的研究概况 | 第16-19页 |
| ·微生物脂肪酶的发酵培养基 | 第16-17页 |
| ·微生物脂肪酶的发酵条件优化 | 第17-18页 |
| ·微生物脂肪酶的高密度发酵 | 第18-19页 |
| ·本课题研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第2章 粘质沙雷氏菌脂肪酶新型基因lipB的克隆和表达 | 第20-33页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·实验材料与方法 | 第20-24页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-31页 |
| ·S.marcescens ECu1010脂肪酶基因lipB的克隆 | 第24-27页 |
| ·粘质沙雷氏菌脂肪酶LipB的表达 | 第27-28页 |
| ·重组菌的诱导和表达 | 第28-31页 |
| ·本章小结 | 第31-33页 |
| 第3章 粘质沙雷氏菌LipB的高密度发酵 | 第33-37页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·实验材料与方法 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-36页 |
| ·脂肪酶LipB的发酵进程 | 第34-35页 |
| ·脂肪酶LipB的发酵进程曲线 | 第35页 |
| ·诱导前后蛋白表达情况以及酶活测定 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 第4章 粘质沙雷氏菌脂肪酶LipB的纯化以及酶学性质研究 | 第37-50页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·实验材料与仪器 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·硫酸铵沉淀纯化LipB | 第37页 |
| ·DEAE-Sepharose离子交换层析纯化LipB | 第37-38页 |
| ·FPLC(Sephadex G75) | 第38页 |
| ·脂肪酶活力测定 | 第38-39页 |
| ·pH对酶活的影响以及脂肪酶LipB的pH稳定性 | 第39页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第39页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第39页 |
| ·不同有机溶剂对LipB稳定性的影响 | 第39页 |
| ·基于Swiss-model的脂肪酶三维结构建模与分析 | 第39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-48页 |
| ·硫酸铵沉淀纯化脂肪酶 | 第39-40页 |
| ·DEAE-Sepharose离子交换层析纯化LipB | 第40-42页 |
| ·FPLC(Sephadex G75)分离纯化LipB | 第42-44页 |
| ·LipB最适pH和pH稳定性 | 第44-45页 |
| ·LipB反应最适温度 | 第45页 |
| ·金属离子对LipB酶活的影响 | 第45-46页 |
| ·LipB对不同有机溶剂的耐受性 | 第46-47页 |
| ·LipB与LipA三维结构模型与分析 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 第5章 棒曲霉脂肪酶基因的克隆以及其在大肠杆菌中的表达 | 第50-67页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·实验材料与方法 | 第50-56页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-65页 |
| ·棒曲霉脂肪酶基因lipA~G的克隆 | 第56-61页 |
| ·棒曲霉脂肪酶基因的表达 | 第61-64页 |
| ·棒曲霉脂肪酶LipA~G的表达情况以及酶活性鉴定 | 第64-65页 |
| ·本章小结 | 第65-67页 |
| 总结与展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
