| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-13页 |
| 英文摘要 | 第13-17页 |
| 前言 | 第17-23页 |
| 第一部分 化合物030418与阿片受体结合和激动活性的研究 | 第23-35页 |
| 材料和方法 | 第23-28页 |
| 实验材料 | 第23-24页 |
| 仪器设备 | 第24-25页 |
| 实验方法 | 第25-28页 |
| 细胞培养 | 第25页 |
| 细胞膜蛋白的制备 | 第25页 |
| 蛋白浓度测定及标准曲线的绘制 | 第25页 |
| 配体结合实验 | 第25-26页 |
| GTPγS 实验 | 第26-27页 |
| 拮抗剂干预实验 | 第27-28页 |
| 结果处理及统计分析 | 第28页 |
| 实验结果 | 第28-35页 |
| 稳转CHO细胞中阿片受体表达水平的确定 | 第28-29页 |
| 030418、噻吩诺啡与不同阿片受体亚型的亲和力 | 第29-30页 |
| 030418、噻吩诺啡、二氢埃托啡对不同阿片受体亚型的激动活性 | 第30-32页 |
| 拮抗剂对于030418 镇痛作用的影响 | 第32-35页 |
| 第二部分 化合物030418的药效学评价和作用机制研究 | 第35-49页 |
| 材料和方法 | 第35-41页 |
| 实验材料 | 第35-36页 |
| 仪器设备 | 第36页 |
| 实验方法 | 第36-40页 |
| 小鼠热辐射甩尾实验 | 第36-37页 |
| 小鼠热板镇痛实验 | 第37页 |
| 小鼠慢性耐受实验 | 第37页 |
| 小鼠躯体依赖性实验 | 第37页 |
| 急性毒性实验 | 第37页 |
| 拮抗剂干预实验 | 第37-38页 |
| 离体器官实验 | 第38-39页 |
| 时间分辨荧光共振能量转移免疫实验 | 第39-40页 |
| 结果处理及统计分析 | 第40-41页 |
| 实验结果 | 第41-49页 |
| 030418 的镇痛作用 | 第41-42页 |
| 030418 的镇痛耐受 | 第42-43页 |
| 030418 的躯体依赖性 | 第43页 |
| 030418 的急性毒性 | 第43页 |
| 拮抗剂对于030418 耐受作用的影响 | 第43-44页 |
| 拮抗剂对于030418 躯体依赖性的影响 | 第44-45页 |
| 030418 与阿片受体结合后的解离 | 第45-46页 |
| 030418 慢性处理对于μ受体cAMP 信号通路的影响 | 第46-49页 |
| 第三部分 阿片KOR 和ORL1 受体二聚化与化合物030418 相互作用的研究 | 第49-71页 |
| 材料和方法 | 第49-61页 |
| 实验材料 | 第49-51页 |
| 仪器设备 | 第51-52页 |
| 实验方法 | 第52-60页 |
| 原代海马、皮层神经元细胞培养 | 第52页 |
| 传代细胞的培养 | 第52-53页 |
| 质粒的转化、扩增和保存 | 第53页 |
| 质粒DNA的小量提取 | 第53页 |
| 重组标签质粒pCMV-HA-hKOR、pCMV-Myc-hORL1 的构建 | 第53-55页 |
| 重组质粒pcDNA3.1/hygro(+)-hKOR的构建 | 第55-57页 |
| 瞬时转染 | 第57页 |
| 细胞免疫荧光实验 | 第57页 |
| 蛋白免疫印迹实验 | 第57-58页 |
| 免疫共沉淀实验 | 第58-59页 |
| 稳定共转染 CHO-KOR/ORL1 细胞株的建立 | 第59-60页 |
| 配体竞争实验 | 第60页 |
| 结果处理及统计分析 | 第60-61页 |
| 实验结果 | 第61-71页 |
| 神经元细胞的形态学和免疫学鉴定 | 第61页 |
| 神经元细胞上KOR 和ORL1 免疫荧光的共定位 | 第61-62页 |
| pCMV-HA-hKOR、pCMV-Myc-hORL1 的酶切鉴定和测序 | 第62-64页 |
| CHO、HEK293 细胞上HA-KOR 和Myc-ORL1 免疫荧光的共定位 | 第64页 |
| Flag-KOR 与Myc-ORL1 的免疫共沉淀 | 第64-65页 |
| 重组质粒pcDNA3.1/hygro(+)-KOR 的构建 | 第65-66页 |
| 重组质粒pcDNA3.1/hygro(+)-KOR 的鉴定 | 第66-67页 |
| 共转细胞CHO-KOR/ORL1的RT-PCR初筛结果 | 第67-68页 |
| 共转细胞CHO-KOR/ORL1 的[3H]diprenorphine 结合实验结果 | 第68-69页 |
| 030418 在CHO-KOR 和CHO-KOR/ORL1 亲和力的比较 | 第69-71页 |
| 讨论 | 第71-81页 |
| 030418 结构特点与镇痛活性的分析 | 第71-73页 |
| 030418 与阿片受体结合特性的分析 | 第73-74页 |
| 030418 激动ORL1 受体作用的分析 | 第74-75页 |
| 030418 镇痛耐受与依赖作用机制的分析 | 第75-77页 |
| 阿片KOR 和ORL1 受体二聚化与030418 受体作用关系的分析 | 第77-81页 |
| 结论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-89页 |
| 综述 | 第89-99页 |
| 参考文献 | 第95-99页 |
| 个人简历 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
