| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 英文缩略词 | 第15-17页 |
| 引言 | 第17-40页 |
| 1 乙烯 | 第17-20页 |
| ·乙烯与果实的成熟 | 第17-18页 |
| ·乙烯生物合成及相关酶 | 第18-20页 |
| ·ACC合成酶(ACS) | 第19页 |
| ·ACC氧化酶(ACO) | 第19页 |
| ·SAM合成酶 | 第19-20页 |
| ·SAM水解酶 | 第20页 |
| 2 乙烯的信号转导 | 第20-24页 |
| ·乙烯受体与乙烯的感受 | 第20-22页 |
| ·乙烯的胞质内信号转导 | 第22-23页 |
| ·乙烯的核内信号转导 | 第23页 |
| ·乙烯信号感受与转导模型 | 第23-24页 |
| 3 乙烯受体基因转基因植物的应用 | 第24-26页 |
| 4 草莓与乙烯 | 第26-28页 |
| ·乙烯与草莓成熟 | 第26页 |
| ·草莓的乙烯受体 | 第26-28页 |
| 5 草莓转基因研究进展 | 第28-33页 |
| ·草莓抗病虫害转基因研究 | 第29-30页 |
| ·草莓抗逆性转基因研究 | 第30-31页 |
| ·草莓抗除草剂转基因研究 | 第31页 |
| ·改善草莓品质转基因研究 | 第31-32页 |
| ·草莓耐贮运转基因研究 | 第32-33页 |
| ·草莓转基因中存在的问题和建议 | 第33页 |
| 6 反义RNA | 第33-37页 |
| ·反义RNA的作用机理 | 第34-35页 |
| ·反义RNA技术 | 第35页 |
| ·反义RNA在果实成熟调控中的应用 | 第35-37页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义基因工程研究进展 | 第35-36页 |
| ·果胶酯酶(PE)反义基因工程研究进展 | 第36页 |
| ·ACC合成酶反义基因的应用 | 第36-37页 |
| ·乙烯形成酶反义基因的应用 | 第37页 |
| ·乙烯受体反义基因的应用 | 第37页 |
| 7 本项目的研究内容 | 第37-38页 |
| 8 本项目研究的意义 | 第38-40页 |
| 第一章 草莓乙烯受体FaEtr1,FaErs1和FaEtr2基因的克隆及其反义表达载体的构建 | 第40-58页 |
| 1 材料与方法 | 第40-50页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·菌株和质粒 | 第40-41页 |
| ·酶与化学试剂 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-50页 |
| ·目的片段的克隆 | 第41-44页 |
| ·草莓总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第42页 |
| ·引物设计 | 第42-43页 |
| ·PCR产物的回收 | 第43页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·目的片段T载体的连接,转化及鉴定 | 第43-44页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第44页 |
| ·植物表达载体构建和鉴定 | 第44-50页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备,转化及质粒提取 | 第44-45页 |
| ·质粒的限制性酶切反应 | 第45页 |
| ·反义乙烯受体FaEtr1,FaErs1和FaEtr2表达载体的构建 | 第45页 |
| ·含反义乙烯受体FaEtr1和FaErs1双价表达载体的构建 | 第45页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第45-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-55页 |
| ·草莓RNA的提取 | 第50页 |
| ·草莓FaEtr1,FaErs1和FaEtr2基因克隆 | 第50-52页 |
| ·植物反义表达载体的构建及重组子的鉴定 | 第52-54页 |
| ·外源基因整合检测 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-58页 |
| 第二章 草莓高频离体再生体系的研究 | 第58-71页 |
| 1 材料与方法 | 第58-60页 |
| ·供试试材 | 第58页 |
| ·培养基与植物生长调节剂 | 第58-59页 |
| ·不定芽诱导 | 第58-59页 |
| ·不定芽伸长 | 第59页 |
| ·不定芽生根 | 第59页 |
| ·其他因素设计 | 第59-60页 |
| ·培养条件 | 第60页 |
| ·数据调查 | 第60页 |
| 2 结果和分析 | 第60-66页 |
| ·叶盘再生芽的生长动态 | 第60页 |
| ·外植体和外植体培养方式对不定芽诱导的影响 | 第60-61页 |
| ·叶龄对叶片不定芽诱导率的影响 | 第61页 |
| ·基因型对叶片不定芽诱导率的影响 | 第61-63页 |
| ·暗培养对叶片不定芽诱导率的影响 | 第63页 |
| ·不同植物生长调节剂配比对不定芽分化的影响 | 第63-65页 |
| ·不同植物生长调节剂配比对不定芽伸长的影响 | 第65页 |
| ·不同植物生长调节剂配比对不定芽生根的影响 | 第65-66页 |
| ·试管苗的移植 | 第66页 |
| 3 讨论 | 第66-71页 |
| 第三章 根癌农杆菌介导草莓遗传转化研究 | 第71-82页 |
| 1 材料与方法 | 第71-74页 |
| ·转化受体材料 | 第71页 |
| ·供试菌株 | 第71页 |
| ·培养基及培养条件 | 第71-72页 |
| ·试验方法 | 第72-74页 |
| ·抗生素敏感性试验 | 第72页 |
| ·试管苗叶片状态试验 | 第72页 |
| ·工程菌液的制备 | 第72-73页 |
| ·预培养时间、侵染时间、共培养时间和菌液浓度的优化 | 第73页 |
| ·遗传转化 | 第73-74页 |
| ·gus瞬时表达检测 | 第74页 |
| ·PCR检测 | 第74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-79页 |
| ·抗生素敏感性试验 | 第74-75页 |
| ·试管苗叶片状态试验 | 第75-76页 |
| ·预培养时间对转化的影响 | 第76-77页 |
| ·菌液浓度对转化的影响 | 第77页 |
| ·侵染时间对转化的影响 | 第77页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第77-78页 |
| ·转化植株再生与分子检测 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-82页 |
| 第四章 反义乙烯受体基因转化材料的获得及检测 | 第82-101页 |
| 1 材料与方法 | 第82-90页 |
| ·转化材料及培养条件 | 第82-83页 |
| ·农杆菌对草莓叶盘的转化和再生 | 第83页 |
| ·草莓DNA的提取及酶切 | 第83-85页 |
| ·方法一:CTAB法提取草莓DNA | 第83-84页 |
| ·试剂 | 第83-84页 |
| ·方法 | 第84页 |
| ·方法二:试剂盒提取 | 第84-85页 |
| ·DNA的酶解检测 | 第85页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第85-86页 |
| ·转基因植株的SOUTHERN印迹杂交检测 | 第86-89页 |
| ·杂交相关溶液 | 第86页 |
| ·样品制备 | 第86页 |
| ·Southern转膜 | 第86-87页 |
| ·探针标记 | 第87页 |
| ·探针效率检测 | 第87-88页 |
| ·预杂交 | 第88页 |
| ·杂交 | 第88页 |
| ·杂交后洗膜 | 第88页 |
| ·显色反应 | 第88-89页 |
| ·转基因植株的NORTHERN印迹杂交检测 | 第89-90页 |
| ·杂交相关试剂及其配制 | 第89页 |
| ·RNA甲醛琼脂糖凝胶电泳 | 第89页 |
| ·印迹 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-97页 |
| ·草莓DNA的提取及酶切 | 第90页 |
| ·转化及抗性苗的获得 | 第90-92页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第92-94页 |
| ·转基因植株的SOUTHERN杂交检测 | 第94-97页 |
| ·转基因植株的NORTHERN印迹杂交检测 | 第97页 |
| 3 讨论 | 第97-101页 |
| 第五章 转反义乙烯受体基因草莓乙烯合成特性相关研究 | 第101-107页 |
| 1 材料与方法 | 第101-102页 |
| ·乙烯测定方法 | 第101-102页 |
| ·叶片脱落试验 | 第102页 |
| ·乙烯处理方法 | 第102页 |
| ·1-MCP处理方法 | 第102页 |
| ·呼吸强度测定 | 第102页 |
| 2 结果与分析 | 第102-104页 |
| ·乙烯释放量的变化 | 第102-103页 |
| ·叶片脱落试验 | 第103-104页 |
| ·呼吸强度的变化 | 第104页 |
| 3 讨论 | 第104-107页 |
| 总结及后续研究展望 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 读博期间发表的相关文章 | 第120页 |
