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真核翻译起始因子5A与月季耐热遗传机制研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
1 引言第9-15页
   ·选用月季为研究材料的目的与意义第9-10页
   ·EIF-5A基因的研究进展第10-15页
     ·eIF-5A在翻译后修饰起作用第10页
     ·eIF-5A翻译够修饰过程中的两个酶第10-11页
     ·eIF-5A不是一个传统意义上的翻译起始因子第11页
     ·eIF-5A的功能研究第11-12页
     ·抑制植物eIF-5A的活性产生多向性作用第12-13页
     ·抑制植物eIF-5A表达产生的多重效应可用于植物经济性状的改良第13-15页
2 材料与方法第15-26页
   ·材料第15页
     ·植物材料第15页
     ·细菌载体和主要试剂第15页
     ·主要的仪器设备第15页
   ·方法第15-26页
     ·月季eIF-5A基因cDNA的克隆第15-19页
     ·月季基因组DNA提取与Southern blot分析第19-21页
     ·RT-PCR第21页
     ·RceIF-5A的原核表达及抗His抗体的Western blot检测第21-23页
     ·RceIF-5A的大肠杆菌实验第23页
     ·AntiRceIF-5A的酵母实验第23-26页
3 结果与分析第26-36页
   ·月季EIF-5A基因的克隆和序列分析第26-27页
   ·RCEIF-5A基因和其他物种EIF-5A基因的系统进化分析第27-28页
   ·SOUTHERN杂交分析第28页
   ·RT-PCR检测RCEIF-5A基因的表达模式第28-29页
   ·含有月季EIF5A编码基因的原核表达载体的构建与鉴定第29页
   ·RC EIF-5A在E. COLI中的诱导表达第29-30页
   ·重组菌BL21 (PET32A-EIF5A)对温度胁迫的抗性分析第30-32页
     ·重组菌BL21 (pET32a-eIF5A)在正常条件下的生长实验第30-31页
     ·重组菌BL21 (pET32a-eIF5A)在高温条件下的生长实验第31-32页
     ·重组菌BL21 (pET32a-eIF5A)在低温条件下的生长实验第32页
   ·ANTI-EIF-5A基因的真核表达载体构建与鉴定第32-33页
   ·含有空载体和重组质粒PET32A-EIF-5A的ECOLIBL21在正常情况下的生长曲线第33-36页
     ·酵母中anti-RceIF-5A在正常条件下的生长第33-34页
     ·含有重组质粒anti-RceIF-5A的酵母在高温情况下的生长第34-36页
4 讨论第36-38页
   ·月季EIF-5A基因的获得与生物信息学分析第36页
   ·月季EIF-5A基因在大肠杆菌和酵母中的功能研究第36页
   ·月季EIF-5A基因在不同器官中的表达特性和SOUTHERN BLOT分析第36-38页
5 结论第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-43页
附录第43-48页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第48页

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