摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
1 引言 | 第9-15页 |
·选用月季为研究材料的目的与意义 | 第9-10页 |
·EIF-5A基因的研究进展 | 第10-15页 |
·eIF-5A在翻译后修饰起作用 | 第10页 |
·eIF-5A翻译够修饰过程中的两个酶 | 第10-11页 |
·eIF-5A不是一个传统意义上的翻译起始因子 | 第11页 |
·eIF-5A的功能研究 | 第11-12页 |
·抑制植物eIF-5A的活性产生多向性作用 | 第12-13页 |
·抑制植物eIF-5A表达产生的多重效应可用于植物经济性状的改良 | 第13-15页 |
2 材料与方法 | 第15-26页 |
·材料 | 第15页 |
·植物材料 | 第15页 |
·细菌载体和主要试剂 | 第15页 |
·主要的仪器设备 | 第15页 |
·方法 | 第15-26页 |
·月季eIF-5A基因cDNA的克隆 | 第15-19页 |
·月季基因组DNA提取与Southern blot分析 | 第19-21页 |
·RT-PCR | 第21页 |
·RceIF-5A的原核表达及抗His抗体的Western blot检测 | 第21-23页 |
·RceIF-5A的大肠杆菌实验 | 第23页 |
·AntiRceIF-5A的酵母实验 | 第23-26页 |
3 结果与分析 | 第26-36页 |
·月季EIF-5A基因的克隆和序列分析 | 第26-27页 |
·RCEIF-5A基因和其他物种EIF-5A基因的系统进化分析 | 第27-28页 |
·SOUTHERN杂交分析 | 第28页 |
·RT-PCR检测RCEIF-5A基因的表达模式 | 第28-29页 |
·含有月季EIF5A编码基因的原核表达载体的构建与鉴定 | 第29页 |
·RC EIF-5A在E. COLI中的诱导表达 | 第29-30页 |
·重组菌BL21 (PET32A-EIF5A)对温度胁迫的抗性分析 | 第30-32页 |
·重组菌BL21 (pET32a-eIF5A)在正常条件下的生长实验 | 第30-31页 |
·重组菌BL21 (pET32a-eIF5A)在高温条件下的生长实验 | 第31-32页 |
·重组菌BL21 (pET32a-eIF5A)在低温条件下的生长实验 | 第32页 |
·ANTI-EIF-5A基因的真核表达载体构建与鉴定 | 第32-33页 |
·含有空载体和重组质粒PET32A-EIF-5A的ECOLIBL21在正常情况下的生长曲线 | 第33-36页 |
·酵母中anti-RceIF-5A在正常条件下的生长 | 第33-34页 |
·含有重组质粒anti-RceIF-5A的酵母在高温情况下的生长 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
·月季EIF-5A基因的获得与生物信息学分析 | 第36页 |
·月季EIF-5A基因在大肠杆菌和酵母中的功能研究 | 第36页 |
·月季EIF-5A基因在不同器官中的表达特性和SOUTHERN BLOT分析 | 第36-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
附录 | 第43-48页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第48页 |