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抗鹅细小病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及其识别抗原表位的初步鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
1 引言第9-18页
   ·鹅细小病毒的生物学特性研究进展第9-13页
     ·病毒形态特征及理化特性第9-10页
     ·病毒培养特性第10页
     ·基因组结构第10-11页
     ·GPV 基因组的转录和调节第11-12页
     ·细小病毒核衣壳蛋白的结构特征第12-13页
   ·GPV 流行现状的特点第13-14页
   ·小鹅瘟的症状及病理变化第14-15页
   ·GPV 诊断研究进展第15-16页
     ·GPV 诊断方法的研究进展第15-16页
     ·防治第16页
   ·单克隆抗体技术及其在小鹅瘟病毒方面的研究第16-17页
   ·本研究的目的及意义第17-18页
2 材料与方法第18-27页
   ·实验材料第18-21页
     ·细胞、质粒、蛋白及菌株第18页
     ·实验动物第18页
     ·表达载体第18页
     ·试剂第18-20页
     ·主要仪器第20-21页
   ·实验方法第21-27页
     ·重组GPV-VP1 蛋白的诱导表达及纯化第21-23页
     ·单克隆抗体的制备第23-25页
     ·杂交瘤细胞的鉴定第25-26页
     ·单克隆抗体的鉴定第26-27页
3 结果第27-35页
   ·目的片段GPV-VP1 的回收产物及PET-30A(+)-GPV-VP1 的单双酶切产物第27页
   ·重组GPV-VP1 蛋白的表达和纯化第27-29页
     ·诱导表达菌的SDS-PAGE 分析第27-28页
     ·亲和层析的纯化第28页
     ·GPV-VP1 蛋白western blot 的特异性鉴定第28-29页
   ·细胞融合与筛选结果第29-30页
     ·ELISA 筛选方法建立的结果第29-30页
     ·细胞融合率第30页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选结果第30页
   ·单克隆抗体鉴定结果第30-31页
     ·单克隆抗体与免疫原的Western blot 分析第30页
     ·单克隆抗体亚类鉴定结果第30-31页
   ·杂交瘤细胞鉴定结果第31-33页
     ·杂交瘤细胞染色体数鉴定第31-32页
     ·杂交瘤冻存前后分泌抗体稳定性的鉴定结果第32-33页
   ·WESTERN BLOT 对单抗识别的抗原表位的初步分析第33页
   ·WESTERN BLOT 对单抗识别的表位的进一步分析第33-35页
4 讨论第35-38页
   ·制备单克隆抗体的免疫原的选择第35-36页
   ·ELISA 筛选方法的建立第36页
   ·单克隆抗体所针对的B 细胞抗原表位的分析第36-37页
   ·抗GPV-VP1 单克隆抗体的应用价值第37-38页
5 结论第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-50页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第50页

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