| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-26页 |
| ·大豆疫霉根腐病研究现状 | 第10-15页 |
| ·大豆疫霉菌的分类地位和特点 | 第10-11页 |
| ·大豆疫霉根腐病研究状况 | 第11-13页 |
| ·大豆疫霉根腐病的防治状况 | 第13-15页 |
| ·绿色荧光蛋白研究现状 | 第15-25页 |
| ·绿色荧光蛋白的基础理论研究 | 第15-17页 |
| ·绿色荧光蛋白的改造 | 第17-19页 |
| ·绿色荧光蛋白的应用特点 | 第19-20页 |
| ·影响绿色荧光蛋白表达强度的因素 | 第20-21页 |
| ·绿色荧光蛋白应用 | 第21-23页 |
| ·绿色荧光蛋白标记真菌的表达载体 | 第23-25页 |
| ·研究的目的与意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-35页 |
| ·供试材料 | 第26-27页 |
| ·质粒与菌株 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·载体构建所用试剂 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-35页 |
| ·pEGFP-C1 质粒DNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增EGFP 目的片段 | 第28-29页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第29页 |
| ·质粒载体和EGFP 基因片段的制备 | 第29-30页 |
| ·EGFP 基因和载体pcDNA3.1(-)/Hygro 的连接 | 第30页 |
| ·连接产物对E.coliDH5α感受态细胞的转化 | 第30-31页 |
| ·重组质粒DNA 提取及酶切鉴定 | 第31页 |
| ·中间载体pcDNA-EGFP-ham 构建 | 第31-33页 |
| ·表达载体pc-EGFP-H2 构建 | 第33-34页 |
| ·表达载体pc-EGFP-H2 基因序列分析 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-50页 |
| ·PEGFP-C1 质粒DNA 提取 | 第35页 |
| ·PCR 扩增EGFP 目的片段及PCR 产物纯化回收 | 第35-37页 |
| ·中间载体PCDNA-EGFP 的构建及酶切鉴定 | 第37-39页 |
| ·EGFP 基因和载体pcDNA3.1(-)/Hygro 的制备 | 第37-38页 |
| ·中间载体pcDNA-EGFP 的提取及酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·中间载体PCDNA-EGFP-HAM 的构建及酶切鉴定 | 第39-43页 |
| ·ham34 基因片段和载体pcDNA-EGFP 的制备 | 第39-41页 |
| ·中间载体pcDNA-EGFP-ham 的提取及酶切鉴定 | 第41-43页 |
| ·表达载体PC-EGFP-H2 的构建及酶切鉴定 | 第43-46页 |
| ·带有NheⅠ粘性末端的载体pcDNA-EGFP-ham 的制备 | 第43-44页 |
| ·带有NheⅠ粘性末端的ham34 基因片段制备 | 第44-45页 |
| ·重组质粒pc-EGFP-H2 的提取与鉴定 | 第45-46页 |
| ·表达载体PC-EGFP-H2 基因序列分析 | 第46-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| ·绿色荧光蛋白 | 第50页 |
| ·载体的选择 | 第50-51页 |
| ·启动子的选择 | 第51页 |
| ·设计引物考虑的问题 | 第51-52页 |
| ·表达载体构建 | 第52-53页 |
| ·下一步研究方向 | 第53-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第63页 |
