| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-19页 |
| 缩略词(ABBREVIATION) | 第19-22页 |
| 第1章 文献综述 | 第22-53页 |
| 1 禽流感研究进展 | 第22-32页 |
| ·病原 | 第22页 |
| ·流行病学 | 第22-27页 |
| ·宿主范围 | 第22-23页 |
| ·病毒的传播 | 第23页 |
| ·流行及危害 | 第23-27页 |
| ·禽流感检测方法研究进展 | 第27-32页 |
| ·病原学检测 | 第27页 |
| ·血清学检测 | 第27-30页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第30-32页 |
| 2 新城疫研究进展 | 第32-36页 |
| ·新城疫病毒(NDV) | 第33页 |
| ·新城疫的传播与危害 | 第33-34页 |
| ·新城疫检测方法 | 第34-36页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第34-35页 |
| ·凝(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第35页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第35页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第35-36页 |
| 3.胶体金免疫层析技术 | 第36-53页 |
| ·胶体金的特性及其制备 | 第37-43页 |
| ·胶体金的特性 | 第37-38页 |
| ·胶体金的制备 | 第38-43页 |
| ·免疫胶体金的制备及其应用 | 第43-46页 |
| ·免疫胶体金的制备 | 第44-45页 |
| ·免疫胶体金的应用 | 第45-46页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的构成 | 第46-47页 |
| ·胶体金免疫层析技术的原理及其优势 | 第47-50页 |
| ·胶体金免疫层析技术的原理 | 第47-49页 |
| ·胶体金免疫层析技术的优势 | 第49-50页 |
| ·胶体金免疫层析技术的应用 | 第50-53页 |
| ·病原体抗原或抗体的检测 | 第50-51页 |
| ·激素或疾病相关蛋白的检测 | 第51页 |
| ·药物残留及毒品的检测 | 第51-52页 |
| ·寄生虫抗原抗体的检测 | 第52-53页 |
| 第2章 鸡抗AIV、鸡抗NDV和山羊抗鼠多克隆抗体的制备及纯化 | 第53-61页 |
| 1 研究目的与意义 | 第53页 |
| 2 材料与方法 | 第53-57页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·病毒 | 第53页 |
| ·标准抗原和抗体 | 第53页 |
| ·健康Balb/c小鼠腹水IgG | 第53页 |
| ·SPF鸡胚及实验动物 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·溶液的配制 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-57页 |
| ·病毒的增殖与纯化 | 第54-55页 |
| ·免疫原的乳化 | 第55页 |
| ·动物免疫 | 第55-56页 |
| ·鸡抗AIVIgG、鸡抗NDVIgG、羊抗鼠IgG的提取及纯化 | 第56-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-58页 |
| ·病毒的增殖与纯化(浓缩) | 第57页 |
| ·AIV的增殖与纯化(浓缩) | 第57页 |
| ·NDV的增殖与纯化(浓缩) | 第57页 |
| ·免疫血清IGG的提取及纯化 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| ·抗原 | 第58-59页 |
| ·免疫程序 | 第59-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 第3章 单克隆抗体的制备与纯化 | 第61-73页 |
| 1 研究的目的和意义 | 第61页 |
| 2 材料和方法 | 第61-66页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·病毒、抗原 | 第61页 |
| ·细胞、实验动物 | 第61-62页 |
| ·试剂和培养基 | 第62页 |
| ·主要溶液的配制 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-66页 |
| ·动物免疫 | 第62-63页 |
| ·SP2/0骨髓瘤细胞的活化 | 第63页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第63-66页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第66页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第66页 |
| 3 结果与分析 | 第66-69页 |
| ·细胞融合 | 第66-67页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第67页 |
| ·AIVGST-NP免疫脾细胞与瘤细胞融合后的筛选 | 第67页 |
| ·NDV免疫脾细胞与瘤细胞融合后的筛选 | 第67页 |
| ·单克隆抗体效价测定及特异性鉴定 | 第67-68页 |
| ·AIV-NP单克隆抗体效价测定及特异性鉴定 | 第67页 |
| ·NDV-HN单克隆抗体效价测定及特异性鉴定 | 第67-68页 |
| ·单克隆抗体的亚类鉴定 | 第68页 |
| ·杂交瘤细胞染色体数的检测 | 第68页 |
| ·禽流感H55E8、H94C4单克隆细胞株的复苏、生产与效价测定 | 第68页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| ·动物免疫 | 第69-70页 |
| ·细胞融合 | 第70页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第70-71页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆 | 第71页 |
| ·关于饲养细胞 | 第71页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第71-72页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第72页 |
| 5 结论 | 第72-73页 |
| 第4章 胶体金及金标抗体的制备 | 第73-84页 |
| 1 研究的目的和意义 | 第73页 |
| 2 材料与方法 | 第73-76页 |
| ·材料 | 第73-74页 |
| ·仪器 | 第73页 |
| ·抗体及化学试剂 | 第73-74页 |
| ·溶液的配制 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-76页 |
| ·胶体金的制备 | 第74-75页 |
| ·胶体金的鉴定 | 第75页 |
| ·禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体(H94C4)的标记条件 | 第75-76页 |
| ·禽流感病毒核蛋白、H5亚型血凝素及新城疫病毒血凝素神经氨酸酶单克隆抗体的标记条件 | 第76页 |
| ·金标单抗复合物的制备与纯化 | 第76页 |
| 3 结果与分析 | 第76-80页 |
| ·胶体金的制备 | 第76-78页 |
| ·禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体(H94C4)的标记条件 | 第78-79页 |
| ·最适标记胶体金pH值 | 第78-79页 |
| ·最适标记量 | 第79页 |
| ·单克隆抗体H55E8、AIV-NP单克隆抗体及NDV血凝素神经氨酸酶单克隆抗体的标记条件 | 第79-80页 |
| ·金标单抗复合物的鉴定 | 第80页 |
| 4 讨论 | 第80-83页 |
| ·胶体金的制备 | 第80-82页 |
| ·胶体金制备方法 | 第80-81页 |
| ·胶体金制备的条件 | 第81-82页 |
| ·胶体金的质量鉴定 | 第82页 |
| ·标记用蛋白的准备 | 第82页 |
| ·胶体金的标记 | 第82-83页 |
| ·最佳标记pH值 | 第82页 |
| ·最适蛋白标记量 | 第82-83页 |
| ·免疫胶体金的保存 | 第83页 |
| 5 结论 | 第83-84页 |
| 第5章 H5、H9亚型禽流感病毒免疫层析快速检测及鉴别诊断试纸条的研制 | 第84-102页 |
| 1 研究的目的和意义 | 第84页 |
| 2 材料与方法 | 第84-91页 |
| ·材料 | 第84-85页 |
| ·病毒、抗原、抗体 | 第84-85页 |
| ·层析材料、仪器 | 第85页 |
| ·溶液的配制 | 第85页 |
| ·方法 | 第85-91页 |
| ·H9亚型禽流感病毒免疫层析快速检测试纸条的建立 | 第85-88页 |
| ·H5亚型禽流感病毒免疫层析快速检测试纸条的建立 | 第88-90页 |
| ·H5、H9亚型禽流感病毒鉴别诊断试纸条的建立 | 第90-91页 |
| 3 结果与分析 | 第91-98页 |
| ·H9亚型AIV免疫层析快速检测试纸条的研制 | 第91-95页 |
| ·最适反应条件的确定 | 第91-93页 |
| ·试纸条特异性试验 | 第93-95页 |
| ·试纸条敏感性试验 | 第95页 |
| ·试纸条稳定性试验 | 第95页 |
| ·H5亚型AIV免疫层析快速检测试纸条的研制 | 第95-97页 |
| ·各种生物材料最佳浓度的选择 | 第95-96页 |
| ·试纸条的特异性实验 | 第96页 |
| ·试纸条敏感性试验 | 第96-97页 |
| ·H5、H9亚型AIV鉴别诊断试纸条的研制 | 第97-98页 |
| ·各种生物材料最佳浓度的选择 | 第97页 |
| ·试纸条的特异性实验 | 第97-98页 |
| 4 讨论 | 第98-100页 |
| ·最适反应条件的确定 | 第98-100页 |
| ·硝酸纤维素(NC)膜的选择 | 第98页 |
| ·抗体包被液的选择 | 第98-99页 |
| ·封闭液的选择 | 第99页 |
| ·反应体系的确定 | 第99-100页 |
| ·关于鉴别诊断 | 第100页 |
| 5 结论 | 第100-102页 |
| 第6章 禽流感和新城疫病毒免疫层析快速检测及鉴别诊断试纸条的研制 | 第102-111页 |
| 1 研究的目的和意义 | 第102页 |
| 2 材料与方法 | 第102-105页 |
| ·材料 | 第102-103页 |
| ·病毒、抗原、抗体及层析材料 | 第102页 |
| ·溶液的配制 | 第102-103页 |
| ·方法 | 第103-105页 |
| ·免疫层析快速检测试纸条的构建 | 第103-105页 |
| ·各种生物材料最佳浓度的选择 | 第105页 |
| ·试纸条的特异性实验 | 第105页 |
| ·试纸条的敏感性实验 | 第105页 |
| 3 结果与分析 | 第105-109页 |
| ·各种生物材料最佳浓度的选择 | 第105-106页 |
| ·AIV快速检测试纸条最佳生物材料浓度的选择 | 第105页 |
| ·NDV快速检测试纸条最佳生物材料浓度的选择 | 第105-106页 |
| ·AIV和NDV快速鉴别诊断试纸条最佳生物材料浓度的选择 | 第106页 |
| ·试纸条的特异性实验 | 第106-107页 |
| ·AIV快速检测试纸条的特异性实验 | 第106页 |
| ·NDV快速检测试纸条的特异性实验 | 第106-107页 |
| ·AIV和NDV快速鉴别诊断试纸条的特异性实验 | 第107页 |
| ·试纸条的敏感性实验 | 第107-109页 |
| ·AIV快速检测试纸条的敏感性实验 | 第107-108页 |
| ·NDV快速检测试纸条的敏感性实验 | 第108-109页 |
| 4 讨论 | 第109-110页 |
| ·金标结合垫的制备 | 第109页 |
| ·鉴别诊断试纸条的构建 | 第109-110页 |
| 5 结论 | 第110-111页 |
| 第7章 禽流感病毒通用型及H9亚型快速检测试剂盒的研制与应用 | 第111-122页 |
| 1 研究的目的和意义 | 第111页 |
| 2 材料与方法 | 第111-115页 |
| ·材料 | 第111页 |
| ·方法 | 第111-115页 |
| ·快速检测试剂盒的组成 | 第111-113页 |
| ·快速检测试剂盒的使用方法 | 第113-114页 |
| ·试剂盒的保存期、特异性、重复性和敏感性试验 | 第114页 |
| ·快速检测试剂盒的应用 | 第114-115页 |
| 3 结果与分析 | 第115-119页 |
| ·试剂盒的特异性和敏感性试验 | 第115页 |
| ·试剂盒的保存期试验 | 第115页 |
| ·试剂盒的重复性试验 | 第115-116页 |
| ·试剂盒的样品检测结果 | 第116-119页 |
| ·动物实验样品检测结果 | 第116-117页 |
| ·临床样品检测结果 | 第117-118页 |
| ·检测样品病毒分离验证结果 | 第118-119页 |
| 4 讨论 | 第119-120页 |
| ·试剂盒的特性 | 第119-120页 |
| ·关于亚型鉴定 | 第120页 |
| ·检测样品范围 | 第120页 |
| 5 结论 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-142页 |
| 研究生期间发表的主要论文 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143页 |
