| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-30页 |
| ·国内外研究现状(文献综述) | 第17-27页 |
| ·完全变态昆虫的成虫盘之一——翅原基 | 第17-18页 |
| ·鳞翅目昆虫的翅面鳞片 | 第18-19页 |
| ·果蝇刚毛的发育 | 第19-21页 |
| ·achaete-scute复合体(AS-C)及其同源体(ASH) | 第21-23页 |
| ·氧气供应与鳞片发育的关系及气管发生的调控机制 | 第23-24页 |
| ·家蚕血球的生成机理 | 第24-27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27-28页 |
| ·研究目的 | 第27页 |
| ·研究意义 | 第27-28页 |
| ·研究内容 | 第28-30页 |
| ·家蚕翅原基发育规律的研究及翅原基摘除、移植技术的建立 | 第28页 |
| ·家蚕无鳞片翅突变体scaleless的形态学分析 | 第28页 |
| ·家蚕无鳞片翅突变体scaleless蛹期翅面细胞凋亡研究 | 第28页 |
| ·家蚕AS-C同源体基因的克隆、鉴定与分析 | 第28-29页 |
| ·家蚕无鳞片翅突变体scaleless形成的分子机理 | 第29-30页 |
| 第二章 家蚕翅原基发育规律的研究 | 第30-37页 |
| ·材料与方法 | 第30-31页 |
| ·家蚕 | 第30页 |
| ·翅原基的解剖与测量 | 第30-31页 |
| ·翅原基的摘除实验 | 第31页 |
| ·翅原基的移植实验 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-35页 |
| ·五龄幼虫及变态过程中翅原基的大小变化 | 第31-32页 |
| ·家蚕五龄幼虫翅原基及蛹期翅芽形态的变化 | 第32-33页 |
| ·家蚕翅原基的摘除 | 第33-34页 |
| ·家蚕翅原基的移植 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 造血器官-翅原基复合体摘除对家蚕造血功能的影响 | 第37-43页 |
| ·材料与方法 | 第37-38页 |
| ·家蚕 | 第37页 |
| ·造血器官-翅原基复合体的摘除 | 第37-38页 |
| ·造血器官-翅原基复合体全部摘除后家蚕幼虫的外源激素处理 | 第38页 |
| ·血细胞记数 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·全部造血器官-翅原基复合体摘除后家蚕的发育情况 | 第38-39页 |
| ·造血器官-翅原基复合体全部摘除对家蚕五龄幼虫体内血球数的影响 | 第39页 |
| ·外源激素对4HWC家蚕体内血球数的影响 | 第39-40页 |
| ·摘除不同数量翅原基对熟蚕体内血球数的影响 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 家蚕无鳞片翅突变体scaleless的形态学分析 | 第43-51页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·家蚕 | 第43-44页 |
| ·突变体scaleless与野生型家蚕翅(翅原基)的形态比较 | 第44页 |
| ·突变体scaleless与野生型家蚕之间翅原基的解剖及相互异位移植 | 第44页 |
| ·翅原基受伤对鳞片和翅发育的影响 | 第44页 |
| ·高氧分压处理蚕蛹 | 第44-45页 |
| ·气管丛的解剖 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-49页 |
| ·WT与scaleless成虫翅的形态比较 | 第45-46页 |
| ·WT与scaleless家蚕间的翅原基相互异位移植 | 第46页 |
| ·WT与scaleless家蚕五龄幼虫翅原基及蛹期翅芽的解剖与观察 | 第46-47页 |
| ·翅原基表面划痕和主气管切断对鳞片和翅发育的影响 | 第47-48页 |
| ·高氧分压对翅面鳞片发育的影响 | 第48-49页 |
| ·无鳞片翅突变体scaleless与野生型家蚕气管系统的比较 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 家蚕无鳞片翅突变体scaleless蛹期翅面细胞凋亡研究 | 第51-58页 |
| ·材料与方法 | 第52-53页 |
| ·家蚕 | 第52页 |
| ·吖啶橙/溴化乙锭(Acridine Orange/Ethidium Bromide,AO/EB)和Hoechst染色 | 第52页 |
| ·Caspase-3/7活性检测 | 第52-53页 |
| ·DNA片断化检测 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-56页 |
| ·AO/EB染色结果表明scaleless蛹翅面细胞在发育过程中大量死亡 | 第53-55页 |
| ·Caspase-3/7活性检测结果表明翅面上的细胞死亡是由凋亡引起的 | 第55-56页 |
| ·scaleless蛹翅中凋亡小体和DNA片段化现象明显 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第六章 家蚕AS-C同源体基因的克隆、鉴定与功能分析 | 第58-85页 |
| ·材料与方法 | 第58-67页 |
| ·家蚕 | 第58页 |
| ·菌种与质粒 | 第58页 |
| ·总RNA抽提 | 第58-59页 |
| ·甲醛变性琼脂糖凝胶电泳 | 第59-60页 |
| ·反转录PCR(RT-PCR) | 第60页 |
| ·cDNA末端快速扩增RACE(SMART-RACE cDNA amplification kit,Clontech) | 第60-61页 |
| ·质粒DNA少量抽提 | 第61页 |
| ·DNA和RNA浓度测定 | 第61页 |
| ·质粒DNA的限制性内切酶反应 | 第61-62页 |
| ·DNA电泳和DNA胶回收 | 第62页 |
| ·DNA连接 | 第62页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第62-63页 |
| ·质粒DNA或连接产物的转化 | 第63页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第63页 |
| ·家蚕基因组DNA的制备(赵巧玲等,2000) | 第63-64页 |
| ·Southern杂交 | 第64-65页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR(Realtime Quantitative RT-PCR) | 第65-66页 |
| ·DNA和蛋白质序列的比对及进化分析 | 第66页 |
| ·本章所用PCR引物列表 | 第66-67页 |
| ·结果 | 第67-79页 |
| ·家蚕AS-C同源体基因Bm-ASH1 cDNA的克隆 | 第67-68页 |
| ·家蚕AS-C同源体基因Bm-ASH2、Bm-ASH3及Bm-ase cDNA的克隆 | 第68-71页 |
| ·家蚕ASH基因与其他昆虫ASH基因的同源性比较 | 第71-73页 |
| ·昆虫ASH基因的进化分析 | 第73-74页 |
| ·家蚕ASH基因在不同组织中的表达分布 | 第74-75页 |
| ·家蚕ASH基因在胚胎发育过程中的表达时相 | 第75-77页 |
| ·家蚕ASH基因结构分析 | 第77-79页 |
| ·讨论 | 第79-85页 |
| 第七章 家蚕无鳞片翅突变体scaleless形成的分子机理的初步探讨 | 第85-110页 |
| ·材料与方法 | 第85-96页 |
| ·家蚕 | 第85-86页 |
| ·菌种与质粒 | 第86页 |
| ·半定量RT-PCR | 第86页 |
| ·原位杂交 | 第86-88页 |
| ·昆虫细胞操作 | 第88-89页 |
| ·DNA点突变的引入 | 第89页 |
| ·质粒DNA的大量抽提 | 第89-90页 |
| ·家蚕蛹翅核蛋白抽提(Blough et al.,1999;Feng et al.,2000) | 第90-91页 |
| ·凝胶阻滞分析 | 第91-94页 |
| ·DNA碱性电泳 | 第94页 |
| ·质粒介导的功能基因在家蚕蛹翅中的过量表达 | 第94页 |
| ·本章所用引物和寡核苷酸序列列表 | 第94-96页 |
| ·结果 | 第96-107页 |
| ·家蚕ASH基因在翅原基和蛹翅中的表达时相 | 第96页 |
| ·家蚕Bm-ASH1和Bm-ASH2基因在家蚕蛹翅中的表达分布 | 第96-99页 |
| ·家蚕Bm-ASH2基因启动子活性分析 | 第99-103页 |
| ·突变体家蚕Bm-ASH2基因启动子缺失区段与核蛋白结合实验 | 第103页 |
| ·家蚕突变体scaleless的遗传学分析 | 第103-104页 |
| ·家蚕Bm-ASH2基因在sl蛹翅中过量表达对蛾翅表型的影响 | 第104-107页 |
| ·讨论 | 第107-110页 |
| 第八章 结论 | 第110-113页 |
| 参考文献 | 第113-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 作者简历 | 第123页 |
