摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
引言 | 第14-36页 |
1.鸡传染性支气管炎研究进展 | 第14-17页 |
·鸡传染性支气管炎概述 | 第14页 |
·国内外研究现状 | 第14-17页 |
·国外流行情况 | 第14-16页 |
·国内流行情况 | 第16-17页 |
2.鸡传染性支气管炎病毒的研究进展 | 第17-34页 |
·鸡传染性支气管炎病毒 | 第17-18页 |
·IBV的分型 | 第18-21页 |
·免疫型 | 第18-19页 |
·抗原分型 | 第19-20页 |
·基因型 | 第20页 |
·临床分型 | 第20-21页 |
·IBV的血凝特性 | 第21-22页 |
·IBV的培养 | 第22-23页 |
·传染性支气管炎病毒基因组结构 | 第23-29页 |
·传染性支气管炎病毒的结构蛋白 | 第24-27页 |
·非结构蛋白 | 第27-29页 |
·病毒的复制 | 第29-30页 |
·致病机理 | 第30-31页 |
·潜伏期 | 第31-32页 |
·IBV的临床症状 | 第32-33页 |
·IBV组织病理学变化 | 第33-34页 |
3.存在的问题 | 第34-36页 |
一、材料和方法 | 第36-45页 |
1.病毒分离 | 第36页 |
·材料和方法 | 第36页 |
·病料 | 第36页 |
·细菌分离 | 第36页 |
·病毒分离 | 第36页 |
2.电镜观察 | 第36-37页 |
·离子交换捕捉技术原理 | 第36-37页 |
·病毒浓缩 | 第37页 |
·样品处理 | 第37页 |
·负染色 | 第37页 |
3.血凝试验 | 第37-38页 |
·材料和方法 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-38页 |
·IBV的血凝实验(HA) | 第37-38页 |
4.病毒的制备 | 第38-39页 |
·材料和方法 | 第38页 |
·实验材料 | 第38页 |
·气管环培养物制备(TOC) | 第38-39页 |
·病毒感染力的测定 | 第39页 |
Reed-Muench法计算TOC-ID50 | 第39页 |
5.致病性实验和病理切片制备 | 第39-40页 |
·致病性试验 | 第39页 |
·材料和方法 | 第39页 |
·尸体剖检 | 第39-40页 |
·病理切片制备 | 第40页 |
·材料和方法 | 第40页 |
6.阳性血清的制备和血清中和实验 | 第40-41页 |
·材料和方法 | 第40-41页 |
·病毒的处理 | 第40页 |
·阳性血清的采集 | 第40页 |
·血清中和试验(固定病毒-稀释血清法) | 第40-41页 |
7.RT-PCR鉴定 | 第41-45页 |
·材料和方法 | 第41页 |
·病毒的培养和RNA的提取 | 第41-42页 |
·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第42页 |
·RT(Reverse transcription) | 第42页 |
·PCR(polymerase chain reaction) | 第42页 |
·PCR产物鉴定及纯化回收 | 第42-43页 |
·鉴定 | 第42页 |
·纯化回收 | 第42-43页 |
·PCR产物连接与转化 | 第43页 |
·连接 | 第43页 |
·转化 | 第43页 |
·重组质粒提取、鉴定及序列测定 | 第43-44页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第43-44页 |
·重组质粒的鉴定 | 第44页 |
·序列测定 | 第44页 |
·基因序列确定及分析、比较 | 第44-45页 |
二、结果 | 第45-67页 |
1.电镜观察 | 第45页 |
2.血凝实验 | 第45-46页 |
3.病毒感染力TOC-ID50的测定 | 第46-49页 |
4.致病性实验结果 | 第49-50页 |
·病毒接种SPF鸡胚死亡的鸡胚病变 | 第49页 |
·病毒接种SPF雏鸡的病变 | 第49页 |
·剖检SPF雏鸡的病变 | 第49页 |
·病理切片观察 | 第49-50页 |
5.病毒血清中和实验(固定病毒稀释血清) | 第50-61页 |
·PF毒株抗原 | 第50-51页 |
·GZ毒株抗原 | 第51-53页 |
·PT毒株抗原 | 第53-55页 |
·YX毒株抗原 | 第55-56页 |
·Mass毒株抗原 | 第56-58页 |
·交叉中和实验检测结果 | 第58页 |
·五株病毒毒株之间的血清中和交叉关系 | 第58-61页 |
6 3CL基因片段的核苷酸序列分析与比较 | 第61-67页 |
·GZ株和参考株3CL基因片段核苷酸序列的比较 | 第61-64页 |
·GZ株和参考株3CL基因片段推导的氨基酸序列的比较 | 第64-65页 |
·3CL基因片段的核苷酸序列和氨基酸序列同源性 | 第65-67页 |
三、分析与讨论 | 第67-74页 |
1.病毒的分离 | 第67页 |
2.病毒的血凝性 | 第67-68页 |
3.病毒的培养 | 第68-69页 |
4.致病性实验 | 第69-70页 |
5.血清型 | 第70-71页 |
·CL~(pro)基因片段的核苷酸序列和推导的氨基酸序列分析 | 第71-74页 |
四、结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-81页 |
附录:相关试剂配方 | 第81-83页 |
致谢 | 第83页 |