| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| ·DEAD-box RNA解旋酶的研究进展 | 第11-17页 |
| ·DEAD-box RNA解旋酶的结构特征 | 第12-13页 |
| ·DEAD-box RNA解旋酶的高级结构 | 第13-14页 |
| ·DEAD-box RNA解旋酶的生化活性 | 第14-16页 |
| ·DEAD-box RNA解旋酶的生物学功能 | 第16-17页 |
| ·eIF4A家族的研究进展 | 第17-22页 |
| ·eIF4AⅠ和eIF4AⅡ | 第18页 |
| ·eIF4AⅢ | 第18-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 实验材料和方法 | 第23-32页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·所用菌株和质粒 | 第23页 |
| ·各种酶及试剂 | 第23页 |
| ·本实验所用到的引物 | 第23-24页 |
| ·ZmRH2的克隆 | 第24-27页 |
| ·ZmRH2基因拷贝数分析 | 第27-28页 |
| ·ZmRH2的胁迫响应分析 | 第28-29页 |
| ·ZmRH2亚细胞定位研究 | 第29-30页 |
| ·拟南芥和玉米中RH2的敲除研究 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-52页 |
| ·ZmRH2基因克隆 | 第32-35页 |
| ·编码区的克隆 | 第32页 |
| ·启动子区的克隆 | 第32-34页 |
| ·3′端的克隆 | 第34-35页 |
| ·ZmRH2序列分析 | 第35-38页 |
| ·基因结构 | 第35-36页 |
| ·启动子区分析 | 第36-38页 |
| ·ZmRH2蛋白质分析 | 第38-44页 |
| ·蛋白质同源性分析 | 第38-39页 |
| ·系统发生分析 | 第39-42页 |
| ·高级结构预测 | 第42-44页 |
| ·ZmRH2在基因组中的拷贝数分析 | 第44-45页 |
| ·总DNA酶切 | 第44页 |
| ·Southern杂交 | 第44-45页 |
| ·胁迫条件下ZmRH2的表达 | 第45-46页 |
| ·小样法提取RNA | 第45页 |
| ·RT-PCR结果 | 第45-46页 |
| ·ZmRH2的亚细胞定位 | 第46-48页 |
| ·载体构建 | 第46-47页 |
| ·定位载体转化洋葱表皮 | 第47-48页 |
| ·镜检 | 第48页 |
| ·At-eIF4AⅢ敲除研究 | 第48-52页 |
| ·载体构建 | 第48-51页 |
| ·转化和筛选 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-58页 |
| ·启动子的克隆方法 | 第52页 |
| ·ZmRH2的基因结构 | 第52页 |
| ·ZmRH2可能是玉米中的eIF4AⅢ | 第52-53页 |
| ·ZmRH2的高级结构 | 第53页 |
| ·ZmRH2在近等基因系S-MO17~(Rf3Rf3)和S-MO17~(rf3rf3)中的异同 | 第53-54页 |
| ·ZmRH2是一种胁迫早期响应基因 | 第54-55页 |
| ·ZmRH2在细胞内的定位是核仁 | 第55-56页 |
| ·At-eIF4AⅢ失活使细胞致死 | 第56-57页 |
| ·下一步工作 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录1 常用培养基和溶液的配制 | 第73页 |
| 附录2 DNA的大样提取方法 | 第73-74页 |
| 附录3 DNA片段凝胶回收(TaKaRa) | 第74页 |
| 附录4 电转化感受态的制备 | 第74-75页 |
| 附录5 电转化 | 第75页 |
| 附录6 电泳和转膜 | 第75页 |
| 附录7 分子杂交和显影 | 第75-76页 |
| 附录8 总RNA的提取 | 第76页 |
| 附录9 质粒提取(小样法) | 第76页 |
| 附录10 农杆菌感受态细胞的制备 | 第76-77页 |
| 附录11 质粒转化农杆菌 | 第77页 |
| 附录12 拟南芥花序浸染法 | 第77页 |
| 附录13 S-MO17~(Rf3Rf3)中ZmRH2编码区序列 | 第77-78页 |
| 附录14 S-MO17~(rf3rf3)中ZmRH2编码区序列 | 第78-79页 |
| 附录15 S-MO17~(Rf3Rf3)中ZmRH2启动子区 | 第79-80页 |
| 附录16 S-MO17~(rf3rf3)中ZmRH2启动子区序列 | 第80-81页 |
| 附录17 S-MO17~(Rf3Rf3)中ZmRH2 3′端序列 | 第81页 |
| 附录18 S-MO17~(rf3rf3)中ZmRH2 3′端序列 | 第81页 |
