| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 1. 前言 | 第12-32页 |
| ·血管形成 | 第12-18页 |
| ·血管生成概述 | 第12-13页 |
| ·血管生成调控网络 | 第13-18页 |
| ·缺氧与缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor, HIF） | 第18-23页 |
| ·缺氧与生物机能 | 第18-20页 |
| ·缺氧与缺氧诱导因子（HIF）的激活 | 第20-22页 |
| ·缺氧与血管形成 | 第22-23页 |
| ·IGF 系统与 IGFBP-6 | 第23-28页 |
| ·IGF 信号系统简介 | 第23-25页 |
| ·IGF 信号通路与血管形成 | 第25-28页 |
| ·IGFBP-6 | 第28页 |
| ·基于斑马鱼胚胎技术的血管形成研究 | 第28-32页 |
| ·斑马鱼胚胎技术 | 第28-29页 |
| ·斑马鱼胚胎血管形成 | 第29-32页 |
| 2. 材料和方法 | 第32-43页 |
| ·斑马鱼胚胎培养 | 第32页 |
| ·细胞培养及缺氧处理 | 第32页 |
| ·RNA 提取 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR 及 Real-time PCR | 第33-36页 |
| ·RT-PCR | 第33-34页 |
| ·目的基因的 Real-time PCR 检测 | 第34-36页 |
| ·在斑马鱼胚胎中过表达IGFBP-6 对血管生成及胚胎生长发育的影响 | 第36-38页 |
| ·表达载体的构建 | 第36页 |
| ·mRNA 的体外合成 | 第36-38页 |
| ·显微注射 | 第38页 |
| ·裸鼠实体瘤血管形成实验(Gallicchio et al. 2001) | 第38-39页 |
| ·Rh30 细胞的转染 | 第38-39页 |
| ·异体移植实验 | 第39页 |
| ·显微成像与数据分析 | 第39页 |
| ·体外血管形成实验（Matrigel assay） | 第39-40页 |
| ·蛋白样品的免疫印迹分析 | 第40-42页 |
| ·蛋白样品的收集 | 第40-41页 |
| ·Western blotting | 第41-42页 |
| ·数据统计与分析 | 第42-43页 |
| 3. 实验结果 | 第43-59页 |
| ·缺氧上调血管内皮细胞igfbp-6 的表达 | 第43-45页 |
| ·缺氧对血管内皮细胞igfbp-6基因表达的调控可能是通过HIF-1a来实现的 | 第45-47页 |
| ·人类IGFBP-6：GFP 过表达载体的构建及验证 | 第47-49页 |
| ·IGFBP-6 抑制 HUVEC 细胞在体外形成血管 | 第49-50页 |
| ·IGFBP-6 对血管形成的抑制作用不依赖于 IGF | 第50-51页 |
| ·IGFBP-6 拮抗 VEGF 对血管形成的促进作用 | 第51-54页 |
| ·在体过表达IGFBP-6 抑制斑马鱼胚胎和裸鼠异体移植实体瘤的血管形成，且 IGFBP-6 的抑制血管生成作用具有进化保守性 | 第54-56页 |
| ·IGFBP-6 激活 HUVEC 细胞的Akt，p38 以及Erk1/2信号通路 | 第56-57页 |
| ·抑制 PI3K-Akt,MAPK-Erk1/2,MAPK-p38 信号通路未能营救IGFBP-6 造成的血管形成缺陷 | 第57-59页 |
| 4. 讨论 | 第59-62页 |
| 5. 总结 | 第62-64页 |
| 6. 展望 | 第64-66页 |
| ·缺氧上调 IGFBP-6 基因表达机制的深入阐明 | 第64页 |
| ·IGFBP-6 抑制体内血管生成是否依赖于IGF 配体结合力 | 第64页 |
| ·IGFBP-6 与 VEGF 共同作用的机制 | 第64-65页 |
| ·细胞内信号转导途径 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 个人简历 | 第80-81页 |
| 硕士期间发表论文 | 第81页 |
