| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 一、前言 | 第10-20页 |
| ·HCMV背景简介 | 第10-16页 |
| ·HCMV的病毒学特征 | 第10-12页 |
| ·病毒感染的致病机理 | 第12-14页 |
| ·病毒的复制 | 第14-15页 |
| ·HCMV感染临床症状 | 第15-16页 |
| ·SMART RACE技术原理 | 第16-19页 |
| ·UL49基因简介 | 第19页 |
| ·课题意义 | 第19-20页 |
| 二、技术路线 | 第20-21页 |
| 三、实验仪器与材料 | 第21-24页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·细胞和菌种 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·其它主要试剂的配方 | 第22-24页 |
| 四、实验方法 | 第24-39页 |
| ·病毒HCMV AD169的培养与鉴定 | 第24-26页 |
| ·病毒的培养 | 第24页 |
| ·病毒DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·HCMV AD169的鉴定 | 第25-26页 |
| ·HCMV总RNA的提取 | 第26页 |
| ·利用BD SMART~(TM) RACE cDNA Amplification Kit扩增UL49基因的5’末端 | 第26-32页 |
| ·5’RACE第一链cDNA的合成 | 第27页 |
| ·UL49基因5’末端的扩增 | 第27-29页 |
| ·巢式PCR扩增UL49基因的5’末端 | 第29页 |
| ·UL49基因5’末端的克隆及测序 | 第29-32页 |
| ·利用BD SMART~(TM) RACE cDNA Amplification Kit扩增UL49基因的3’末端 | 第32-34页 |
| ·3’Race第一链cDNA的合成 | 第32-33页 |
| ·UL49基因3’末端的扩增 | 第33-34页 |
| ·UL49基因3’末端的克隆及测序 | 第34页 |
| ·Ul49基因全长cDNA序列的扩增、克隆和序列分析 | 第34-39页 |
| ·HCMV总RNA的纯化 | 第34-35页 |
| ·HCMV RNA逆转录成cDNA | 第35页 |
| ·HCMV RNA的鉴定 | 第35-37页 |
| ·UL49基因的RT-PCR扩增 | 第37-38页 |
| ·UL49基因RT-PCR产物的克隆及测序 | 第38-39页 |
| 五、结果与分析 | 第39-50页 |
| ·病毒HCMV AD169的培养与鉴定 | 第39-40页 |
| ·人胚肺成纤维细胞培养结果 | 第39页 |
| ·感染病毒后人胚肺成纤维细胞出现病变效应 | 第39页 |
| ·HCMV AD169病毒的鉴定 | 第39-40页 |
| ·HCMV总RNA的提取 | 第40-41页 |
| ·利用BD SMART~(TM) RACE cDNA Amplification Kit扩增UL49基因的5’末端 | 第41-42页 |
| ·UL49基因5’末端的扩增结果 | 第41页 |
| ·巢式PCR扩增UL49基因的5’末端 | 第41页 |
| ·UL49基因5’末端的克隆及测序结果 | 第41-42页 |
| ·利用BD SMART~(TM) RACE cDNA Amplification Kit扩增UL49基因的3’末端结果 | 第42-45页 |
| ·UL49基因3’末端的扩增 | 第42-43页 |
| ·UL49基因3’末端的克隆及测序结果 | 第43-45页 |
| ·Ul49基因全长的扩增、克隆和测序 | 第45-47页 |
| ·UL49基因的RT-PCR扩增结果 | 第45页 |
| ·UL49基因RT-PCR产物的克隆及测序结果 | 第45-47页 |
| ·UL49基因全长cDNA生物信息学分析结果 | 第47-50页 |
| ·编码蛋白翻译后修饰位点分析结果 | 第47页 |
| ·HCMV UL49编码蛋白质性质预测 | 第47-48页 |
| ·UL49基因编码蛋白质二级结构和功能预测 | 第48-50页 |
| 六、讨论 | 第50-54页 |
| 七、小结 | 第54-55页 |
| 八、参考文献 | 第55-60页 |
| 九、附录 | 第60-67页 |
| 十、致谢 | 第67页 |
