丝氨酸生产菌MB200的筛选鉴定及丝氨酸羧甲基转移酶基因的研究
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-20页 |
| ·L-丝氨酸概述 | 第9页 |
| ·L-丝氨酸生产概况 | 第9-12页 |
| ·L-丝氨酸的应用概况 | 第12-13页 |
| ·采用甲基营养型菌株由甘氨酸生产L-丝氨酸 | 第13-16页 |
| ·丝氨酸羟甲基转移酶基因的研究进展 | 第16-19页 |
| ·论文的研究思路与目标 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-39页 |
| ·试验材料 | 第20-21页 |
| ·菌株培养基及培养条件 | 第21页 |
| ·常用溶液、缓冲液 | 第21-23页 |
| ·常用的抗生素及其浓度 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·染色体DNA的提取 | 第24-26页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26-28页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
| ·DNA的回收 | 第29-30页 |
| ·质粒DNA的酶切 | 第30-31页 |
| ·载体质粒DNA的去磷酸化 | 第31页 |
| ·DNA连接 | 第31页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第31-33页 |
| ·DNA-DNA杂交 | 第33-36页 |
| ·PCR扩增DNA片段 | 第36页 |
| ·甲基营养型细菌静息细胞反应体系 | 第36页 |
| ·氨基酸的定量、定性分析 | 第36-39页 |
| 第三章 L-丝氨酸生产菌的筛选与鉴定 | 第39-56页 |
| ·甲基营养型细菌的分离和筛选 | 第39-40页 |
| ·菌落形态特征 | 第40页 |
| ·16S rDNA序列分析 | 第40-52页 |
| ·最佳菌种的选择 | 第52页 |
| ·菌株MB200的抗生素抗性检测 | 第52-53页 |
| ·MB200的最适生长条件 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 MB200产L-丝氨酸条件的优化 | 第56-61页 |
| ·甘氨酸对L-丝氨酸生成的影响 | 第56-57页 |
| ·甲醇对L-丝氨酸生成的影响 | 第57页 |
| ·菌体密度对L-丝氨酸生成的影响 | 第57-58页 |
| ·温度对L-丝氨酸生成的影响 | 第58页 |
| ·培养时间对L-丝氨酸生成的影响 | 第58页 |
| ·初始pH值对L-丝氨酸生成的影响 | 第58-59页 |
| ·最佳条件下L-丝氨酸的生成 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 MB200部分基因组文库的构建 | 第61-77页 |
| ·部分glyA基因的扩增阳性克隆筛选 | 第61-66页 |
| ·Southern blot探针的制备 | 第66页 |
| ·Southern杂交验证 | 第66-67页 |
| ·基因组DNA完全酶切片段的制备 | 第67-68页 |
| ·外源载体的制备 | 第68页 |
| ·丝氨酸羟甲基转移酶基因文库的构建 | 第68-70页 |
| ·基因文库的重组子的鉴定 | 第70-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| 第六章 总结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
