| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第6-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| ·流感病毒及禽流感病毒的研究进展 | 第12-22页 |
| ·流感的历史 | 第12-15页 |
| ·禽流感的历史 | 第15-16页 |
| ·禽流感病毒的研究进展 | 第16-21页 |
| ·禽流感的公共卫生意义 | 第21页 |
| ·小结 | 第21-22页 |
| ·禽流感疫苗的研究进展 | 第22-27页 |
| ·常规疫苗 | 第23-24页 |
| ·新型疫苗 | 第24-27页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统的研究和应用进展 | 第27-32页 |
| ·杆状病毒表达系统的原理及特点 | 第28-29页 |
| ·杆状病毒/昆虫表达系统的发展历史 | 第29页 |
| ·BEVS的应用 | 第29-30页 |
| ·前景和展望 | 第30-32页 |
| 第二章 实验研究 | 第32-66页 |
| 实验一 带有His标签的禽流感病毒HA基因在Bac-N-Blue杆状病毒表达系统中的表达 | 第32-50页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-42页 |
| ·HA基因的克隆与鉴定 | 第34-37页 |
| ·HA基因的杆状病毒转移载体的构建 | 第37-38页 |
| ·HA蛋白的表达 | 第38-40页 |
| ·重组蛋白的表达检测 | 第40-42页 |
| ·结果 | 第42-46页 |
| ·H5HA基因转移载体的构建 | 第42-44页 |
| ·重组病毒的筛选、纯化和鉴定 | 第44-46页 |
| ·重组蛋白的检测 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白的血凝活性鉴定 | 第46页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE及其Western-blot鉴定 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| 实验二 带有HIS标签的禽流感HA基因在Bac- TO-Bac 杆状病毒表达系统中的表达 | 第50-66页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-58页 |
| ·pFastBacHTa-H5HA供体质粒的构建 | 第52-53页 |
| ·Bacmid-H5HA重组穿梭载体的构建和鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组Bacmid-H5HA转染昆虫细胞及重组病毒的PCR鉴定和滴度测定 | 第54-56页 |
| ·重组HA蛋白的表达及鉴定 | 第56-58页 |
| ·重组HA蛋白的纯化 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-62页 |
| ·含HA基因的重组杆状病毒转座载体的鉴定 | 第58页 |
| ·重组pFastB acHTa-HA供体质粒的转座及重组杆粒Bacmid-H5HA的PCR鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组Bacmid-H5HA转染昆虫细胞及重组病毒繁殖与滴定 | 第59-60页 |
| ·重组HA蛋白的表达及鉴定 | 第60-62页 |
| ·重组HA蛋白的纯化 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-66页 |
| ·杆状病毒表达系统的选择 | 第62-63页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第63页 |
| ·重组蛋白表达水平及其影响因素 | 第63-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 附录A 实验所用主要试剂配制 | 第72-74页 |
| 附录B 部分实验方法 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 作者简介 | 第78页 |
