| 第一部分 livin反义脱氧核苷酸的抗癌作用相关研究 | 第1-56页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要(ABSTRACT) | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 材料与方法 | 第12-19页 |
| 实验材料 | 第12-14页 |
| 一、主要试剂 | 第12-13页 |
| 二、主要仪器设备 | 第13页 |
| 三、实验细胞株 | 第13-14页 |
| 实验方法 | 第14-19页 |
| 一、Livin基因哺乳动物表达载体构建及细胞转染 | 第14页 |
| 二、细胞培养 | 第14页 |
| 三、反义寡核苷酸转染体外培养细胞 | 第14-15页 |
| 四、体外MTT法测定细胞活度 | 第15页 |
| 五、计算机程序的获得 | 第15页 |
| 六、靶mRNA二级结构计算 | 第15页 |
| 七、反义寡核苷酸的设计、合成 | 第15页 |
| 八、RT-PCR | 第15-17页 |
| 九、DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第17页 |
| 十、靶序列核酸单链概率分析自由能计算 | 第17页 |
| 十一、变性凝胶电泳 | 第17页 |
| 十二、流式细胞仪检测凋亡细胞 | 第17页 |
| 十三、Caspase-3活性测定 | 第17-18页 |
| 十四、测定线粒体跨膜电位 | 第18页 |
| 十五、免疫组化染色 | 第18页 |
| 十六、AO／EB复合染色 | 第18页 |
| 十七、原子力显微镜检测 | 第18页 |
| 十八、数据处理 | 第18-19页 |
| 实验结果 | 第19-48页 |
| 一、livin mRNA在肿瘤细胞中的表达 | 第19页 |
| 二、livin的哺乳动物表达载体的构建及其功能的研究 | 第19-23页 |
| 三、livin二级结构及其反义寡核苷酸的设计和相关热力学参数计算 | 第23-27页 |
| 四、利用Sfold进行livin mRNA的二级结构预测和相关自由能的计算 | 第27-30页 |
| 五、非变性凝胶电泳 | 第30-31页 |
| 六、No.5反义寡核苷酸对Hela细胞形态的影响 | 第31-32页 |
| 七、No.5反义寡核苷酸的量效关系 | 第32-33页 |
| 八、随机及错配序列对细胞的影响 | 第33-35页 |
| 九、流式细胞仪检测凋亡细胞 | 第35-36页 |
| 十、Hela转染No.5后线粒体膜电位测定 | 第36-37页 |
| 十一、RT-PCR检测livin的表达 | 第37-38页 |
| 十二、Caspase3活性测定 | 第38-39页 |
| 十三、转染反义寡核苷酸No.5后对Hela细胞微管及形态的观察 | 第39-40页 |
| 十四、转染反义寡核苷酸No.5后对Hela细胞核的影响 | 第40-42页 |
| 十五、凋亡细胞的AO／EB复合染色 | 第42-43页 |
| 十六、survivin和livin的反义核酸联合设计 | 第43-45页 |
| 十七、碱基分布对反义作用的影响 | 第45-46页 |
| 十八、反义核酸链自身二级结构与反义作用之间的关系 | 第46页 |
| 十九、原子力显微镜观察反义核酸结构 | 第46-48页 |
| 讨论 | 第48-55页 |
| 一、livin的功能研究 | 第48-50页 |
| 二、基于livin mRNA二级结构计算的反义寡核苷酸设计 | 第50-53页 |
| 三、livin的反义核酸应用 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 第二部分 DCQA长期毒性及伴随毒代动研究 | 第56-98页 |
| 中文摘要 | 第56-58页 |
| 英文摘要(ABSTRACT) | 第58-60页 |
| 前言 | 第60-62页 |
| 材料和方法 | 第62-68页 |
| 1.实验材料 | 第62页 |
| 2.实验仪器 | 第62-63页 |
| 3 实验方法 | 第63-68页 |
| ·给药方案 | 第63页 |
| ·毒代动力学研究 | 第63-65页 |
| ·毒代动力学计算 | 第65页 |
| ·细胞免疫学检测 | 第65-66页 |
| ·病理组织学检查 | 第66页 |
| ·常规毒性指标检测 | 第66-68页 |
| 实验结果 | 第68-92页 |
| 1.DCQA血液毒代动力学 | 第68-76页 |
| 2.粪便中DCQA的测定 | 第76-81页 |
| 3.血液相关免疫指标的测定 | 第81-83页 |
| 4.病理学检查 | 第83-85页 |
| 5.常规毒性检验 | 第85-92页 |
| 讨论 | 第92-97页 |
| 结论 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 附录Ⅰ.文献综述 | 第105-112页 |
| 附录Ⅱ.在读期间发表文章 | 第112-127页 |
