| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-16页 |
| ·生物效应测定法(Functional Test，FT) | 第11-12页 |
| ·理化检验方法 | 第12-13页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC) | 第12页 |
| ·气相色谱-质谱联机检测法(GC-MS) | 第12-13页 |
| ·毛细管电泳法(CE) | 第13页 |
| ·伏安法(VA) | 第13页 |
| ·免疫学检测方法 | 第13-15页 |
| ·酶联免疫吸附测定法(ELISA) | 第13-14页 |
| ·免疫荧光测定法(FIA) | 第14页 |
| ·放射免疫测定法(RIA) | 第14页 |
| ·免疫亲和色谱法(IAC) | 第14-15页 |
| ·生物传感器检测法 | 第15-16页 |
| 第2章 引言 | 第16-18页 |
| 第3章 盐酸克伦特罗(CL)免疫原的合成与鉴定 | 第18-28页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·制备人工抗原有关试剂的配制 | 第18-19页 |
| ·SDS-PAGE有关溶液的配制 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-21页 |
| ·CL的偶氮化 | 第19页 |
| ·偶氮化CL与载体蛋白的偶联 | 第19页 |
| ·CL-BSA人工抗原的鉴定 | 第19页 |
| ·CL抗血清的制备 | 第19-20页 |
| ·方阵法确定ELISA检测抗原CL-OVA最佳包被浓度 | 第20页 |
| ·间接ELISA鉴定抗血清对人工抗原分子中CL残基反应的特异性 | 第20页 |
| ·间接竞争ELISA鉴定抗血清与游离CL反应性 | 第20-21页 |
| ·CL抗血清交叉反应性测定 | 第21页 |
| ·实验结果 | 第21-25页 |
| ·CL的偶氮化及偶氮化CL与载体蛋白的偶联 | 第21页 |
| ·CL-BSA的紫外扫描图分析 | 第21页 |
| ·CI-BSA的SDS-PAGE电泳图分析 | 第21-22页 |
| ·方阵法确定ELISA检测抗原最佳包被浓度 | 第22页 |
| ·抗血清和人工抗原分子中CL残基发生特异性反应的鉴定 | 第22-24页 |
| ·间接竞争ELISA鉴定抗血清与游离CL分子的反应性 | 第24-25页 |
| ·CL抗血清交叉反应性测定 | 第25页 |
| ·讨论 | 第25-27页 |
| ·关于CL人工抗原的构建反应 | 第25-26页 |
| ·关于人工抗原构建中载体蛋白的偶联剂修饰残基问题 | 第26页 |
| ·关于载体蛋白对半抗原残基的影响 | 第26-27页 |
| ·关于CL抗血清的交叉反应性 | 第27页 |
| ·小结 | 第27-28页 |
| 第4章 克伦特罗单克隆抗体的制备及某些特性的鉴定 | 第28-41页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·CL-BSA、CL-OVA、CL-KLH | 第28页 |
| ·实验动物 | 第28页 |
| ·SP2／0骨髓瘤细胞由本实验室保存 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要器材 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-33页 |
| ·免疫BALB／C小鼠 | 第30页 |
| ·细胞融合操作程序 | 第30-31页 |
| ·融合后细胞的培养与检测 | 第31页 |
| ·阳性细胞株的克隆 | 第31页 |
| ·细胞冻存 | 第31-32页 |
| ·腹水的制备 | 第32页 |
| ·单抗效价的测定 | 第32页 |
| ·单抗亚型鉴定 | 第32页 |
| ·McAb特异性检测 | 第32页 |
| ·McAb交叉反应性 | 第32-33页 |
| ·McAb相对亲和力测定 | 第33页 |
| ·McAb抗原识别位点分析 | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-37页 |
| ·免疫小鼠血清效价 | 第33页 |
| ·细胞融合及克隆 | 第33-34页 |
| ·单抗的效价测定结果 | 第34页 |
| ·单抗亚型测定结果 | 第34页 |
| ·McAb对CL残基特异性反应鉴定 | 第34-35页 |
| ·交叉反应性测定 | 第35-36页 |
| ·相对亲和力测定 | 第36-37页 |
| ·抗原识别位点分析 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| ·关于兽药的单克隆抗体 | 第37-38页 |
| ·关于细胞融合 | 第38页 |
| ·关于细胞克隆和杂交瘤细胞的稳定性 | 第38-39页 |
| ·单克隆抗体制备中的关键因素 | 第39页 |
| ·CL单克隆抗体与Sal的交叉反应性 | 第39页 |
| ·关于McAb的相对亲和力 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第5章 竞争ELIAS试验检测克伦特罗方法的建立 | 第41-59页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·实验用动物 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-46页 |
| ·单抗的纯化与鉴定 | 第41-42页 |
| ·兔血清的提取、纯化与鉴定 | 第42-43页 |
| ·兔IgG与克伦特罗(CL)偶联物的制备 | 第43-44页 |
| ·竞争ELISA方法的建立 | 第44-45页 |
| ·竞争ELISA试验在检测克伦特罗中的初步临床应用 | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-56页 |
| ·单抗纯度的测定 | 第46页 |
| ·单抗浓度的测定 | 第46-47页 |
| ·纯化单抗效价的测定 | 第47页 |
| ·兔血清lgG纯度的测定 | 第47-48页 |
| ·兔血清IgG蛋白浓度的测定 | 第48页 |
| ·CL的偶氮化及偶氮化CL与兔IgG的偶联 | 第48页 |
| ·偶联物分子与抗兔酶标二抗反应活性的鉴定 | 第48-49页 |
| ·偶联物分子与抗CL单抗反应活性的鉴定 | 第49页 |
| ·单抗最佳使用浓度和偶联物(兔IgG-CL)最佳偶联浓度／偶联比的筛选 | 第49-51页 |
| ·单抗包被条件和偶联物作用条件的确定 | 第51页 |
| ·封闭剂的选择 | 第51页 |
| ·酶标抗体工作浓度和作用时间的选择 | 第51-52页 |
| ·底物溶液作用条件的选择 | 第52页 |
| ·竞争ELISA检测CL实验操作程序 | 第52-53页 |
| ·标准曲线的制作 | 第53-54页 |
| ·竞争ELISA方法的重复性试验 | 第54-55页 |
| ·临床样品回收率试验 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·单抗的生产与纯化 | 第56-57页 |
| ·竞争ELISA方法的建立 | 第57页 |
| ·竞争ELISA试验方法的优化 | 第57页 |
| ·关于被检样品处理与选择 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第6章 全文总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 发表论文及参加课题一览表 | 第65页 |
