摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-24页 |
第1章 外周血EOS分离、总RNA提取及cDNA合成 | 第24-41页 |
第1节 材料与方法 | 第24-32页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-32页 |
第2节 结果 | 第32-36页 |
·治疗前后哮喘患者临床及病理生理各项指标的变化 | 第32-33页 |
·EOS分离结果 | 第33-34页 |
·总RNA结果分析 | 第34页 |
·EOS ds-cDNA合成结果 | 第34-36页 |
·酶切鉴定结果 | 第36页 |
第3节 讨论 | 第36-41页 |
·高纯℃EOS获得及总RNA提取体会 | 第36-37页 |
·Super SMART cDNA synthesis技术原理及在微量样本中的应用 | 第37-39页 |
·保证Tester和Driver量的严格平行性 | 第39-41页 |
第2章 外周血EOS cDNA消减文库构建、筛选与鉴定 | 第41-65页 |
第1节 材料与方法 | 第41-52页 |
·主要试剂 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·实验方法 | 第41-52页 |
第2节 结果 | 第52-58页 |
·抑制性消减杂交结果分析 | 第52-54页 |
·差异表达基因cDNA片段的克隆 | 第54-55页 |
·目的片段扩增结果分析 | 第55页 |
·DS技术鉴定阳性克隆 | 第55-58页 |
第3节 讨论 | 第58-65页 |
·疾病相关基因克隆方法学的比较 | 第58-60页 |
·SSH技术的基本原理及关键步骤体会 | 第60-63页 |
·克隆、转化、鉴定思路及其关键点 | 第63-65页 |
第3章 测序结果分析与鉴定 | 第65-84页 |
第1节 测序结果及同源性对比 | 第65-67页 |
第2节 部分基因来源进一步鉴定 | 第67-70页 |
·实验步骤 | 第68页 |
·结果 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-70页 |
第3节 外周血EOS哮喘相关基因差异表达及意义 | 第70-84页 |
·与EOS细胞骨架重建相关一组基因 | 第71-73页 |
·与EOS细胞迁移、粘附及免疫调节有关一组基因 | 第73-76页 |
·与EOS细胞分化、存活及凋亡有关一组基因 | 第76-78页 |
·与EOS脱颗粒及氧化应激有关基因 | 第78-81页 |
·与EOS细胞内信号转导调控相关基因 | 第81-84页 |
结论 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-95页 |
嗜酸性粒细胞参与哮喘气道重建的机制研究进展 | 第95-103页 |
研究生学习期间主要成果 | 第103-104页 |
致谢 | 第104-105页 |