摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
第一节 小麦耐盐研究进展 | 第9-13页 |
·膜透性与耐盐 | 第10页 |
·渗透调节物质的积累 | 第10-11页 |
·与盐胁迫相关的基因 | 第11-12页 |
·耐盐蛋白 | 第12页 |
·抗盐生理研究展望 | 第12-13页 |
第二节 小麦基因染色体定位方法 | 第13-22页 |
·小麦非整倍体(wheat aneuploids)染色体定位 | 第14-17页 |
·利用小麦单体(monosomic)定位 | 第15页 |
·利用缺体-四体(nulli-tetrasomes)定位 | 第15-16页 |
·利用双端体定位 | 第16页 |
·利用缺体定位 | 第16-17页 |
·DNA分子标记定位 | 第17页 |
·原位杂交 | 第17-18页 |
·电子定位基因的方法 | 第18-22页 |
·利用同源序列电子定位基因 | 第18-19页 |
·直接利用基因序列电子定位基因 | 第19页 |
·利用EST序列进行基因电子定位 | 第19-22页 |
第二章 研究报告 | 第22-50页 |
第一节 小麦耐盐相关基因TaGSK1的染色体定位 | 第22-35页 |
1、材料和方法 | 第22-27页 |
·植物材料 | 第22页 |
·基因组DNA提取方法 | 第22-24页 |
·试剂配制 | 第22-23页 |
·DNA提取(改良SDS法-高盐低pH法)操作步骤 | 第23-24页 |
·基因组DNA酶切和Southern转移 | 第24页 |
·酶切 | 第24页 |
·Southern转移 | 第24页 |
·质粒载体中探针DNA的PCR扩增和制备 | 第24-27页 |
·提取质粒 | 第24-25页 |
·质粒PCR扩增 | 第25-26页 |
·PCR法标记cDNA探针 | 第26页 |
·Southern杂交 | 第26-27页 |
2、结果与分析 | 第27-34页 |
·提取普通小麦中国春缺体-四体系基因组DNA | 第27-28页 |
·基因组DNA酶切 | 第28-29页 |
·质粒提取和目的片段扩增 | 第29页 |
·杂交 | 第29-32页 |
·利用小麦EST(wEST)数据库比较 | 第32-34页 |
3、讨论 | 第34-35页 |
第二节 半定量RT-PCR方法检测TaGSK1在逆境胁迫下的表达分析 | 第35-50页 |
1、材料和方法 | 第35-40页 |
·实验材料 | 第35页 |
·主要试剂和仪器 | 第35-36页 |
·主要试剂 | 第35-36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
·扩增用引物 | 第36页 |
·胁迫处理 | 第36-37页 |
·总RNA提取 | 第37-39页 |
·取材 | 第37-38页 |
·测RNA样品OD_(260) | 第38页 |
·RNA甲醛变性电泳 | 第38-39页 |
·溶液配置 | 第38-39页 |
·操作步骤 | 第39页 |
·反转录 | 第39-40页 |
·半定量PCR反应 | 第40页 |
2、结果和分析 | 第40-48页 |
·RNA提取 | 第41-43页 |
·1%NaCL胁迫处理所提取RNA | 第41-42页 |
·100μM ABA胁迫处理所提取RNA | 第42-43页 |
·4℃冷胁迫处理所提取RNA | 第43页 |
·反转录 | 第43-44页 |
·PCR产物的电泳分析及扫描定量 | 第44-48页 |
·1%NaCL胁迫处理半定量PCR | 第44-45页 |
·100μM ABA胁迫处理半定量PCR | 第45-47页 |
·冷处理 | 第47-48页 |
3、讨论 | 第48-50页 |
第三章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录 | 第56-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
简历 | 第59页 |