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大别山野葛HPLC指纹图谱库的构建及其植物化学物对乙醇神经毒性保护作用的研究

中文摘要第1-21页
英文摘要第21-38页
一、前言第38-55页
二、研究内容第55-170页
 第一部分 大别山野葛HPLC指纹图谱库的构建第55-123页
  引言第55-57页
  第一章 大别山野葛HPLC指纹图谱方法学研究第57-71页
   1.引言第57-58页
   2.仪器与试剂第58-59页
   3.方法第59-61页
   ·色谱条件第59页
   ·参照物溶液的制备第59页
   ·供试品溶液的制备第59-60页
   ·HPLC指纹图谱测定方法第60页
   ·方法学考察第60-61页
     ·线性关系考察第60页
     ·精密度试验第60页
     ·加样回收率第60-61页
     ·重现性试验第61页
     ·稳定性试验第61页
     ·专属性试验第61页
   4.结果第61-67页
   ·共有峰的指定第62-65页
   ·参照峰的指定第65页
   ·共有峰的相对保留时间,相对峰面积,共有峰总面积百分比第65-67页
   5.讨论第67-71页
   ·有关方法学的考证第67页
   ·建立指纹图谱的关键第67-68页
   ·大别山系野葛HPLC指纹图谱间的比较第68-71页
  第二章 大别山野葛HPLC指纹图谱库的构建第71-109页
   1.引言第71页
   2.仪器与试剂第71页
   3.方法第71页
   4.结果第71-102页
   ·不同季节野葛药材HPLC指纹图谱的比较第71-80页
   ·野葛药材不同部位HPLC指纹图谱的比较第80-87页
   ·不同年轮野葛药材HPLC指纹图谱的比较第87-92页
   ·不同朝向的野葛药材HPLC指纹图谱的比较第92-97页
   ·多级提取时对野葛药材HPLC指纹图谱的影响第97-102页
   5.讨论第102-109页
   ·有关不同季节葛根素含量的讨论第102页
   ·不同季节野葛HPLC指纹图谱的讨论第102-103页
   ·野葛不同部位HPLC指纹图谱的讨论第103页
   ·野葛不同年轮HPLC指纹图谱的讨论第103页
   ·野葛不同朝向HPLC指纹图谱的讨论第103-104页
   ·野葛提取中乙醇浓度的探讨第104-108页
   ·多级提取时不同提取阶段对野葛药材HPLC指纹图谱的影响第108-109页
  第三章 利用指纹图谱技术探讨传统加工工艺中葛根资源利用度的研究第109-123页
   1.引言第109页
   2.葛根淀粉传统加工工艺的基本工艺过程第109-117页
   3.HPLC指纹图谱测定方法第117页
   4.HPLC指纹图谱测定结果第117-119页
   5.讨论第119-123页
   ·葛根淀粉传统加工工艺对葛根资源的利用的不合理性第119页
   ·以科学的发展观,遵循循环经济的原则,合理利用自然资源第119-123页
 第二部分 野葛粗提物及其主要成分葛根素改善乙醇神经毒性作用的研究第123-170页
  引言第123-130页
  第一章 乙醇对胚胎期小鼠海马细胞毒性作用的研究第130-154页
   1.引言第130页
   2.材料与方法第130-141页
   ·材料第130-133页
     ·动物第130-131页
     ·主要试剂第131-132页
     ·主要仪器及器皿第132-133页
   ·方法第133-141页
     ·细胞培养主要用液第133-134页
       ·MEM基础培养液的配置第133页
       ·完全培养液的配置第133页
       ·1×PBS第133页
       ·0.25%胰蛋白酶第133-134页
     ·胎鼠海马细胞的分离及培养第134页
     ·细胞毒性实验第134-135页
     ·乙醇对hsp70和SOD mRNA表达影响第135-137页
       ·处理因素的实施第135页
       ·细胞总mRNA的提取第135-136页
       ·逆转录合成cDNA第136页
       ·PCR扩增第136-137页
       ·RT-PCR结果分析第137页
     ·乙醇对hsp70和SOD蛋白表达影响第137-141页
       ·主要溶液第137-139页
       ·检测样本的制备第139页
       ·制胶第139-140页
       ·电泳第140页
       ·转膜第140-141页
       ·封闭第141页
       ·靶蛋白与第一抗体反应第141页
       ·第二抗体反应第141页
       ·结果显示第141页
     ·统计学处理第141页
   3.结果第141-146页
   ·乙醇对海马细胞活力的影响第141-142页
   ·细胞总mRNA提取效果检测第142-143页
   ·乙醇对海马细胞hsp70及SOD mRNA表达的影响第143-145页
   ·乙醇对海马细胞hsp70及SOD蛋白表达的影响第145-146页
   4.讨论第146-154页
   ·乙醇导致神经毒性模型的建立第146-147页
   ·HSP对乙醇致神经毒性的保护作用第147-150页
   ·SOD对乙醇致神经毒性的保护作用第150-154页
  第二章 野葛粗提物及其主要成分葛根素对乙醇引起海马细胞毒性保护作用的研究第154-170页
   1.引言第154页
   2.材料与方法第154-161页
   ·材料第154-157页
     ·动物第154-155页
     ·主要试剂第155-156页
     ·主要仪器及器皿第156-157页
   ·方法第157-158页
     ·制备葛根粗提物第157页
     ·细胞培养主要用液第157-158页
       ·MEM基础培养液的配置第157-158页
       ·完全培养液的配置第158页
       ·1×PBS第158页
       ·0.25%胰蛋白酶第158页
   ·实验分组第158-159页
   ·胎鼠海马细胞的分离及培养第159页
   ·CP和SP对海马细胞ICO浓度的建立第159页
   ·CP和SP对乙醇引起的海马细胞毒性的拮抗作用第159-160页
   ·CP和SP对乙醇引起的Hsp70和SOD mRNA表达变化的影响第160页
   ·CP和SP对乙醇引起的Hsp70和SOD蛋白表达变化的影响第160-161页
     ·细胞总蛋白的提取第160页
     ·Western Blot操作步骤第160-161页
   ·统计学处理第161页
   3 结果第161-165页
   ·CP和SP对海马细胞活力的影响第161-162页
   ·CP和SP均可拮抗乙醇引起的海马细胞毒性作用第162-163页
   ·CP和SP均可抑制乙醇引起的Hsp70和SOD表达量升高第163-165页
   4.讨论第165-170页
   ·CP和SP对乙醇抑制海马细胞增殖活力的影响第165-166页
   ·CP和SP对乙醇所致海马细胞HSP70表达的影响第166-167页
   ·CP和SP对乙醇所致海马细胞SOD表达的影响第167-168页
   ·创建中药“谱效”研究第168-170页
三、参考文献第170-202页
四、酒精性肝病发病机制的研究进展(综述)第202-234页
五、致谢第234-236页
六、声明第236页

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