| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 缩写词一览表 | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述及本题意义 | 第13-30页 |
| 一. 性别决定基因研究进展 | 第13-23页 |
| 1 简介和历史回顾 | 第13页 |
| 2 SRY，睾丸决定因子的发现 | 第13-16页 |
| 3 SRY蛋白 | 第16-17页 |
| 4 SRY相关蛋白 | 第17-18页 |
| 5 在性腺发育中SRY表达的调节 | 第18-20页 |
| 6 性别决定的启动:一个分子遗传模型 | 第20-22页 |
| 7 SRY的临床突变 | 第22页 |
| 8 总结和展望 | 第22-23页 |
| 二. 精子介导转基因的方法研究进展 | 第23-29页 |
| 1 前言 | 第23页 |
| 2 四种转基因方法的总体比较 | 第23-24页 |
| 3 精子介导转基因的主要原理 | 第24-26页 |
| 4 精子介导转基因技术的研究进展 | 第26-28页 |
| 5 精子介导的研究方向和发展前景 | 第28-29页 |
| 三. 本课题的研究内容和意义 | 第29-30页 |
| 第二部分 实验材料和方法 | 第30-43页 |
| 一. 实验材料 | 第30页 |
| 1 动物材料、质粒及菌株 | 第30页 |
| 2 酶、试剂盒、培养基、抗生素及各种化学试剂 | 第30页 |
| 二. 实验方法与过程 | 第30-43页 |
| 1 实验设计思路 | 第30-31页 |
| 2 pCR3.1-Sty的构建的过程 | 第31-37页 |
| 3 荧光原位杂交鉴定精子介导pCR3.1-Sry | 第37-41页 |
| 4 促小鼠超排卵: | 第41-42页 |
| 5 小鼠人工授精产子 | 第42-43页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第43-50页 |
| 一. 质粒pCR3.1-Sry构建过程结果与分析 | 第43-45页 |
| 1 全基因组DNA提取结果与分析 | 第43页 |
| 2 PCR扩增Sry基因的结果与分析 | 第43页 |
| 3 克隆载体pMD 18-T-Sry质粒提取与酶切鉴定 | 第43页 |
| 4 测序结果与分析 | 第43页 |
| 5 质粒pCR3.1-Sry的构建与鉴定分析 | 第43-45页 |
| 二. 原位杂交的结果与分析 | 第45-48页 |
| 1 探针制备 | 第45页 |
| 2 杂交结果 | 第45-48页 |
| 三. 小鼠经各项处理后产子结果与分析(原始结果及方差分析附于论文后) | 第48-50页 |
| 1 普通交配与激素注射后产子数进行比较结果 | 第48页 |
| 2 激素刺激后直接交配和体外人工授精产子数进行比较结果 | 第48页 |
| 3 小鼠直接交配和精子介导pCR3.1-Sty后人工授精产生后代雄雌数比较 | 第48-49页 |
| 4 精子洗涤与否以及是否加脂质体后代性比的比较分析 | 第49-50页 |
| 第四部分 讨论与结论 | 第50-59页 |
| 一. PCR扩增Sry的讨论 | 第50-51页 |
| 1 模板DNA的提取和用量 | 第50页 |
| 2 引物的设计 | 第50-51页 |
| 3 PCR聚合酶的选择 | 第51页 |
| 二. 载体选择 | 第51-52页 |
| 1 克隆载体的选择: | 第51页 |
| 2 表达载体的选择: | 第51-52页 |
| 三. 荧光原位杂交(FISH)技术鉴定Sry在精子中的位置 | 第52-55页 |
| 1 FISH的优势 | 第52-53页 |
| 2 本实验对原位杂交条件的优化 | 第53-54页 |
| 3 原位杂交结果的讨论 | 第54-55页 |
| 四. 促小鼠超排卵，人工授精 | 第55-57页 |
| 1 阴道注射精子的优势 | 第55页 |
| 2 促超排卵的意义 | 第55-56页 |
| 3 结果讨论 | 第56-57页 |
| 五. 本实验的科学意义及创新之处 | 第57-58页 |
| 六. 结论 | 第58-59页 |
| 参考书目及文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65-70页 |
| 附录一: 溶液配制 | 第65-67页 |
| 附录二: 表达载体pCR3.1-Sry构建流程图 | 第67-68页 |
| 附录二: 测序结果 | 第68页 |
| 附录三: 小鼠经各项处理后产子结果原始数据 | 第68-70页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第70页 |
