目录 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 乙醇酸氧化酶研究进展 | 第12-22页 |
1 乙醇酸氧化酶(GO)研究概况 | 第12页 |
2 GO在自然界的分布 | 第12-13页 |
3 GO的催化活性 | 第13-14页 |
4 GO的活性调节 | 第14-15页 |
5 GO的酶学性质 | 第15-18页 |
·GO被认为是只含一种碱性亚基 | 第15页 |
·GO的亚基分子量(M_r)相差较大 | 第15页 |
·GO全酶M_r相差较大 | 第15-16页 |
·GO具有电荷不均一性 | 第16-18页 |
6 GO同工酶理论的提出 | 第18-22页 |
·可能存在三种GO同工酶 | 第18页 |
·GO同工酶的pI的变化 | 第18-19页 |
·GO同工酶理论的意义 | 第19-20页 |
·GO同工酶理论存在的问题 | 第20-22页 |
第二章 高等电点和高活性的乙醇酸氧化酶同工酶的纯化 | 第22-36页 |
1 实验材料 | 第22页 |
2 实验试剂与主要仪器 | 第22-23页 |
·试剂 | 第22-23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
3 实验方法 | 第23-28页 |
·GO同工酶的提取与纯化 | 第23-25页 |
·GO同工酶的比活测定 | 第25页 |
·GO同工酶的蛋白浓度测定 | 第25页 |
·GO同工酶的纯度鉴定 | 第25-27页 |
·4%~20% SDS-PAGE梯度电泳 | 第25-26页 |
·SDS-毛细管电泳 | 第26-27页 |
·GO同工酶等电点的测定 | 第27-28页 |
·等电聚焦电泳 | 第27页 |
·醋酸纤维素薄膜电泳 | 第27-28页 |
4 结果与讨论 | 第28-35页 |
·GO同工酶纯化方法的改进 | 第28页 |
·GO同工酶的纯化、比活和纯度鉴定 | 第28-35页 |
5 小结 | 第35-36页 |
第三章 高等电点的乙醇酸氧化酶同工酶pI的变化及其机理 | 第36-44页 |
1 实验材料 | 第36页 |
2 实验试剂与主要仪器 | 第36-37页 |
·试剂 | 第36页 |
·主要仪器 | 第36-37页 |
3 实验方法 | 第37页 |
4 结果与讨论 | 第37-44页 |
·新鲜制备的乙醇酸氧化酶同工酶pI的变化 | 第37-39页 |
·放置后的乙醇酸氧化酶同工酶pI的变化 | 第39-42页 |
·Native-PAGE中乙醇酸氧化酶同工酶pI的变化 | 第42-44页 |
第四章 乙醇酸氧化酶同工酶及其亚基的氨基酸组成 | 第44-51页 |
1 实验材料 | 第44页 |
2 实验试剂与主要仪器 | 第44-45页 |
·试剂 | 第44-45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
3 实验方法 | 第45-46页 |
·GO同工酶及其亚基氨基酸的获得 | 第45页 |
·GO同工酶及其亚基氨基酸组成的测定 | 第45-46页 |
4 结果与讨论 | 第46-50页 |
·菜心乙醇酸氧化酶同工酶不含二硫键 | 第46页 |
·菜心乙醇酸氧化酶同工酶制备物中含66kD碱性蛋白 | 第46-48页 |
·菜心乙醇酸氧化酶同工酶含酸性和碱性两种亚基 | 第48页 |
·GO同工酶及其40kD酸性亚基的氨基酸组成测定 | 第48-50页 |
5 小结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
缩写词 | 第57-58页 |
附录 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |