中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-6页 |
目录 | 第6-8页 |
前言 | 第8-21页 |
1 CSFV特性 | 第8-9页 |
2 CSFV基因组结构 | 第9-13页 |
·CSFV核酸非编码区结构与功能 | 第9-10页 |
·CSFV ORF及其所编码主要蛋白的结构与功能 | 第10-13页 |
3 CSFV分子流行病学研究 | 第13-17页 |
·CSFV基因分群 | 第13-15页 |
·CSFV疫苗毒分子变异 | 第15页 |
·国内流行CSFV E2抗原变异 | 第15-17页 |
4 CSFV疫苗及其免疫防制研究 | 第17-19页 |
·传统疫苗 | 第17页 |
·新型疫苗 | 第17-19页 |
5 我国猪瘟流行现状 | 第19-21页 |
材料与方法 | 第21-28页 |
1 材料 | 第21-24页 |
·病毒 | 第21页 |
·猪瘟石门系毒株 | 第21页 |
·流行毒株来源 | 第21页 |
·质粒载体 | 第21页 |
·菌种 | 第21页 |
·试剂及配制 | 第21-23页 |
·试剂及其来源 | 第21页 |
·材料配制 | 第21-23页 |
·仪器及其来源 | 第23页 |
·引物 | 第23-24页 |
2 方法 | 第24-28页 |
·病毒RNA的提取 | 第24-25页 |
·反转录 | 第25页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第25-26页 |
·电泳 | 第26页 |
·PCR产物纯化 | 第26页 |
·连接 | 第26页 |
·转化 | 第26页 |
·筛选 | 第26-27页 |
·抽提质粒 | 第27页 |
·酶切和PCR鉴定 | 第27页 |
·取阳性克隆进行序列分析 | 第27-28页 |
实验结果 | 第28-42页 |
1 阳性病料鉴定结果 | 第28-29页 |
2 CSFV E2基因RT-PCR | 第29页 |
3 纯化 | 第29-30页 |
4 重组质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
5 重组质粒的PCR鉴定 | 第30-31页 |
6 核苷酸序列的测定结果 | 第31-37页 |
7 氨基酸序列对比 | 第37-39页 |
8 同源性分析 | 第39页 |
9 遗传树分析 | 第39-42页 |
分析与讨论 | 第42-46页 |
1 引物特异性 | 第42页 |
2 连接和转化 | 第42-43页 |
3 重组质粒切酶及PCR鉴定 | 第43页 |
4 序列分析 | 第43-45页 |
·核苷酸序列比较 | 第43页 |
·氨基酸序列比较 | 第43-44页 |
·主要抗原表位B、C区氨基酸变异 | 第44页 |
·抗原表位A、D区氨基酸变异 | 第44页 |
·WH303和4-9D4单抗识别氨基酸位点变异情况 | 第44-45页 |
·氨基酸序列中Cys变异情况 | 第45页 |
·糖基化位点氨基酸变异情况 | 第45页 |
5 展望 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52页 |