| 一、 中文摘要 | 第1-6页 |
| 二、 英文摘要 | 第6-7页 |
| 三、 文献综述 | 第7-17页 |
| 3．1 抗菌肽及其在植物抗病基因工程中的应用 | 第7-12页 |
| 3．1．1 杀菌肽（Cecropin） | 第7-9页 |
| 3．1．1．1 杀菌肽的产生、分类及结构特点 | 第7页 |
| 3．1．1．2 杀菌肽的作用机理 | 第7-8页 |
| 3．1．1．3 杀菌肽在植物抗病基因工程中的应用及存在的问题 | 第8-9页 |
| 3．1．2 防御素（Defensin） | 第9-11页 |
| 3．1．2．1 防御素的产生、分类及结构特点 | 第9-10页 |
| 3．1．2．2 植物防御素的生理功能 | 第10页 |
| 3．1．2．3 防御素的作用机理 | 第10-11页 |
| 3．1．2．4 防御素在植物抗病基因工程中的应用 | 第11页 |
| 3．1．3 蜂毒素（Melittin） | 第11页 |
| 3．1．4 蛙皮素（Magainin） | 第11-12页 |
| 3．1．5 人工合成抗菌肽基因 | 第12页 |
| 3．2 信号肽及其在生物工程中的应用 | 第12-15页 |
| 3．2．1 信号肽的概念及信号假说的提出 | 第12页 |
| 3．2．2 信号肽的结构特点 | 第12-13页 |
| 3．2．3 信号肽的作用机理 | 第13-14页 |
| 3．2．4 信号肽自身对分泌效率的影响 | 第14页 |
| 3．2．5 靶蛋白对分泌效率的影响 | 第14页 |
| 3．2．6 分子伴侣对分泌效率的影响 | 第14-15页 |
| 3．2．7 信号肽在生物工程中的应用 | 第15页 |
| 3．3 基因的人工合成 | 第15-17页 |
| 3．3．1 基因化学合成的方法和原理 | 第15-16页 |
| 3．3．2 基因酶促合成的方法和原理 | 第16-17页 |
| 四、 引言 | 第17-18页 |
| 五、 材料与方法 | 第18-23页 |
| 5．1 实验材料 | 第18-19页 |
| 5．1．1 菌种、质粒及培养基 | 第18页 |
| 5．1．2 主要化学试剂及仪器 | 第18页 |
| 5．1．3 实验所用的引物序列 | 第18-19页 |
| 5．2 实验方法 | 第19-23页 |
| 5．2．1 抗菌肽CEMA的扩增方法 | 第19页 |
| 5．2．2 抗菌肽MCEMA的扩增方法 | 第19页 |
| 5．2．3 植物防御素AFP基因的扩增方法 | 第19-20页 |
| 5．2．4 基因操作方法 | 第20-21页 |
| 5．2．4．1 质粒的小量制备（碱裂解法） | 第20页 |
| 5．2．4．2 小片段的简易回收方法 | 第20-21页 |
| 5．2．4．3 大片段的回收方法 | 第21页 |
| 5．2．5 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第21-23页 |
| 5．2．5．1 大肠杆菌感受态的制备（PEG法） | 第21页 |
| 5．2．5．2 大肠杆菌的转化 | 第21-23页 |
| 六、 结果与分析 | 第23-32页 |
| 6．1 SPCEMA基因全长的获得及单价植物表达载体的构建 | 第23-26页 |
| 6．2 MCEMA基因全长的获得及单价植物表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 6．3 AFP基因全长的获得及单价植物表达载体的构建 | 第27-30页 |
| 6．4 杀菌肽与植物防御素双价植物表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 七、 讨论 | 第32-34页 |
| 7．1 抗菌肽CEMA基因的改造与合成 | 第32-33页 |
| 7．2 小片段基因的电泳和pUC121载体的构建 | 第33页 |
| 7．3 植物防御素AFP基因的获得 | 第33-34页 |
| 7．4 植物表达载体的构建 | 第34页 |
| 八、 结论 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 附录 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 文中缩写 | 第43页 |
