| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 前言及文献综述 | 第6-17页 |
| 1． 橡胶产胶、排胶生理 | 第6-8页 |
| 2． 堵塞现象及胶乳凝固机制的研究 | 第8-9页 |
| 3． 乙烯利的刺激增产机理 | 第9-10页 |
| 4． 植物几丁质酶研究综述 | 第10-11页 |
| 5． 橡胶树几丁质酶研究状况 | 第11-15页 |
| 6． 本研究的目的意义 | 第15-16页 |
| 7． 技术路线 | 第16-17页 |
| 第一部分： 橡胶树几丁质酶基因克隆及Northern狭线杂交 | 第17-34页 |
| 1． 材料 | 第17页 |
| 1．1 植物材料 | 第17页 |
| 1．2 菌种 | 第17页 |
| 1．3 生化试剂 | 第17页 |
| 2． 方法 | 第17-28页 |
| 2．1 橡胶树几丁质酶基因的克隆与测序 | 第17-25页 |
| 2．1．1 橡胶树基因组DNA的提取 | 第17-19页 |
| 2．1．2 几丁质酶基因PCR扩增 | 第19页 |
| 2．1．3 PCR扩增产物的克隆及重组子筛选 | 第19-25页 |
| 2．1．3．1 PCR产物的凝胶电泳观察 | 第19页 |
| 2．1．3．2 PCR产物的回收 | 第19-20页 |
| 2．1．3．3 目的片段的克隆 | 第20-25页 |
| 2．1．3．3．1 PCR回收片断与片pGEM—T载体的连接 | 第20页 |
| 2．1．3．3．2 感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| 2．1．3．3．3 转化 | 第21页 |
| 2．1．3．3．4 质粒DNA的微量提取 | 第21-22页 |
| 2．1．3．3．5 重组体酶切鉴定 | 第22-23页 |
| 2．1．3．3．6 重组子阳性克隆菌保存 | 第23页 |
| 2．1．3．3．7 阳性重组质粒的大量提取 | 第23-25页 |
| 2．1．4 DNA序列测定 | 第25页 |
| 2．2 Northern狭线杂交 | 第25-28页 |
| 2．2．1 橡胶树胶乳RNA提取 | 第25-26页 |
| 2．2．2 Northern狭线杂交分析 | 第26-28页 |
| 2．2．2．1 探针标记 | 第26-27页 |
| 2．2．2．2 RNA样品标记 | 第27页 |
| 2．2．2．3 预杂交及杂交 | 第27页 |
| 2．2．2．4 洗膜与显色 | 第27-28页 |
| 3． 结果与分析 | 第28-33页 |
| 3．1 橡胶树胶乳几丁质酶基因的克隆及阳性重组子的筛选 | 第28-30页 |
| 3．2 DNA序列测定 | 第30-32页 |
| 3．3 胶乳RNA的提取 | 第32页 |
| 3．4 Northern狭线杂交分析 | 第32-33页 |
| 4． 讨论 | 第33-34页 |
| 4．1 关于橡胶树胶乳RNA提取方法和取材 | 第33页 |
| 4．2 Northern狭线杂交 | 第33-34页 |
| 第二部分： 乙烯（利）刺激对几丁质酶活性影响的研究 | 第34-45页 |
| 材料与材料的处理 | 第34-45页 |
| 1． 材料 | 第34-35页 |
| 2． 方法 | 第35-37页 |
| 2．2．1 样品的采集 | 第35页 |
| 2．2．2 几丁质酶活性的测定 | 第35-37页 |
| 2．2．3 蛋白质含量测定 | 第37页 |
| 2．2．4 数据处理 | 第37页 |
| 3． 结果与分析 | 第37-43页 |
| 3．1 N—乙酰氨基葡萄糖标准曲线及回归方程 | 第37页 |
| 3．2 几丁质酶最适反应条件的确定 | 第37-38页 |
| 3．3 相同剂量乙烯利不同刺激时间对橡胶树胶乳中几丁质酶活性变化的影响 | 第38-39页 |
| 3．4 不同剂量乙烯利刺激橡胶树对几丁质酶活性的影响 | 第39-41页 |
| 3．5 同一剂量乙烯利刺激不同品系橡胶树几丁质酶活性变化 | 第41-42页 |
| 3．6 同一剂量乙烯利刺激不同割胶强度胶乳几丁质酶活性变化 | 第42-43页 |
| 4． 讨论 | 第43-45页 |
| 4．1 几丁质酶活性与胶乳产量的关系 | 第43-44页 |
| 4．2 割胶对几丁质酶活性的影响 | 第44页 |
| 4．3 不同品系橡胶树胶乳中几丁质酶活性、基因表达差异及与排胶的关系 | 第44-45页 |
| 结束语 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 图版 | 第47-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 英文摘要 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
