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实验性β-地中海贫血的基因治疗

一、中文摘要第1-8页
二、英文摘要第8-12页
三、前言第12-19页
四、材料与方法第19-34页
 <一> 材料第19-21页
  1.病毒载体第19页
  2.内切酶与其它工具酶第19页
  3.细胞系和细胞培养材料第19页
  4.实验小鼠第19页
  5.主要仪器第19-21页
 <二> 方法第21-34页
  1.反转录病毒载体介导的β-珠蛋白基因间接体内基因转移的基本路线第21-22页
  2.高病毒滴度β—珠蛋白基因产病毒细胞系的建立第22-24页
   2.1 “乒乓”超感染第22-23页
   2.2 病毒滴度检测第23页
   2.3 辅助病毒的检测第23-24页
  3.小鼠骨髓细胞的基因转移和骨髓移植第24-25页
   3.1 小鼠的选择与饲养第24页
   3.2 小鼠骨髓细胞的制备第24页
   3.3 小鼠骨髓细胞的感染和骨髓移植第24-25页
  4.人β-珠蛋白基因在小鼠体内整合与表达检测第25-34页
   4.1 脾结节小量DNA的制备第25-26页
   4.2 脾结节大量DNA和RNA的制备第26页
   4.3 聚合酶链反应(PCR)第26-27页
   4.4 小鼠骨髓、脾和胸腺DNA和RNA的制备第27页
   4.5 Southern blot分析第27-30页
   4.6 RT-PCR第30-31页
   4.7 RNase保护分析第31-34页
五、实验结果第34-43页
 1.具较高病毒滴度的产病毒细胞系的建立第34-35页
 2.人β-珠蛋白基因在小鼠CFU-S_(12)中的整合与表达第35-40页
 3.人β-珠蛋白基因在小鼠体内长期整合与表达第40-43页
六、讨论第43-47页
七、小结第47-48页
八、参考文献第48-51页
九、综述第51-65页
十、参考文献第65-69页
十一、英文名词及缩写第69-70页
十二、致谢第70页

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