一、中文摘要 | 第1-8页 |
二、英文摘要 | 第8-12页 |
三、前言 | 第12-19页 |
四、材料与方法 | 第19-34页 |
<一> 材料 | 第19-21页 |
1.病毒载体 | 第19页 |
2.内切酶与其它工具酶 | 第19页 |
3.细胞系和细胞培养材料 | 第19页 |
4.实验小鼠 | 第19页 |
5.主要仪器 | 第19-21页 |
<二> 方法 | 第21-34页 |
1.反转录病毒载体介导的β-珠蛋白基因间接体内基因转移的基本路线 | 第21-22页 |
2.高病毒滴度β—珠蛋白基因产病毒细胞系的建立 | 第22-24页 |
2.1 “乒乓”超感染 | 第22-23页 |
2.2 病毒滴度检测 | 第23页 |
2.3 辅助病毒的检测 | 第23-24页 |
3.小鼠骨髓细胞的基因转移和骨髓移植 | 第24-25页 |
3.1 小鼠的选择与饲养 | 第24页 |
3.2 小鼠骨髓细胞的制备 | 第24页 |
3.3 小鼠骨髓细胞的感染和骨髓移植 | 第24-25页 |
4.人β-珠蛋白基因在小鼠体内整合与表达检测 | 第25-34页 |
4.1 脾结节小量DNA的制备 | 第25-26页 |
4.2 脾结节大量DNA和RNA的制备 | 第26页 |
4.3 聚合酶链反应(PCR) | 第26-27页 |
4.4 小鼠骨髓、脾和胸腺DNA和RNA的制备 | 第27页 |
4.5 Southern blot分析 | 第27-30页 |
4.6 RT-PCR | 第30-31页 |
4.7 RNase保护分析 | 第31-34页 |
五、实验结果 | 第34-43页 |
1.具较高病毒滴度的产病毒细胞系的建立 | 第34-35页 |
2.人β-珠蛋白基因在小鼠CFU-S_(12)中的整合与表达 | 第35-40页 |
3.人β-珠蛋白基因在小鼠体内长期整合与表达 | 第40-43页 |
六、讨论 | 第43-47页 |
七、小结 | 第47-48页 |
八、参考文献 | 第48-51页 |
九、综述 | 第51-65页 |
十、参考文献 | 第65-69页 |
十一、英文名词及缩写 | 第69-70页 |
十二、致谢 | 第70页 |