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虾夷扇贝外套膜cDNA文库构建、EST测序分析及线粒体非编码区多态性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 文献综述第10-21页
   ·虾夷扇贝概述第10-11页
     ·虾夷扇贝分类学地位第10页
     ·虾夷扇贝的形态学特征第10页
     ·虾夷扇贝的生活习性和繁殖方式第10页
     ·虾夷扇贝线粒体结构及遗传特征分析第10-11页
   ·虾夷扇贝的养殖现状第11-12页
   ·虾夷扇贝养殖过程中出现的问题第12-13页
   ·虾夷扇贝养殖业健康可持续发展的解决办法第13-14页
   ·基因文库的构建及应用第14-17页
     ·基因组文库类型及应用第14-15页
     ·cDNA 文库类型及应用第15-17页
       ·经典cDNA 文库第15-16页
       ·标准化cDNA 文库第16页
       ·消减cDNA 文库第16页
       ·RACE cDNA 文库第16-17页
   ·CDNA 文库中基因克隆与筛选的主要方法第17页
     ·图位克隆技术(Map based cloning or positional cloning)第17页
     ·同源克隆技术(Homology based candidate gene method)第17页
     ·表达序列标签法(Expressed sequence tagging method, EST)第17页
   ·基于EST 的生物信息学分析第17-21页
第二章 虾夷扇贝外套膜CDNA 文库的构建第21-30页
 1 引言第21页
 2 实验材料与方法第21-27页
   ·实验样品来源第21页
   ·实验主要试剂第21页
   ·菌株与载体第21页
   ·SOC 培养基第21-22页
   ·虾夷扇贝总RNA 的提取第22页
   ·MRNA 的纯化及纯度检测第22页
   ·反转录合成CDNA第22-27页
     ·15t Stand cDNA 的合成第23-24页
     ·211d Strand cDNA 的合成第24页
     ·接头引物连接第24页
     ·限制酶Not I 酶切反应第24-25页
     ·使用Spin Column 除去短链cDNA第25-26页
     ·载体连接第26页
     ·质粒转化(电刺激法)第26-27页
     ·引物序列第27页
   ·CDNA 文库质量检测第27页
 3 实验结果第27-29页
   ·总RNA 的提取第27-28页
   ·MRNA 纯度检测第28页
   ·CDNA 的合成第28-29页
   ·CDNA 文库质量检测第29页
 4 讨论第29-30页
第三章 虾夷扇贝CDNA 文库中EST 序列分析及EST-SSR 的筛选第30-39页
 1 引言第30页
 2 实验材料与方法第30-31页
   ·实验材料第30页
   ·CDNA 文库的构建第30页
   ·CDNA 文库的克隆测序与比对分析第30-31页
   ·EST-SSR 筛选与引物设计第31页
 3 结果第31-36页
   ·CDNA 文库的克隆测序与序列分析第31-32页
   ·免疫相关基因的EST 序列功能分析第32-34页
   ·EST 序列中SSR 查找与分析第34-35页
   ·CDNA 文库中微卫星引物设计第35-36页
 4 讨论第36-39页
   ·EST 序列中免疫相关基因的筛选与分析第36-38页
   ·EST-SSR 分析第38-39页
第四章 虾夷扇贝线粒体非编码区多态性研究第39-43页
 1 引言第39页
 2 实验材料与方法第39-40页
   ·实验样品第39页
   ·DNA 提取第39页
   ·引物设计第39页
   ·PCR 扩增反应体系第39-40页
   ·扩增产物琼脂糖电泳检测第40页
   ·测序及序列分析第40页
 3 结果第40-42页
   ·琼脂糖电泳检测结果第40页
   ·测序结果分析第40-41页
   ·单元型多态性分析第41-42页
   ·单元型的群体分布第42页
 4 讨论第42-43页
结论第43-44页
参考文献第44-51页
致谢第51-52页
研究生期间论文发表情况第52页

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