| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-8页 |
| 缩写词英汉对照表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| 1 HEV 研究现状 | 第10-16页 |
| ·HEV 的生物学特征 | 第10-11页 |
| ·HEV 形态与结构 | 第10页 |
| ·HEV 基因组 | 第10-11页 |
| ·HEV 基因型 | 第11页 |
| ·HEV 感染的流行病学 | 第11-13页 |
| ·流行趋势 | 第11-12页 |
| ·传播途径 | 第12页 |
| ·易感动物 | 第12-13页 |
| ·HEV 的检测与防控 | 第13-16页 |
| ·HEV 的检测 | 第13页 |
| ·HEV 疫苗研究现状 | 第13-16页 |
| 2 家蚕-杆状病毒表达系统研究现状 | 第16-18页 |
| ·杆状病毒-昆虫表达系统 | 第16页 |
| ·家蚕-杆状病毒表达系统 | 第16-18页 |
| ·家蚕-杆状病毒表达系统的优点 | 第16-17页 |
| ·家蚕生物反应器表达策略的优化 | 第17页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统在疫苗生产方面的研究及应用 | 第17-18页 |
| 3 研究目的和意义 | 第18页 |
| 4 研究内容与方法 | 第18-19页 |
| 第二章 HEV 衣壳蛋白检测抗体的制备 | 第19-26页 |
| 1 材料和方法 | 第19-22页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-22页 |
| ·目的基因的扩增 | 第19-20页 |
| ·PCR 产物的纯化、回收 | 第20页 |
| ·目的基因的克隆与鉴定 | 第20-21页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第21页 |
| ·重组表达菌的诱导表达与 SDS-PAGE 分析 | 第21页 |
| ·融合蛋白的镍柱亲和层析纯化 | 第21-22页 |
| ·融合蛋白的质谱鉴定 | 第22页 |
| ·兔源多克隆抗体制备及效价分析 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-25页 |
| ·目的基因的扩增 | 第22页 |
| ·pMD-18T-ORF2-C 的酶切鉴定 | 第22页 |
| ·重组质粒 pET-HEV-ORF2-C 的鉴定 | 第22-23页 |
| ·重组蛋白表达条件优化 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第24页 |
| ·重组蛋白的质谱分析 | 第24页 |
| ·重组蛋白的免疫原性分析 | 第24-25页 |
| 3 讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 真核表达 HEV 衣壳蛋白 | 第26-34页 |
| 1 材料和方法 | 第26-29页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·重组杆状病毒载体的构建 | 第27-28页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·目的基因片段的 PCR 扩增 | 第27页 |
| ·PCR 产物的纯化、回收 | 第27页 |
| ·目的基因的克隆与鉴定 | 第27页 |
| ·目的片段与转移载体 pVL-1393 的连接 | 第27-28页 |
| ·构建、筛选携带 HEV-ORF2 基因的重组杆状病毒 | 第28页 |
| ·Bm-N 细胞的复苏、传代及病毒繁殖 | 第28页 |
| ·病毒 Bm-BacPAK6 基因组 DNA 的制备 | 第28页 |
| ·共转染 | 第28页 |
| ·共转染的重组病毒蚕体表达 | 第28页 |
| ·病毒的筛选、纯化和扩增 | 第28页 |
| ·筛选高表达克隆毒株 | 第28-29页 |
| ·表达时相测定 | 第29页 |
| ·HEV-ORF2 基因在家蚕中的表达 | 第29页 |
| ·HEV 空衣壳纯化与电镜观察 | 第29页 |
| ·HEV 空衣壳的纯化 | 第29页 |
| ·HEV 空衣壳电镜观察 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-32页 |
| ·目的基因的扩增 | 第29页 |
| ·重组质粒 pMD-HEV 的鉴定 | 第29页 |
| ·重组质粒 pVL-HEV 的鉴定 | 第29-30页 |
| ·HEV 衣壳的间接 ELISA 检测 | 第30页 |
| ·高表达毒株的筛选 | 第30-31页 |
| ·HEV 空衣壳的表达时相 | 第31页 |
| ·HEV 电镜观察 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 作者简介 | 第41-42页 |
| 导师简介 | 第42-43页 |