| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-18页 |
| 1 本研究的意义 | 第12-13页 |
| 2 本研究在国内外的研究现状与存在问题 | 第13-18页 |
| 第二章 夜来香均一化全长 cDNA 文库的构建与 EST 分析 | 第18-32页 |
| 1 试验材料与方法 | 第18-22页 |
| ·试验材料 | 第18页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第18页 |
| ·逆转录反应 | 第18-19页 |
| ·逆转录产物的纯化 | 第19页 |
| ·全长 cDNA 第二链的合成 | 第19-20页 |
| ·全长 cDNA 的均一化处理 | 第20页 |
| ·全长 cDNA 的扩增 | 第20-21页 |
| ·全长均一化 cDNA 扩增产物的纯化 | 第21页 |
| ·全长均一化 cDNA 扩增产物的酶切与回收 | 第21页 |
| ·全长均一化 cDNA 扩增产物的酶切与定向克隆载体的连接 | 第21页 |
| ·连接产物的透析脱盐 | 第21页 |
| ·连接产物的转化 | 第21-22页 |
| ·插入片段大小的检测 | 第22页 |
| ·均一化全长 cDNA 文库的测序与 EST 分析 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-29页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·双链 cDNA 的合成 | 第23-24页 |
| ·DSN 均一化处理结果比较 | 第24-25页 |
| ·电转化结果比较 | 第25页 |
| ·插入片段大小检测 | 第25页 |
| ·EST 测序结果分析 | 第25-29页 |
| 3 讨论 | 第29-32页 |
| ·总 RNA 的质量决定文库构建的前提条件 | 第29页 |
| ·逆转录反应效率的高低是构建全长 cDNA 文库的技术关键 | 第29页 |
| ·LA-PCR 扩增效率的高低是构建全长 cDNA 文库的重要保障 | 第29-30页 |
| ·半透膜回收既能对 PCR 产物进行有效分级又能提高 PCR 产物的克隆效率 | 第30页 |
| ·DSN 酶消化与抑制 LA-PCR 相结合是获得均一化全长 cDNA 的有效手段 | 第30页 |
| ·脱盐处理是大幅度提高转化效率的重要措施 | 第30-31页 |
| ·cDNA 均一化是发现新基因的一种重要方式 | 第31-32页 |
| 第三章 夜来香开花相关基因的序列分析与遗传转化 | 第32-50页 |
| 1 试验材料与方法 | 第33-35页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·测序与序列分析 | 第33页 |
| ·植物表达载体构建 | 第33-35页 |
| ·CnNAC、CnMYB 和 CnGCS 基因的遗传转化 | 第35页 |
| ·转基因植株的检测 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-50页 |
| ·夜来香 CnNAC 基因的序列分析 | 第35-39页 |
| ·夜来香 CnNAC 基因全长 cDNA 结构分析 | 第35-36页 |
| ·夜来香 CnNAC 基因全长蛋白结构分析 | 第36-39页 |
| ·夜来香 CnMYB 基因的序列分析 | 第39-42页 |
| ·夜来香 CnMYB 基因全长 cDNA 结构分析 | 第39-41页 |
| ·夜来香 CnMYB 基因全长蛋白结构分析 | 第41-42页 |
| ·夜来香 CnGCS 基因的序列分析 | 第42-46页 |
| ·夜来香 CnGCS 基因全长 cDNA 结构分析 | 第42-46页 |
| ·夜来香 CnGCS 基因全长蛋白结构分析 | 第46页 |
| ·花香相关基因的遗传转化与转基因植株的检测 | 第46-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
