| 论文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-19页 |
| 第一章 脑组织蛋白的二维液相色谱分离方法建立 | 第19-38页 |
| 摘要 | 第19-21页 |
| 前言 | 第21-23页 |
| 材料和方法 | 第23-27页 |
| 1.总蛋白样品制备 | 第23-24页 |
| 2.蛋白定量 | 第24页 |
| 3.总蛋白除脂 | 第24-25页 |
| 4.蛋白溶液脱盐 | 第25页 |
| 5.二维凝胶电泳 | 第25页 |
| 6.一维聚焦色谱(HPCF)分离 | 第25-26页 |
| 7.二维反相色谱(HPRP)分离 | 第26-27页 |
| 8.软件和数据分析 | 第27页 |
| 结果 | 第27-29页 |
| 1.脑组织样本处理方法 | 第27-28页 |
| 2.大脑皮层总蛋白的凝胶电泳 | 第28页 |
| 3.ProteomeLab PF 2D分离脑组织总蛋白的重复性 | 第28-29页 |
| 讨论 | 第29-33页 |
| 1.脑组织蛋白处理方法 | 第29-31页 |
| 2.ProteomeLab PF2D对脑组织蛋白样本的分离能力和重复性 | 第31-33页 |
| 版图与说明 | 第33-38页 |
| 第二章 转基因模型小鼠的蛋白表达差异分析 | 第38-84页 |
| 摘要 | 第38-40页 |
| 前言 | 第40-43页 |
| 第一节 PS cDKO小鼠的海马蛋白表达差异分析 | 第43-62页 |
| 材料和方法 | 第43-48页 |
| 1.实验动物和基因型检测方法 | 第43-44页 |
| 2.总蛋白样品制备 | 第44页 |
| 3.蛋白定量、蛋白除脂、脱盐、二维色谱分离和数据软件分析 | 第44-45页 |
| 4.MALDI-TOF/TOF质谱鉴定 | 第45页 |
| 5.Western blot | 第45-48页 |
| 结果 | 第48页 |
| 1.海马总蛋白二维色谱分离和差异表达分析 | 第48页 |
| 2.MALDI-TOF/TOF质谱鉴定 | 第48页 |
| 3.Western blot | 第48页 |
| 讨论 | 第48-55页 |
| 1.神经元生长和可塑性相关蛋白 | 第50-51页 |
| 2.神经损伤相关蛋白 | 第51-52页 |
| 3.能量代谢相关蛋白 | 第52-55页 |
| 版图与说明 | 第55-62页 |
| 第二节 NR2B转基因小鼠蛋白表达差异分析 | 第62-84页 |
| 材料和方法 | 第62-63页 |
| 1.实验动物和基因型检测 | 第62页 |
| 2.总蛋白样品制备 | 第62页 |
| 3.蛋白定量、蛋白除脂、脱盐、二维色谱分离、数据软件分析和MALDI-TOF质谱鉴定 | 第62页 |
| 4.Western blot | 第62-63页 |
| 结果 | 第63-64页 |
| 1.大脑皮层总蛋白的二维色谱分离和差异表达分析 | 第63页 |
| 2.MALDI-TOF/TOF质谱鉴定 | 第63-64页 |
| 3.Western blot | 第64页 |
| 讨论 | 第64-71页 |
| 1.蛋白功能分类 | 第65-70页 |
| ·神经递质相关蛋白 | 第65页 |
| ·突触可塑性相关蛋白 | 第65-67页 |
| ·线粒体能量代谢相关蛋白 | 第67-68页 |
| ·细胞循环和基因组稳定相关蛋白 | 第68-69页 |
| ·神经元发育相关蛋白 | 第69-70页 |
| 2.能量代谢和神经元功能维持 | 第70-71页 |
| 版图与说明 | 第71-84页 |
| 第三章 PS cDKO小鼠氧化应激研究 | 第84-112页 |
| 摘要 | 第84-86页 |
| 前言 | 第86-88页 |
| 第一节 PS cDKO小鼠氧化产物和抗氧化物酶的检测 | 第88-101页 |
| 材料和方法 | 第88-89页 |
| 1.实验动物和组织 | 第88页 |
| 2.脂质过氧化物和内源性抗氧化酶测定 | 第88页 |
| 3.氧化修饰蛋白的分光光谱DNPH法检测 | 第88页 |
| 4.Oxyblot | 第88-89页 |
| 5.Western blot检测皮层GFAP蛋白水平 | 第89页 |
| 6.统计方法 | 第89页 |
| 结果 | 第89-91页 |
| 1.大脑皮层脂质氧化和蛋白氧化水平的变化 | 第89-90页 |
| 2.大脑皮层内源性抗氧化物酶水平的变化 | 第90页 |
| 3.肝组织蛋白氧化水平和内源性抗氧化物酶水平的变化 | 第90页 |
| 4.大脑皮层GFAP蛋白表达水平变化 | 第90-91页 |
| 讨论 | 第91-94页 |
| 1.PS cDKO小鼠氧化产物增加 | 第91-92页 |
| 2.PS cDKO小鼠抗氧化酶活力改变 | 第92-94页 |
| 版图与说明 | 第94-101页 |
| 第二节 PS cDKO小鼠皮层iPF_2α-Ⅵ检测 | 第101-107页 |
| 材料和方法 | 第101-103页 |
| 1.实验动物 | 第101页 |
| 2.样品处理 | 第101-102页 |
| 3.GC-NICI-MS检测 | 第102-103页 |
| 4.AA的体外氧化 | 第103页 |
| 5.数据处理 | 第103页 |
| 结果 | 第103页 |
| 讨论 | 第103-105页 |
| 版图与说明 | 第105-107页 |
| 第三节 PS cDKO小鼠氧化修饰蛋白初步研究 | 第107-112页 |
| 材料和方法 | 第107-108页 |
| 1.实验动物和组织 | 第107页 |
| 2.蛋白样品制备 | 第107页 |
| 3.标记蛋白羧基 | 第107-108页 |
| 4.羧基化蛋白的亲和纯化 | 第108页 |
| 5.蛋白酶解和LC-MS | 第108页 |
| 结果 | 第108-109页 |
| 讨论 | 第109-110页 |
| 版图与说明 | 第110-112页 |
| 第四章 文献综述 | 第112-132页 |
| 一、PS、NR2B与AD | 第112-121页 |
| 1.PS | 第112-119页 |
| ·PS的结构 | 第112-113页 |
| ·PS的功能 | 第113-119页 |
| ·PS相关AD转基因模型 | 第119页 |
| 2.NR2B | 第119-121页 |
| ·NR2B结构特点 | 第120页 |
| ·NR2B的功能 | 第120-121页 |
| ·NR2B与AD | 第121页 |
| 二、AD脑组织蛋白质组学研究 | 第121-126页 |
| 1 AD患者脑组织蛋白组学研究 | 第122-123页 |
| 2 AD模式动物蛋白组学研究 | 第123-124页 |
| 3 蛋白修饰的蛋白组学研究 | 第124-126页 |
| ·氧化修饰 | 第124页 |
| ·硝基化修饰 | 第124-125页 |
| ·磷酸化修饰 | 第125页 |
| ·蛋白剪切 | 第125-126页 |
| 三、AD和氧化应激 | 第126-132页 |
| 1.AD中自由基的主要来源 | 第126页 |
| 2.AD中的氧化产物 | 第126-130页 |
| ·核酸氧化产物 | 第126-127页 |
| ·脂质过氧化产物 | 第127页 |
| ·蛋白氧化产物 | 第127-130页 |
| 3.AD中的抗氧化能力 | 第130页 |
| 4.氧化应激在AD病理过程中的作用 | 第130页 |
| 5.AD的抗氧化治疗 | 第130-132页 |
| 参考文献 | 第132-146页 |
| 缩略词表 | 第146-150页 |
| 已/待刊文章 | 第150-151页 |
| 致谢 | 第151页 |
