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番茄细菌性溃疡病菌血清学、PCR检测技术及其遗传多样性的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
第一章 文献综述第10-33页
 1 番茄细菌性溃疡病及病原菌第11-19页
   ·病害分布第11页
   ·症状特点第11-12页
   ·病原生物学第12-13页
   ·分类地位第13页
   ·寄主植物第13-14页
   ·病原菌的传播及病害流行第14页
   ·病原菌的存活及侵染循环第14-15页
   ·番茄细菌性溃疡病的防治第15-19页
     ·植物检疫第16页
     ·寄主的抗病性与抗病育种第16-17页
     ·种子健康检测与保健处理第17-18页
     ·农业防治第18页
     ·化学防治第18-19页
 2 番茄溃疡病的研究现状第19-21页
   ·国内研究现状第19-20页
   ·国外研究现状第20-21页
 3 番茄细菌性溃疡病菌的检测方法第21-24页
   ·田间观察第21页
   ·病原分离培养鉴定第21-22页
   ·在番茄和烟草上的致病性测定第22页
   ·紫茉莉接种检测第22-23页
   ·血清学方法检测第23页
   ·脂肪酸甲酷分析第23-24页
   ·噬菌体定型法第24页
 4 植物病原细菌分子生物学检测技术研究进展第24-32页
   ·基因组指纹技术在植物病原细菌群体多样性研究中的应用第25-27页
     ·RAPD基因组指纹技术第25页
     ·扩增片段长度多态性(AFLP)第25页
     ·rep-PCR第25-27页
   ·植物病原细菌DNA分子检测技术第27-30页
     ·分子杂交检测法第28页
     ·经典PCR技术在植物病原细菌检测中的应用第28页
     ·独有基因第28-29页
     ·质粒第29页
     ·核糖体第29-30页
     ·转录间隔区ITS第30页
   ·实时荧光PCR技术及应用第30-31页
   ·杂交检测的新进展第31-32页
 5 本研究的目的和意义第32-33页
   ·研究目的第32页
   ·研究意义第32-33页
第二章 番茄细菌性溃疡病菌血清学的研究与应用第33-46页
 1 实验材料第33-35页
   ·菌株第33-34页
   ·试剂第34-35页
   ·仪器及耗材第35页
 2 抗血清的制备第35-39页
   ·实验动物第35页
   ·免疫抗原的制备第35-36页
   ·佐剂抗原的制备第36页
   ·免疫注射与抗血清的提取第36-37页
   ·抗血清效价的测定第37页
   ·抗血清中免疫球蛋白(IgG)的提取与纯化第37-39页
     ·采用硫酸铵沉淀法进行粗提,操作步骤如下:第37-38页
     ·采用葡聚糖凝胶过滤层析法纯化粗提的IgG第38-39页
   ·抗血清的特异性测定第39页
 3 结果与分析第39-44页
   ·自制抗血清的效价测定第39-40页
   ·自制抗血清的特异性第40-43页
   ·间接ELISA法的检测稳定性第43-44页
   ·间接ELISA法的检测灵敏度第44页
 4 小结与讨论第44-46页
第三章 番茄细菌性溃疡病菌的PCR检测方法的研究第46-53页
 1 材料与方法第46-47页
   ·供试材料第46页
   ·仪器及试剂第46页
   ·菌株的培养保存与菌悬液配制及病组织的预处理第46-47页
   ·常规PCR检测第47页
   ·TaqMAN探针实时荧光PCR检测第47页
 2 结果与分析第47-51页
   ·常规PCR检测第47-48页
   ·常规PCR检测的特异性第48-49页
   ·TaqMAN探针实时荧光PCR检测第49-50页
   ·TaqMAN探针实时荧光PCR检测的特异性第50-51页
   ·常规PCR方法与实时荧光PCR方法检测效果的比较第51页
 3 小结与讨论第51-53页
第四章 番茄细菌性溃疡病菌的菌系分化的研究第53-62页
 1 材料与方法第53-56页
   ·试验菌株第53-54页
   ·菌株的培养保存与菌悬液配制及处理第54页
   ·细菌基因组DNA的提取第54-55页
   ·ERIC-PCR和BOX-PCR特异性引物第55页
   ·PCR扩增第55页
   ·对ERIC-PCR和BOX-PCR的两种指纹图谱的聚类分析方法第55-56页
 2 结果与分析第56-59页
   ·番茄细菌性溃疡病菌基因组的ERIC-PCR指纹图谱分析第56页
   ·番茄细菌性溃疡病菌基因组的BOX-PCR指纹图谱分析第56-58页
   ·ERIC-PCR与BOX-PCR两种结果的比较分析第58-59页
 3 讨论与结论第59-62页
   ·Rep-PCR技术可快速区分菌株间的遗传差异第59页
   ·Rep-PCR技术可用于快速监测番茄细菌性溃疡病菌群体的遗传多样性第59-60页
   ·番茄细菌性溃疡病菌的遗传分群与菌株的地理来源关系第60-62页
第五章 结论与讨论第62-65页
 1 关于自制抗血清和间接法 ELISA检测番茄细菌性溃疡病菌第62页
 2 常规PCR法与实时荧光PCR法检测Cmm效果的比较第62-63页
 3 关于REP-PCR在番茄细菌性溃疡病菌遗传多样性上的研究第63-65页
   ·比较ERIC与BOX两种引物在番茄细菌性溃疡病菌遗传多样性的应用第63-64页
   ·BOX引物用于番茄细菌性溃疡病菌群体的遗传多样性分析第64页
   ·番茄细菌性溃疡病菌的遗传分群与菌株的地理来源关系第64-65页
参考文献第65-71页
致谢第71-72页
作者简介第72-73页
附录第73-75页

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