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组蛋白乙酰转移酶p300对人NBS1基因表达的影响及其分子机制研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-8页
第一章 研究背景第8-21页
 一、NBS1 基因及其转录调控机制的研究进展第8-11页
  (一) NBS1 基因的发现第8页
  (二) NBS1 基因的结构及其转录调控第8-9页
  (三) NBS1 的功能及研究现状第9-11页
 二、组蛋白乙酰化修饰与真核生物基因的转录调控第11-19页
  (一) 染色质重塑与转录调控第11-12页
  (二) 组蛋白乙酰化修饰与转录调控第12-19页
 三、本论文研究的内容及意义第19-21页
第二章 实验材料与方法第21-33页
 一、实验材料第21页
  (一) 质粒第21页
  (二) 蛋白质和抗体第21页
  (三) 哺乳动物细胞系第21页
  (四) 试剂第21页
 二、实验方法第21-33页
  I. 分子生物学试验方法第21-27页
   (一) 分子克隆第21页
   (二) DNA 的琼脂糖电泳第21-22页
   (三) 质粒大量制备的方法第22-23页
   (四) 哺乳动物细胞总 RNA 的提取第23-24页
   (五) 逆转录第24-25页
   (六) PCR 和 Real-time PCR第25-27页
  II. 细胞生物学实验方法第27-33页
   (一) 哺乳动物细胞系的培养第27页
   (二) 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测第27-29页
   (三) 蛋白质的 Western Blotting 分析第29-31页
   (四) 染色质免疫沉淀实验(ChIP)第31-33页
第三章 实验结果与分析第33-41页
 一、重组质粒的构建及鉴定第33-36页
  (一) NBS1 报告基因质粒的构建及鉴定第33-34页
  (二) 点突变质粒的构建及鉴定第34-36页
 二、组蛋白乙酰转移酶p300 在 NBS1 基因转录调控中的作用第36-41页
  (一) p300 参与了 NBS1 基因的转录激活第36页
  (二) p300 提高了内源 NBS1 基因的表达水平第36-38页
  (三) p300 能增强 NBS1 基因启动子处组蛋白 H3 的乙酰化水平第38-39页
  (四) NBS1 启动子区-493 位 C-MYC 结合位点在 NBS1 转录调控中发挥重要作用第39页
  (五) 转录辅激活子p300和转录因子的作用第39-41页
第四章 讨论第41-44页
 一、组蛋白乙酰转移酶p300 参与了NBS1 基因的转控第41页
 二、p300 通过乙酰化组蛋白H3从而促进NBS1基因的转录第41-42页
 三、转录辅因子和转录因子对NBS1基因转录激活的促进作用第42-44页
第五章 结论第44-45页
参考文献第45-54页
致谢第54页

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