中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
第一章 研究背景 | 第8-21页 |
一、NBS1 基因及其转录调控机制的研究进展 | 第8-11页 |
(一) NBS1 基因的发现 | 第8页 |
(二) NBS1 基因的结构及其转录调控 | 第8-9页 |
(三) NBS1 的功能及研究现状 | 第9-11页 |
二、组蛋白乙酰化修饰与真核生物基因的转录调控 | 第11-19页 |
(一) 染色质重塑与转录调控 | 第11-12页 |
(二) 组蛋白乙酰化修饰与转录调控 | 第12-19页 |
三、本论文研究的内容及意义 | 第19-21页 |
第二章 实验材料与方法 | 第21-33页 |
一、实验材料 | 第21页 |
(一) 质粒 | 第21页 |
(二) 蛋白质和抗体 | 第21页 |
(三) 哺乳动物细胞系 | 第21页 |
(四) 试剂 | 第21页 |
二、实验方法 | 第21-33页 |
I. 分子生物学试验方法 | 第21-27页 |
(一) 分子克隆 | 第21页 |
(二) DNA 的琼脂糖电泳 | 第21-22页 |
(三) 质粒大量制备的方法 | 第22-23页 |
(四) 哺乳动物细胞总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
(五) 逆转录 | 第24-25页 |
(六) PCR 和 Real-time PCR | 第25-27页 |
II. 细胞生物学实验方法 | 第27-33页 |
(一) 哺乳动物细胞系的培养 | 第27页 |
(二) 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第27-29页 |
(三) 蛋白质的 Western Blotting 分析 | 第29-31页 |
(四) 染色质免疫沉淀实验(ChIP) | 第31-33页 |
第三章 实验结果与分析 | 第33-41页 |
一、重组质粒的构建及鉴定 | 第33-36页 |
(一) NBS1 报告基因质粒的构建及鉴定 | 第33-34页 |
(二) 点突变质粒的构建及鉴定 | 第34-36页 |
二、组蛋白乙酰转移酶p300 在 NBS1 基因转录调控中的作用 | 第36-41页 |
(一) p300 参与了 NBS1 基因的转录激活 | 第36页 |
(二) p300 提高了内源 NBS1 基因的表达水平 | 第36-38页 |
(三) p300 能增强 NBS1 基因启动子处组蛋白 H3 的乙酰化水平 | 第38-39页 |
(四) NBS1 启动子区-493 位 C-MYC 结合位点在 NBS1 转录调控中发挥重要作用 | 第39页 |
(五) 转录辅激活子p300和转录因子的作用 | 第39-41页 |
第四章 讨论 | 第41-44页 |
一、组蛋白乙酰转移酶p300 参与了NBS1 基因的转控 | 第41页 |
二、p300 通过乙酰化组蛋白H3从而促进NBS1基因的转录 | 第41-42页 |
三、转录辅因子和转录因子对NBS1基因转录激活的促进作用 | 第42-44页 |
第五章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-54页 |
致谢 | 第54页 |