| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 前言:细胞核的迁移和锚定 | 第8-16页 |
| ·真核生物的细胞核 | 第8-10页 |
| ·真核细胞的结构 | 第8页 |
| ·细胞核的结构和在细胞内的定位 | 第8-10页 |
| ·研究细胞核定位的生物模型 | 第10-15页 |
| ·酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) | 第10-11页 |
| ·构巢曲霉(Aspergillus nidulans) | 第11页 |
| ·秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans) | 第11-12页 |
| ·黑腹果蝇(Drosophila Melanogaster) | 第12-14页 |
| ·哺乳动物:细胞核迁移的研究及其重要意义 | 第14-15页 |
| ·细胞核定位研究小结:细胞骨架和分子马达在细胞核定位中的重要作用 | 第15-16页 |
| ·细胞核的迁移 | 第15页 |
| ·细胞核的锚定 | 第15-16页 |
| 第二章 Syne-1和Syne-2在肌肉细胞核锚定和运动神经发育中起着重要作用 | 第16-40页 |
| ·背景知识 | 第16-23页 |
| ·KASH蛋白的发现和在低等生物中的研究 | 第16-18页 |
| ·哺乳动物中的KASH蛋白 | 第18-19页 |
| ·小鼠肌肉细胞的发育以及肌细胞核的排布 | 第19-22页 |
| ·选题的目的和意义 | 第22-23页 |
| ·材料与方法 | 第23-29页 |
| ·Syne-1和Syne-2打靶质粒的构建 | 第23页 |
| ·MCK-Syne-2转基因小鼠的培育 | 第23页 |
| ·胚胎干细胞的培养 | 第23-24页 |
| ·胚胎干细胞电击转染和同源重组克隆的筛选 | 第24页 |
| ·ES细胞的核型分析 | 第24-25页 |
| ·嵌合体小鼠的培育 | 第25页 |
| ·基因组DNA的抽提和Southern杂交 | 第25页 |
| ·Syne-1,Syne-2和SUN2蛋白特异性抗体的制备和纯化 | 第25页 |
| ·组织切片 | 第25-26页 |
| ·苏木精—伊红(HE)染色 | 第26页 |
| ·免疫荧光染色 | 第26-28页 |
| ·电生理实验 | 第28页 |
| ·引物列表 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-39页 |
| ·Syne-1,Syne-2蛋白KASH功能域敲除小鼠的培育和鉴定 | 第29-31页 |
| ·Syne-1基因敲除破坏了突触外肌肉细胞核的均匀定位 | 第31-32页 |
| ·Syne-1基因敲除破坏了神经肌肉接头下肌肉细胞核的锚定 | 第32-34页 |
| ·Syne-2敲除后不影响肌细胞核定位但Syne-2过表达干扰了肌细胞核锚定 | 第34-35页 |
| ·Syne-1;Syne-2双敲除小鼠无法呼吸,出生后很快死亡 | 第35-36页 |
| ·Syne-1敲除后导致运动神经末端分支显著变长 | 第36-38页 |
| ·Syne基因敲除对神经肌肉接头发育中关键分子的表达未造成显著影响 | 第38页 |
| ·Syne基因双敲除并未显著影响神经肌肉接头的信号传输 | 第38-39页 |
| ·小结与讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 SUN1和SUN2在肌肉细胞核锚定中的功能 | 第40-51页 |
| ·背景知识 | 第40-44页 |
| ·SUN蛋白的发现 | 第40-41页 |
| ·SUN蛋白多样的分布和功能 | 第41页 |
| ·SUN蛋白与KASH蛋白相互作用 | 第41-43页 |
| ·选题的目的和意义 | 第43-44页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·SUN2基因打靶载体的构建 | 第44页 |
| ·SUN2基因敲除小鼠基因型鉴定所用引物列表 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-49页 |
| ·SUN1和SUN2都在小鼠肌肉中表达并且定位在细胞核膜上 | 第45页 |
| ·SUN1或SUN2分别被敲除后不影响肌细胞核的定位 | 第45-46页 |
| ·SUN1和SUN2同时被敲除后破坏了肌肉细胞核的定位 | 第46-47页 |
| ·SUN双敲除后影响了膈神经的发育 | 第47-48页 |
| ·SUN双敲除破坏了Syne-1的细胞核膜定位 | 第48-49页 |
| ·小结与讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 Syne-1,Syne-2和SUN1,SUN2在神经细胞迁移中的功能 | 第51-69页 |
| ·背景知识 | 第51-59页 |
| ·大脑皮层的结构 | 第51-52页 |
| ·大脑皮层的发育和神经细胞的迁移 | 第52-55页 |
| ·神经细胞迁移过程的细胞核迁移(Nucleokinesis) | 第55页 |
| ·胞质动力蛋白/Lis1复合体和细胞核迁移 | 第55-56页 |
| ·细胞核膜与细胞核迁移 | 第56-58页 |
| ·选题的目的和意义 | 第58-59页 |
| ·材料与方法 | 第59-61页 |
| ·利用BrdU对神经细胞迁移示踪 | 第59页 |
| ·胚胎鼠脑的组织学处理 | 第59页 |
| ·胚胎小鼠大脑皮层细胞的原代培养 | 第59-60页 |
| ·抗体列表 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-67页 |
| ·SUN双敲除小鼠的脑显著变小并存在多种缺陷 | 第61页 |
| ·SUN双敲除小鼠大脑皮层的分层缺陷 | 第61页 |
| ·SUN双敲除导致小鼠皮层神经细胞辐射方向迁移失败 | 第61-63页 |
| ·Syne双敲除小鼠的大脑表现出与SUN双敲除小鼠相似的缺陷 | 第63-64页 |
| ·Syne-1/2和SUN1/2在神经细胞中的定位 | 第64页 |
| ·SUN1/2的缺失导致Syne-2无法正常定位到核膜上 | 第64-65页 |
| ·Syne-1/2与Lis1和动力蛋白共定位 | 第65-67页 |
| ·小结和展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 在学期间发表的文章 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
