| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 猪瘟及猪瘟病毒研究进展 | 第11-25页 |
| ·猪瘟研究进展 | 第11-14页 |
| ·猪瘟概述 | 第11-12页 |
| ·猪瘟的流行病学和临床症状 | 第12-14页 |
| ·猪瘟病毒研究进展 | 第14-22页 |
| ·猪瘟病毒的形态及理化特性 | 第14页 |
| ·猪瘟病毒的基因组结构 | 第14-16页 |
| ·猪瘟病毒基因组编码的蛋白质及其功能 | 第16-19页 |
| ·猪瘟病毒的致病机理 | 第19-22页 |
| ·猪瘟的诊断 | 第22-24页 |
| ·临床诊断 | 第22页 |
| ·试验室诊断 | 第22-24页 |
| ·猪瘟病毒的细胞培养 | 第24-25页 |
| 第二章 经猪脐静脉血管内皮细胞多次传代的CSFV E2 基因遗传变异的研究 | 第25-37页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·猪脐带 | 第25页 |
| ·细胞培养所需溶液 | 第25-26页 |
| ·细胞培养所需缓冲液及消化液 | 第26页 |
| ·猪瘟脾毒、菌株 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·LB 培养基 | 第27页 |
| ·提取质粒的溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ | 第27页 |
| ·饱和平衡酚（pH8.0）∶氯仿∶异戊醇（体积比25∶24∶1） | 第27页 |
| ·TE 缓冲液、50×TAE 电泳缓冲液 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| ·猪脐静脉血管内皮细胞的分离培养 | 第27-28页 |
| ·猪瘟病毒悬液的制备及内皮细胞的接毒、传代 | 第28-29页 |
| ·引物设计的与合成 | 第29页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第30页 |
| ·PCR 产物与pMD19-Tsimpler vector 的连接 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·连接产物的转化 | 第31页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-35页 |
| ·细胞原代培养 | 第32页 |
| ·细胞接毒结果 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR 产物的电泳结果 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第三章 转染Y8 基因片段细胞株的建立 | 第37-48页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·质粒与菌株 | 第37页 |
| ·载体构建用工具酶和试剂 | 第37页 |
| ·LB 培养基 | 第37-38页 |
| ·细胞培养液、消化液、缓冲液 | 第38页 |
| ·转染试剂与用液 | 第38页 |
| ·仪器设备 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第38-40页 |
| ·阳性重组质粒转染PK15 细胞与转染细胞的鉴定 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-45页 |
| ·Y8 基因的PCR 扩增结果 | 第41-42页 |
| ·重组质粒的鉴定结果 | 第42-43页 |
| ·新霉素（G418）最佳浓度选择结果 | 第43页 |
| ·转染成功的鉴定及转染条件确定结果 | 第43页 |
| ·转染后阳性细胞的获得 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR 的扩增产物的电泳结果 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·pMD19-T simpler vector 和pEGFP-C1 | 第45页 |
| ·脂质体介导的基因转染 | 第45-46页 |
| ·G418 抗性筛选 | 第46页 |
| ·阳性细胞的获得 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附表 | 第56-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 个人简历 | 第67页 |
