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胡杨木葡聚糖内转糖苷酶基因PeXET的克隆及功能分析

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
目录第5-7页
1 引言第7-13页
   ·木葡聚糖内转糖苷酶研究进展第7-11页
     ·XTH基因的结构第7页
     ·XTH的功能第7-10页
       ·酶学活性第7-8页
       ·酶活性的测定第8页
       ·酶作用机制第8-9页
       ·XTHs的生理作用第9-10页
     ·影响XTH基因表达的因素第10-11页
       ·植物激素第10-11页
       ·环境信号第11页
   ·胡杨木葡聚糖内转糖苷酶第11-12页
   ·研究依据及研究内容第12-13页
2 材料与方法第13-24页
   ·实验材料第13-14页
     ·基因,菌种和质粒第13页
       ·植物材料第13页
       ·质粒第13页
       ·菌株第13页
     ·主要工具酶及分子生物学试剂第13页
     ·主要仪器第13页
     ·主要溶液与培养基的配置第13-14页
     ·所用引物(均由北京英俊生物公司合成)第14页
       ·克隆XET所用引物第14页
       ·构建植物表达载体所用引物第14页
   ·实验方法第14-24页
     ·胡杨木葡聚糖内转糖苷酶基因的克隆第14-15页
       ·引物设计与合成第14页
       ·RNA提取第14页
       ·逆转录反应第14页
       ·基因ORF区扩增第14-15页
     ·PEXET基因对烟草的转化及转化植株的鉴定第15-23页
       ·植物表达载体的构建第15-17页
       ·大肠杆菌的转化:第17-18页
       ·大肠杆菌质粒的小量提取(碱裂解法)第18-19页
       ·重组质粒的鉴定及保存第19页
       ·农杆菌的转化第19-20页
       ·农杆菌侵染烟草第20页
       ·转化植株的鉴定第20-23页
     ·转基因烟草的功能分析第23-24页
       ·PeXET的抗盐性分析第23-24页
3 结果与分析第24-34页
   ·胡杨木葡聚糖内转糖苷酶基因的克隆第24-29页
     ·PeXET基因的克隆及基因序列第24页
     ·同源性分析第24-25页
     ·系统发生分析第25-26页
     ·保守区的分析第26页
     ·磷酸化位点的分析第26-27页
     ·基因编码的蛋白疏水性分析第27页
     ·PeXET基因编码的蛋白跨膜区分析第27-28页
     ·PeXET基因编码蛋白信号肽预测第28-29页
   ·PEXET对烟草的转化及转化植株的鉴定第29-34页
     ·PEXET对烟草的转化第29-30页
       ·烟草表达载体pGreen0029-PeXET的构建及转化农杆菌的获得第29页
       ·农杆菌侵染烟草第29-30页
     ·转化植株的鉴定第30-31页
     ·转基因烟草的功能分析第31-34页
       ·转基因烟草的初步抗盐生理测试第31-33页
       ·转基因烟草与野生型烟草的形态学比较第33-34页
4.讨论第34-35页
   ·PEXET基因的结构特点第34页
   ·PEXET的耐盐性第34页
   ·PEXET的形态学特征第34-35页
5 进一步的工作第35页
6 结论第35-36页
参考文献第36-41页
个人简介第41-42页
导师简介第42-43页
致谢第43页

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