摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
1 引言 | 第10-15页 |
·研究mRNA 差异表达的方法及其应用 | 第10-12页 |
·小麦抗叶锈病基因的研究进展 | 第12-13页 |
·电子克隆技术 | 第13页 |
·半定量 RT-PCR | 第13页 |
·研究意义 | 第13-15页 |
2 材料和方法 | 第15-28页 |
·主要仪器及供试试剂 | 第15页 |
·仪器 | 第15页 |
·试剂 | 第15页 |
·供试材料 | 第15-16页 |
·小麦材料 | 第15页 |
·菌种材料 | 第15-16页 |
·电子克隆 | 第16页 |
·电子克隆用到的数据库 | 第16页 |
·生物信息学软件相似性搜索 | 第16页 |
·试验方法 | 第16-28页 |
·小麦叶锈菌的筛选 | 第16-17页 |
·小麦抗叶锈病近等基因系TcLr38 及感病亲本Thatcher 接菌及样品采集 | 第17页 |
·RNA 提取及检测 | 第17-18页 |
·双链cDNA 的合成及检测 | 第18-19页 |
·cDNA-AFLP 分析 | 第19-23页 |
·差异性条带的回收、再扩增和纯化 | 第23-24页 |
·差异片段克隆 | 第24-26页 |
·序列测定及分析 | 第26页 |
·5′-RACE PCR 扩增 | 第26-27页 |
·电子克隆 | 第27页 |
·半定量RT-PCR | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-45页 |
·小麦叶锈菌株的筛选 | 第28页 |
·小麦总RNA 的提取 | 第28-29页 |
·双链cDNA 的合成 | 第29页 |
·预扩增结果 | 第29-30页 |
·选择扩增结果 | 第30-31页 |
·TcLr38 的cDNA-AFLP 分析 | 第31-34页 |
·回收片段的再扩增 | 第34页 |
·差异片段的克隆 | 第34-35页 |
·差异片段的序列分析及测定 | 第35-40页 |
·5′-RACE | 第40-41页 |
·5′-RACE PCR 扩增 | 第40页 |
·5′-RACE PCR 产物序列分析 | 第40-41页 |
·电子克隆 | 第41-43页 |
·电子克隆产物 | 第41-43页 |
·电子克隆PCR 扩增 | 第43页 |
·半定量RT-PCR | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-50页 |
·小麦叶片总RNA 的提取 | 第45页 |
·cDNA-AFLP 在研究差异表达基因中的可用性 | 第45-46页 |
·TcLr38 中差异片段分析 | 第46-48页 |
·关于RACE 技术 | 第48页 |
·关于半定量 RT-PCR 技术 | 第48-49页 |
·展望与计划 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
附录 | 第59-65页 |
附录A | 第59-61页 |
附录B | 第61-63页 |
附录C | 第63-64页 |
附录D | 第64-65页 |
在读期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |