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烟夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的克隆、序列分析、原核及组织特异性表达

致谢第1-8页
摘要第8-10页
1 文献综述第10-27页
   ·昆虫嗅觉系统研究第10-27页
     ·昆虫触角化学感器形态、结构与功能的研究第11-13页
     ·昆虫嗅觉系统相关蛋白的研究第13-23页
       ·气味结合蛋白第14-15页
       ·化学感受蛋白第15-16页
       ·气味受体蛋白第16-19页
       ·气味降解酶第19-20页
       ·感觉神经元膜蛋白第20-23页
     ·昆虫嗅觉系统识别气味的作用机理第23-27页
       ·昆虫嗅觉周边系统识别气味的过程第23-26页
       ·昆虫嗅觉中枢系统识别气味的过程第26-27页
2 引言第27-28页
3 材料与方法第28-40页
   ·供试材料第28-31页
     ·供试昆虫第28页
     ·菌种及质粒第28页
     ·主要试剂及工具酶第28页
     ·试剂盒第28页
     ·缓冲溶液第28-29页
     ·SDS-PAGE电泳试剂第29-30页
     ·Western blot所用溶液第30页
     ·培养基第30页
     ·碱裂解法小量质粒抽提液第30页
     ·其它溶液第30-31页
   ·实验方法第31-40页
     ·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白(HassSNMP)基因的克隆第31-34页
       ·总RNA的提取第31页
       ·反转录第31-32页
       ·引物设计第32页
       ·烟夜蛾HassSNMP基因开放阅读框架(ORF)的扩增第32-33页
       ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测第33页
       ·PCR产物纯化第33页
       ·质粒的连接第33页
       ·感受态细胞的制备(CaCl_2法)第33-34页
       ·连接载体的转化第34页
       ·阳性克隆的筛选第34页
       ·序列测定和分析第34页
     ·烟夜蛾HassSNMP的 原核表达载体的构建、转化及鉴定和表达第34-39页
       ·引物设计第34-35页
       ·烟夜蛾SNMP基因的重新扩增第35页
       ·目的片段和表达载体片段的连接第35页
       ·质粒DNA的提取第35-36页
       ·质粒DNA的双酶切第36页
       ·烟夜蛾HassSNMP基因的原核表达载体构建的程序图第36-37页
       ·重组表达载体的转化与鉴定第37-38页
       ·烟夜蛾HassSNMP融合蛋白的原核表达第38页
       ·表达产物的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测第38页
       ·Western blot分析第38-39页
     ·烟夜蛾HassSNMP基因在不同组织和发育时期的表达第39-40页
       ·去不同组织和发育时期总RNA的提取第39页
       ·总RNA反转录cDNA第39页
       ·核酸纯度和含量的测定第39页
       ·引物设计第39页
       ·半定量PCR扩增第39-40页
       ·琼脂糖电泳检测第40页
4 结果与分析第40-48页
   ·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的扩增、克隆和序列测定第40-44页
     ·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的扩增和克隆第40-41页
     ·序列分析第41-44页
   ·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的原核表达第44-47页
   ·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的时空表达第47-48页
5 结论与讨论第48-52页
   ·结论第48-49页
   ·讨论第49-52页
参考文献第52-65页
ABSTRACT第65-66页

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