致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-27页 |
·昆虫嗅觉系统研究 | 第10-27页 |
·昆虫触角化学感器形态、结构与功能的研究 | 第11-13页 |
·昆虫嗅觉系统相关蛋白的研究 | 第13-23页 |
·气味结合蛋白 | 第14-15页 |
·化学感受蛋白 | 第15-16页 |
·气味受体蛋白 | 第16-19页 |
·气味降解酶 | 第19-20页 |
·感觉神经元膜蛋白 | 第20-23页 |
·昆虫嗅觉系统识别气味的作用机理 | 第23-27页 |
·昆虫嗅觉周边系统识别气味的过程 | 第23-26页 |
·昆虫嗅觉中枢系统识别气味的过程 | 第26-27页 |
2 引言 | 第27-28页 |
3 材料与方法 | 第28-40页 |
·供试材料 | 第28-31页 |
·供试昆虫 | 第28页 |
·菌种及质粒 | 第28页 |
·主要试剂及工具酶 | 第28页 |
·试剂盒 | 第28页 |
·缓冲溶液 | 第28-29页 |
·SDS-PAGE电泳试剂 | 第29-30页 |
·Western blot所用溶液 | 第30页 |
·培养基 | 第30页 |
·碱裂解法小量质粒抽提液 | 第30页 |
·其它溶液 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-40页 |
·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白(HassSNMP)基因的克隆 | 第31-34页 |
·总RNA的提取 | 第31页 |
·反转录 | 第31-32页 |
·引物设计 | 第32页 |
·烟夜蛾HassSNMP基因开放阅读框架(ORF)的扩增 | 第32-33页 |
·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第33页 |
·PCR产物纯化 | 第33页 |
·质粒的连接 | 第33页 |
·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第33-34页 |
·连接载体的转化 | 第34页 |
·阳性克隆的筛选 | 第34页 |
·序列测定和分析 | 第34页 |
·烟夜蛾HassSNMP的 原核表达载体的构建、转化及鉴定和表达 | 第34-39页 |
·引物设计 | 第34-35页 |
·烟夜蛾SNMP基因的重新扩增 | 第35页 |
·目的片段和表达载体片段的连接 | 第35页 |
·质粒DNA的提取 | 第35-36页 |
·质粒DNA的双酶切 | 第36页 |
·烟夜蛾HassSNMP基因的原核表达载体构建的程序图 | 第36-37页 |
·重组表达载体的转化与鉴定 | 第37-38页 |
·烟夜蛾HassSNMP融合蛋白的原核表达 | 第38页 |
·表达产物的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第38页 |
·Western blot分析 | 第38-39页 |
·烟夜蛾HassSNMP基因在不同组织和发育时期的表达 | 第39-40页 |
·去不同组织和发育时期总RNA的提取 | 第39页 |
·总RNA反转录cDNA | 第39页 |
·核酸纯度和含量的测定 | 第39页 |
·引物设计 | 第39页 |
·半定量PCR扩增 | 第39-40页 |
·琼脂糖电泳检测 | 第40页 |
4 结果与分析 | 第40-48页 |
·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的扩增、克隆和序列测定 | 第40-44页 |
·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的扩增和克隆 | 第40-41页 |
·序列分析 | 第41-44页 |
·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的原核表达 | 第44-47页 |
·烟夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的时空表达 | 第47-48页 |
5 结论与讨论 | 第48-52页 |
·结论 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-52页 |
参考文献 | 第52-65页 |
ABSTRACT | 第65-66页 |