| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-18页 |
| 主要缩略词 | 第18-19页 |
| 引言 | 第19-31页 |
| 1. 立题背景 | 第19-20页 |
| 2. 文献综述 | 第20-31页 |
| ·水稻突变体创制方法和应用 | 第20-24页 |
| ·自然突变 | 第20页 |
| ·物理和化学突变 | 第20-21页 |
| ·T-DNA 插入突变 | 第21-24页 |
| ·转座子插入突变 | 第22-23页 |
| ·激活标签 | 第23页 |
| ·捕获标签 | 第23-24页 |
| ·胚乳发育分子生物学研究 | 第24-25页 |
| ·淀粉代谢分子生物学研究 | 第25-31页 |
| ·淀粉代谢相关酶研究 | 第25-29页 |
| ·ADPG 焦磷酸化酶(AGPase) | 第26-27页 |
| ·淀粉合成酶 | 第27页 |
| ·淀粉分支酶（SBE） | 第27-28页 |
| ·淀粉去分支酶（DBE ） | 第28页 |
| ·淀粉磷酸化酶（SP） | 第28-29页 |
| ·岐化酶（D-enzyme） | 第29页 |
| ·淀粉代谢调控研究 | 第29-31页 |
| 第一章、水稻胚乳发育相关启动子捕获系的筛选 | 第31-46页 |
| 1. 材料与方法 | 第31-36页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·水稻材料 | 第31页 |
| ·水稻T-DNA 插入启动子捕获植物表达载体 | 第31-32页 |
| ·实验所用引物 | 第32页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-36页 |
| ·载体构建的一些基本方法 | 第33页 |
| ·水稻农杆菌介导转化方法 | 第33-34页 |
| ·水稻T-DNA 插入启动子捕获系抗性植株筛选 | 第34-35页 |
| ·水稻T-DNA 插入启动子捕获系的PCR 分子检测 | 第35页 |
| ·水稻T-DNA 插入启动子捕获系的GUS 表达检测 | 第35页 |
| ·水稻T-DNA 插入启动子捕获系的southern blot 分子检测 | 第35页 |
| ·水稻胚乳发育相关启动子捕获系侧翼序列的获得及分析 | 第35-36页 |
| ·水稻胚乳发育相关启动子捕获系插入位点的验证 | 第36页 |
| 2. 结果与分析 | 第36-42页 |
| ·农杆菌介导转法获得水稻T-DNA 插入启动子捕获系及抗性植株筛选 | 第36页 |
| ·水稻T-DNA 插入启动子捕获系的PCR 分子检测 | 第36-37页 |
| ·水稻T-DNA 插入启动子捕获系的GUS 表达检测 | 第37-38页 |
| ·水稻T-DNA 插入启动子捕获系的遗传分析 | 第38-40页 |
| ·水稻启动子捕获系的southern blot 检测 | 第40页 |
| ·水稻胚乳发育相关启动子捕获系侧翼序列的获得及插入位点验证 | 第40-41页 |
| ·水稻胚乳发育相关启动子捕获系候选基因的生物信息学分析 | 第41-42页 |
| 3. 讨论 | 第42-46页 |
| ·水稻突变体创制的重要性 | 第42页 |
| ·水稻启动子捕获体系建立 | 第42-44页 |
| ·启动子捕获体系条件选择 | 第42-43页 |
| ·启动子捕获的优点 | 第43-44页 |
| ·水稻T-DNA 插入标签研究展望 | 第44-46页 |
| 第二章、一个水稻胚乳特异表达启动子捕获系的初步分析 | 第46-56页 |
| 1. 材料与方法 | 第46-48页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·水稻材料 | 第46页 |
| ·菌株 | 第46页 |
| ·质粒 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-48页 |
| ·OsPtr1 基因生物信息学分析 | 第47页 |
| ·OsPtr1 基因RT-PCR 表达分析 | 第47页 |
| ·Os Ptr1 基因分离 | 第47页 |
| ·Os Ptr1 基因过表达载体构建及水稻转化植株获得 | 第47-48页 |
| ·Os Ptr1 基因的亚细胞定位分析 | 第48页 |
| ·无终止子OsPtr1 基因的扩增 | 第48页 |
| ·OsPtr1-GFP 融合表达载体构建 | 第48页 |
| ·基因枪法获得OsPtr1-GFP 融合蛋白的瞬时表达 | 第48页 |
| ·水稻蛋白含量及氨基酸含量分析 | 第48页 |
| 2. 结果与分析 | 第48-53页 |
| ·OsPtr1 基因生物信息学分析 | 第48-49页 |
| ·OsPtr1 基因的表达模式分析 | 第49页 |
| ·OsPtr1 基因分离 | 第49页 |
| ·OsPtr1-GFP 融合蛋白的载体构建 | 第49-50页 |
| ·OsPtr1 基因的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| ·OsPtr1 基因过表达载体构建及水稻转化植株获得 | 第51页 |
| ·转过表达OsPtr1 基因水稻植株southern blot 分析 | 第51-52页 |
| ·稻米含氮代谢物质分析 | 第52-53页 |
| 3. 讨论 | 第53-56页 |
| ·利用T-DNA 标签进行水稻胚乳发育相关突变体筛选 | 第53-54页 |
| ·氮代谢及肽转运的机理 | 第54-55页 |
| ·肽转运对胚乳发育的影响 | 第55-56页 |
| 第三章、Susiba2 和OsSusiba2 基因在水稻淀粉代谢调控中的功能分析 | 第56-72页 |
| 1、材料与方法 | 第56-60页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·载体及宿主菌 | 第56-57页 |
| ·农杆菌介导转化受体 | 第57页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-60页 |
| ·质粒转化、提取和转化子的鉴定 | 第57页 |
| ·农杆菌介导法转化水稻 | 第57页 |
| ·转基因水稻抗性植株筛选 | 第57页 |
| ·转基因水稻Southern blot 检测 | 第57页 |
| ·水稻转基因植株northern blot 分析 | 第57-59页 |
| ·RNA 提取 | 第57页 |
| ·溶液配制 | 第57-58页 |
| ·样品制备和印迹 | 第58-59页 |
| ·预杂交 | 第59页 |
| ·标记 | 第59页 |
| ·放射性物质的纯化 | 第59页 |
| ·信号检测 | 第59页 |
| ·稻米直链淀粉含量测定 | 第59页 |
| ·转基因水稻植株产量性状的分析 | 第59-60页 |
| ·转基因水稻植株碳水化合物的分配 | 第60页 |
| ·糖诱导下转基因水稻的表达分析 | 第60页 |
| 2. 结果与分析 | 第60-69页 |
| ·Susiba2 和OsSusiba2 基因植物表达载体的构建 | 第60-62页 |
| ·Susiba2 过表达植物表达载体的构建 | 第60页 |
| ·OsSusiba2 基因反义RNA 植物表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·OsSusiba2 基因RNAi 干扰植物表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·农杆菌介导转化获得水稻转基因植株 | 第62-64页 |
| ·转基因水稻植株southern blot 分析 | 第64页 |
| ·转基因水稻northern blot 分析 | 第64-65页 |
| ·糖诱导下转基因水稻的表达分析 | 第65-66页 |
| ·转基因稻米直链淀粉含量分析 | 第66页 |
| ·转基因水稻植株表型分析 | 第66-67页 |
| ·转基因水稻的产量性状分析 | 第67-69页 |
| ·转基因水稻碳水化合物分配 | 第69页 |
| 3、讨论 | 第69-72页 |
| ·糖感知和信号传导在植物碳水化合物代谢中的作用 | 第69-70页 |
| ·糖诱导下的淀粉代谢相关基因研究 | 第70页 |
| ·水稻胚乳淀粉代谢调控研究 | 第70-72页 |
| 第四章、结论及创新点 | 第72-74页 |
| 主要参考文献 | 第74-83页 |
| 附录1：常用分子生物学实验方法 | 第83-87页 |
| 附录2：水稻启动子捕获系中在不同组织器官中GUS 活性表达 | 第87-89页 |
| 附录3：Tail-PCR 扩增程序及引物 | 第89-91页 |
| 附录4：Southern blot 杂交程序 | 第91-96页 |
| 附录5: PlantCare 预测OsPtr1 启动子的调控元件 | 第96-99页 |
| 附录6: OsPtr1-GFP 融合表达载体的构建 | 第99-100页 |
| 附录7：OsPtr1 基因过表达载体构建 | 第100-101页 |
| 附录8：OsSusiba2 和Susiba2 基因植物表达载体构建 | 第101-103页 |
| 附录9：水稻RNA 提取步骤 | 第103页 |
| 附录10：本研究所用基本培养基配方 | 第103-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
